张静蕊 申晓环 迟宝霞 张丹
Coombs试验(DAT)是在免疫血液学中经常使用的一种方法,尤其在自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊断和输血科的交叉配血试验中是一种传统的“金标法”。患者会由于很多因素出现DAT阳性,但有时献血员也会出现DAT阳性,致交叉配血不合,这是由于我国目前采供血机构和医疗机构极少对献血员血液进行DAT所致。献血员DAT阳性对临床输血安全造成很大影响,值得输血工作者的关注。笔者在输血工作中发现2例献血员DAT阳性致交叉配血不合的案例,报告如下。
1.1 一般资料 2例献血员滤白红细胞悬液均为辽宁省血液中心提供,我院用其所附交叉配血样本进行实验;2例受血者为我院择期手术备血的住院患者,均无输血史及输血反应史,红细胞不完全抗体筛选为阴性。
1.2 试剂 Liss/coombs微柱凝胶卡(抗IgG+C3d)、孵育器、离心机均为瑞士DiaMed公司产品;DG Gel DC Scan微柱凝胶卡为美国Diagnostic Grifols公司产品;红细胞血型抗体筛选细胞为上海血液生物医药有限责任公司产品。
1.3 方法
1.3.1 交叉配血试验:按说明书操作。
1.3.2 不完全抗体的筛选:1#、2#、3#抗体筛选细胞各 50 μl加入Liss/coombs微柱凝胶卡中,再分别加入献血员血清样本25 μl,孵育 15 min,离心后观察结果。
1.3.3 直接抗人球蛋白定性试验:取低离子液配制的0.8%献血员红细胞悬液50 μl加入Liss/coombs微柱凝胶卡中,孵育15 min,离心后观察结果。
1.3.4 直接抗人球蛋白分型试验:对于方法1.3.3试验阳性的献血员血标本,应用DG Gel DC Scan微柱凝胶卡进行分型,按说明书操作。
2例献血员与受血者皆为交叉配血不合,且献血员的不完全抗体筛选均为阴性,献血员DAT均为阳性,分型鉴定结果为IgG+C3d致敏。见表1。
表1 献血员血型血清学实验结果
DAT是检测红细胞表面是否存在相应免疫球蛋白或补体的一种方法。据统计,献血员中 DAT阳性者为1/1 000~1/9 000[1],自从我国实行无偿献血制度以来,献血员的来源十分广泛。进行献血体检时,试验性检测项目主要是血红蛋白、肝功能和传染性指标。一些没有症状的自身免疫性疾病患者可能也参与了献血,虽然上述试验性检测项目符合献血要求,但因可能存在致敏红细胞和(或)不完全抗体,可引起主次侧配血不合,这种情况的血液一旦确认就不能输注。导致DAT阳性的因素很多,如应用某些药物产生药物抗体、病毒感染、自身免疫性疾病、溶血性贫血、慢性阻塞性肺疾病等。究其原因是红细胞的自身抗体或免疫复合物黏附在红细胞膜上CR受体所引起[2]。
有文献报道,某些健康献血员DAT阳性往往预示着AIHA或其他自身免疫性疾病[3]。Bareford等[4]通过对26例DAT阳性的健康献血员20年的随诊发现,26例中的9例DAT仍为阳性,其中1例已发展为AIHA,其余17例虽然DAT仍为阴性,但其中7例通过酶法仍可检测到自身抗体。Grost等[5]对14年中65名检出DAT阳性的32名献血员进行复检,发现随着献血员年龄的增长,DAT阳性程度也会增加,这说明健康献血员DAT阳性可能与年龄有关。Win等[6]通过研究发现,健康献血员的DAT阳性可能与抗磷脂抗体存在有关,抗磷脂抗体是导致献血员DAT阳性的一个偶然因素。本文通过血型血清学实验证明,2例交叉配血不合系献血员DAT阳性所致,但鉴于目前血液中心对献血员个人信息的保密限制,笔者未能联系到相关献血员,并进一步查明原因。
另据文献报道,72%DAT阳性的血源会缩短红细胞寿命,输注给患者后,会影响患者病情[7]。因此,检测献血员DAT和(或)不完全抗体,可以方便临床交叉配血,防范和减少临床输血不良反应,有利于输血安全,对DAT阳性和(或)不完全抗体阳性的献血员,应及时通知,以查明原因,有利于治疗。
1 刘达庄主编.免疫血液学.第1版.上海:上海科学技术出版社,2002.145-157.
2 郭峰主编.现代红细胞免疫学.第1版.上海:第二军医大学出版社,2002.68-70.
3 严康峰,谢敬文,莫锦政.无偿献血者同种不规则抗体发生率的研究.临床输血与检验,2003,5:195-196.
4 Bareford D,Longster G,Gilks L,et al.Follow-up of normal individuals with a positive antiglobulin test.Scand J Haematol,1985,35:348-353.
5 Gorst DW,Rawlinson VI,Merry AH,et al.Positive direct antiglobulin test in normal individuals.Vox Sang,1980,38:99-105.
6 Win N,Islam SI,Peterkin MA,et al.Positive direct antiglobulin test due to antiphospholipid antibodies in normal healthy blood donors.Vox Sang,1997,72:182-184.
7 Habibi B,Muller A,Lelong F,et al.Red cell autoimmunization in a"normal"population 63 cases.Nouv Presse Med,1980,9:3253-3257.