吴林菁 王祥培 吴红梅 杨 烨 徐 锋
(贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
头花蓼为蓼科蓼属植物头花蓼(Polygonum capitatum Buch.-Ham ex D.Don)的干燥全草或地上部分,为贵州苗族用药,具有清热利湿,解毒止痛,活血散瘀以及利尿通淋之功效,主治泌尿系统感染、血尿、湿疹、肾盂肾炎等症[1]。目前,苗药头花蓼与其易混淆品头状蓼Polygonum nepalense Meisn.的鉴别研究主要采用高效液相色谱法,并且它们之间的峰数、相对保留时间有明显的差异[2]。但头花蓼的紫外光谱特征与其易混淆品是否有差异,目前未见研究报道。为了丰富苗药头花蓼的鉴别方法,本文采用紫外谱线组法对苗药头花蓼和头状蓼进行研究,以期为头花蓼药材与其混淆品的鉴别提供参考,也为苗药头花蓼进一步研究和开发奠定基础。
1.1 药材:头花蓼 Polygonum capitatum Buch.-Ham.ex D.Don与头状蓼Polygonum nepalense Meisn.均采自四川峨眉山。均经鉴定并由成都中医药大学万德光教授核定。
1.2 仪器及试剂:贝克曼DU-70可见-紫外分光光度计,PerkinElmer Lambda 35可见-紫外分光光度计,石油醚、氯仿、无水乙醇、KBr、甲醇为分析纯,水为重蒸水,其它试剂均为分析纯。
2.1 供试品溶液的制备
2.1.1 水、无水乙醇、氯仿、石油醚提取液的制备:精密称取头花蓼、头状蓼细粉各4份,每份0.5g,置50 ml碘量瓶中,分别加入蒸馏水、无水乙醇、氯仿、石油醚各20ml,密塞,室温放置,浸泡过夜,过滤,即得。滤液供可见-紫外光谱鉴别用。
2.1.2 甲醇提取液的制备:精密称取头花蓼、头状蓼细粉0.5g,置50mL量瓶中,加甲醇至刻度,密塞,静置过夜,超声提取30min,滤过,即得。滤液供可见-紫外光谱鉴别用。
2.2 测定方法
2.2.1 水、无水乙醇、氯仿、石油醚提取液的测定:提取液用相应的溶剂适当稀释后,置石英比色杯中,以相应溶剂做空白对照,在可见-紫外分光光度计上扫描。
2.2.2 甲醇提取液的测定:吸取滤液2ml分别置于25ml容量瓶中,分别加入60%乙醇至6.0ml,再分别加入3.0ml0.1mol/LAlCl3、5.0ml1.0mol/LKAc 溶液,加 60% 乙醇稀释至刻度,摇匀,放置40min。以第一瓶为空白溶液,在波长300~700nm进行扫描,记录色谱图。
2.3 实验结果
利用切线作图确定并读取最大吸收峰位值,以峰位值、峰数目作为该溶剂紫外光谱谱线组的光谱特征数据。头花蓼及头状蓼可见-紫外谱线组谱线最大吸收峰数目及峰位值见表1,见图1~7。
图1 头花蓼水提液的紫外光谱图
图2 头状蓼水提液的紫外光谱图
图3 头花蓼无水乙醇提取液的紫外光谱图
图4 头状蓼无水乙醇提取液的紫外光谱图
表1 头花蓼及头状蓼的可见-紫外光谱特征(nm)(n=3)
图5 头花蓼与头状蓼氯仿提取液的紫外光谱图
图6 头花蓼与头状蓼石油醚提取液的紫外光谱图
图7 头花蓼与头状蓼显色后的紫外光谱图
紫外光谱的特征是由化合物的结构所确定,不同品种、不同溶剂其峰形、峰位、峰数目各不相同,可用来区分鉴别中药材。在使用紫外光谱鉴别中药材时发现,一些亲缘关系较近的药材,由于成分相差不大,用通常的紫外光谱法难以达到鉴别的目的,则可采用多溶剂紫外光谱法,即分别检测数种不同极性溶剂提取液的紫外吸收,通过综合比较其图谱的差异,亦可获得较好的鉴别效果。
从紫外光谱实验结果来看,头花蓼的水提取液及无水乙醇提取液与头状蓼的水提取液及无水乙醇提取液的紫外光谱最大吸收峰数目及峰位置差异不明显,只有两者的氯仿和石油醚提取液这2条紫外谱线图象、最大吸收峰数目和峰位值有差异,各具有特征性,具有明显的鉴别指标,达到了鉴别药材的目的。
经实验研究发现,头花蓼与头状蓼的甲醇提取液紫外光谱图相同,但显色后,头花蓼在可见光区412nm处有一明显的吸收峰,可作为鉴定的依据。
[1]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准[S].贵阳:贵州科技出版社,2003:147.
[2]吴红梅,王祥培,万德光.头花蓼和头状蓼的液相色谱鉴别研究[J].贵阳中医学院学报,2008,30(2):72-73.