荧光定量PCR法检测丙型肝炎病毒核酸的临床意义

王玉红，胡晓芳，关慧霞，齐志丹，高瑞环，王 静

（沈阳军区总医院 检验科，辽宁 沈阳110840）

丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病，HCV感染可导致肝脏慢性炎症、坏死和纤维化，部分患者甚至可发展为肝硬化及肝癌［1］，对人类的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。抗－HCV检测可反映HCV的感染或既往感染，而HCV－RNA定量检测是反映HCV复制的特征指标，是抗病毒治疗的依据。本文对277例抗－HCV阳性患者同时进行HCV－RNA定量检测，并进行对比分析，结果进一步表明二者同时检测，对丙肝感染的诊断、抗病毒治疗时机的选择和疗效观察具有重要的意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 277例抗－HCV阳性血清标本均来自我院2008年12月至2010年12月门诊及住院患者。

1.2 方法 抗－HCV采用ELISA法测定，试剂由厦门新创生物工程公司生产提供。HCV－RNA定量检测采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ－RT－PCR）法，仪器为美国 ABI公司7300型荧光定量PCR仪，试剂由上海科华生物技术有限公司提供，所有标本严格按照试剂说明书操作及判定结果。

2 结果

277例抗－HCV 阳性患者中，有213例（76.90%）HCV－RNA定量结果≥1.0×103IU／ml，病毒含量在1.0×103～1.6×108IU／ml之间，有64例（23.10%）HCV－RNA 定量结果＜1.0×103IU／ml。

3 讨论

本研究结果显示277例抗－HCV阳性中，HCVRNA含量≥1.0×103IU／ml，占76.90%，比文献报道60%－70% 略 高［2］。HCV－RNA 定 量 ＜1.0×103IU／ml的占23.10%。二者结果差异主要来自实验方法学和临床表现两个方面，具体原因为：①抗－HCV采用ELISA法检测，由于受方法学的影响，有非特异性反应可出现假阳性［3］。②标本不及时检测或保存不当，标本本身或环境中的RNA降解酶使RNA降解，从而HCV－RNA含量的检测结果出现假阴性［4］。③实时荧光定量PCR法检测HCV－RNA含量，灵敏度虽然很高，但有一定的阈值，当患者体内HCV－RNA病毒含量低于检测下限［5］，也无法检出。④当感染HCV患者接受抗病毒治疗后，HCV－RNA复制受限或出现变异，HCVRNA亦无法检出。⑤抗－HCV阳性仅提示有HCV感染或既往感染，当体内HCV－RNA病毒被清除后，其抗体仍可持续1－10年［6］。⑥丙肝感染者体内HCV－RNA病毒含量的高低，随着病程变化，存在间隙性阴性［7］。

综上所述，抗－HCV检测虽然可间接反映HCV的感染或既往感染，但不能作为丙肝感染的诊断及抗病毒治疗的依据。因此临床对抗－HCV阳性患者必须进行HCV－RNA检测，HCV－RNA定量检测≥1.0×103IU／ml者可考虑HCV感染并选择抗病毒治疗；对抗－HCV阳性 HCV－RNA定量检测＜1.0×103IU／ml患者必须定期复检HCV－RNA，以关注病程的变化。即抗－HCV阳性患者同时进行HCVRNA定量检测具有重要的临床意义。

［1］华 瑞，王 峰，牛俊奇.我国慢性丙型肝炎治疗进展［J］.中国实用内科学杂志，2005，25（9）：778.

［2］周永香.丙型肝炎病毒抗体与丙型肝炎病毒核糖核酸的关系［J］.医学理论与实践，2003，16（8）：890.

［3］庄 辉.重视丙型肝炎的研究［J］.中华肝脏病杂志，2004，12（2）：65.

［4］赵 颖，魏 军，王菊英.丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值［J］.宁夏医学杂志，2005，27（4）：233.

［5］黄大毛，范杰斐，唐发清.血清中HCV抗体与HCV－RNA检测在临床中的应用［J］.实用预防医学杂志，2007，14（5）：1550.

［6］崔艳香，邱香廷，王新花，等.FQ－PCR检测丙肝病毒核酸的临床价值［J］.中华实用中西医杂志，2005年，9（18）：1302.

［7］季 阳，庄 文，杨 翠，等.丙型肝炎病毒感染的l0名献血者的追踪研究［J］.中国输血杂志，2004，17（6）：399.