神农架林区并殖吸虫病自然疫源地调查＊

朱 敬，朱艳霞，朱名胜，卫荣华

神农架林区位于湖北省西北部，北接豫西，西邻陕西，南与四川毗邻。全区海拔在1 000～3 000m，原始森林颇多，调查区域海拔多在1 500～2 000m之间，其间野生动物繁多，经常出没在溪谷之间。溪水常年缓流，溪旁杂草丛生，沟底常有淡水螺、蟹孳生。居民多临沟河居住，食蟹现象极为普遍，因而肺吸虫病病人时有发现［1－2］。为了解神农架林区人群肺吸虫病感染情况及流行特征，为控制和防治肺吸虫病提供科学依据，本文采用肺吸虫病金标渗滤试剂盒（DIGFA－kit）对神农架林区进行人群血清学调查和肺吸虫病自然疫源地的分布及虫种进行了调查研究，结果报道如下。

1 材料与方法

1．1 中间宿主调查 神农架林区山溪间捕捉溪水蟹、螺，鉴定种类。蟹类碾碎、人工消化液消化，反复水洗沉淀，取沉淀物镜检囊蚴；螺类采用玻片压碎法镜检尾蚴。囊蚴和尾蚴以形态大小及结构特征作初步虫种鉴定。

1．2 动物宿主调查 采集家猫、家犬等动物粪便，经水洗沉淀法和直接涂片法镜检肺吸虫虫卵。阳性者解剖动物，收集肝、肺等脏器或组织检查成虫和虫卵，收集野生动物果子狸、野獾等动物肺脏，查找肺吸虫成虫。

1．3 人群感染调查 1 128份血清标本采自神农架林区松柏镇中、小学生，男617人，女511人，年龄为6～15岁，平均10．27岁。

1．4 试剂盒 肺吸虫病抗体快速检测（金标渗滤法）试剂盒由浙江省医学科学院生物工程研究所提供；ELISA平行对照检测试剂盒由深圳市绿瀚生物技术有限公司提供，均在有效期内使用。

1．5 试验方法

1．5．1 DIGFA－kit 取试剂盒置一平面上，加洗脱液1滴（100μL），使加样孔上NC膜湿润；加待测血清25μL，待渗入；加洗脱液1滴（100μL），洗去未结合抗体；加胶体金－羊抗人Ig G标记物1滴（100 μL），待渗入；加洗脱液2滴（200μL），渗入后肉眼判断结果。中央圆孔NC膜上出现红色圆点为阳性；未出现红色圆点，仅留白色或淡红色背景为阴性。

1．5．2 ELISA 操作方法和结果判定按说明书要求进行。每次检测均设阳性、阴性和空白对照。血清学试验抗体阳性者作病史调查。

1．6 动物感染虫种鉴定 分离出的囊蚴经计数后感染健康家犬和大鼠，由院实验动物中心提供。犬经口饲囊蚴100～300个／条，大鼠经腹腔注射囊蚴20个／只。感染90 d后分别剖检肺脏、肝脏及胸腹腔等处，查找成虫虫体，并进行虫种鉴定。

2 结 果

2．1 第一中间宿主分布 在调查区境内主要水系溪沟捕捉螺类，标本经鉴定为拟钉螺（Tricul a sp．），共解剖1 988只，发现阳性螺18只，阳性率为0．91%，从螺体内分离出的子雷蚴为腊肠型，肠管如袋状，内有12个左右大小不等的短尾蚴，短尾蚴为微尾型，排泄囊为倒三角形，末端可见类球形的短尾。

2．2 第二中间宿主分布 所查蟹体中均查出肺吸虫囊蚴，共检查1 313只蟹，检出囊蚴4 219个，平均每只蟹含囊蚴3．21个，其中锯齿华溪蟹（Sinopotamon denticul atu m）、光泽华溪蟹（S．davidi）和陕西华西蟹（S．shensiense）每只蟹含囊蚴分别为3．70个（879／3256）、2．28 个 （361／822）和 1．93 个 （73／141）。囊蚴呈球形或类圆形，有两层囊壁，外壁薄、内壁厚，内有弯曲的肠盲管2根，在两盲肠中间有一充满黑色颗粒的排泄囊；测量新鲜囊蚴39个，平均大小为421．48μm×423．76μm。

2．3 动物宿主感染情况 共检查29只家猫粪便，其中15只发现有肺吸虫虫卵，虫卵金黄色，形状多数不对称，卵壳厚薄不匀，卵盖明显，测量20个新鲜虫卵，平均大小为76．44μm×44．24μm，剖检后获得斯氏狸殖吸虫成虫47条；收集果子狸肺脏19份，其中3份查获斯氏狸殖吸虫成虫11条，家猫和果子狸的自然感染率分别为51．72%和15．79%。另检查15只家犬粪便，3只野獾肺脏，均为阴性。

2．4 人群感染情况 DIGFA－kit检测1 128份血清样本，阳性76份（男41人，女35人），阳性率为6．74%。ELISA平行对照阳性符合率为98．7%（75／76），检测1 052份阴性人群血清均为阴性结果。阳性者中有生吃或半生吃溪蟹者占76．32%（58／76），其余均有饮生水的习惯。

2．5 动物感染虫种鉴定 感染家犬和大白鼠90 d后在粪便中均查获虫卵，90～120 d剖检，从肝、肺、胸腔及腹腔中检获成虫，新鲜虫体标本为粉红色，蠕动活跃，背部隆起，腹面扁平，长条形。测量17个人工感染的新鲜成虫平均大小为6．21 mm×3．38 mm；成虫经压平固定染色后，测量15个成虫平均大小为7．88 mm×3．78 mm。口吸盘平均大小为479．32μm×578．56μm，腹吸盘平均大小为676．12 μm×697．50μm，位于体前1／3，卵巢位于腹吸盘后方一段距离的一侧，分支细而多，中心体明显。睾丸多呈狭长型，分支简单，成虫皮棘以单生型为主。虫体经鉴定为斯氏狸殖吸虫（Par agoni mus surj abini）。

3 讨 论

斯氏狸殖吸虫是中国独有的并殖吸虫虫种，斯氏狸殖吸虫病主要是生食或半生食含有囊蚴的蟹而感染。调查结果表明，湖北省神农架林区自然环境适宜于斯氏狸殖吸虫各阶段宿主的孳生。近年来经本室确诊的肺吸虫病病人主要来自城区及各县、市，神农架林区，以及毗邻的陕西、四川所辖县市，且多具有幼虫移行症为特征的斯氏狸殖吸虫病的临床表现。与陈心陶［3］描述的斯氏狸殖吸虫、钟慧澜等［4－5］描述的四川并殖吸虫及会同并殖吸虫对人体的致病性类似，病人除具有典型的游走性皮下包块外，还可移行侵犯多个脏器致损伤［6－7］。本次调查神农架林区中、小学生的感染率为6．74%，且多有食蟹史，第一中间宿主拟钉螺肺吸虫雷蚴和尾蚴感染率为0．91%，第二中间宿主蟹平均每只感染斯氏肺吸虫囊蚴3．21个，并在人工感染的保虫宿主家犬及大鼠和自然感染的家猫及果子狸体内检获斯氏狸殖吸虫成虫，初步证实该地区有斯氏狸殖吸虫病的流行，为斯氏狸殖吸虫的自然疫源地。

近年来报道应用卫氏并殖吸虫成虫抗原（Pw A）金标渗滤试剂盒（DIGFA）检测同源肺吸虫病病人血清抗体敏感性可达98．8%和98．9%，特异性可达93．0%和94．8%［8－9］，证明应用于卫氏肺吸虫病流行地区具有敏感性高、特异性强、操作简便、快速，不需要特殊仪器设备等优点，适用于临床检验和现场应用。湖北省神农架林区经调查证实是斯氏狸殖吸虫病流行地区，本研究中人群血清阳性率为6．74%，ELISA平行对照阳性符合率为98．7%，结果证明DIGFA－kit与ELISA在斯氏肺吸虫病流行地区亦具有同等的现场应用价值。

神农架林区区域内生态环境基本相同，在人群中流行的肺吸虫只有斯氏狸殖吸虫，并且作为一种在野生动物之间和家养动物与野生动物间传播的人兽共患病，可能会较长时间存在并继续保持流行。从自然感染动物上看，猫和果子狸在流行病学上具有一定的意义。家犬人工感染成功率高，但自然感染率低，作为保虫宿主不构成肺吸虫病的传播。由于神农架林区原始森林覆盖面大等地理环境因素，可能会有更多的野生动物作为保虫宿主对本病的流行具有实际意义。

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