张养华 刘 萍
(1邹城市人民医院检验科,山东 济宁 273500; 2 山东大学公共卫生学院卫生检验系,山东 济南 250012)
按照红细胞大小和红细胞中血红蛋白的含量将贫血分类,小细胞低色素性贫血是红细胞体积小,红细胞内血红蛋白的含量低,主要见于缺铁性贫血[1],小细胞低色素性贫血大都是缺铁造成的,也是我国儿童最常见的血液系统疾病之一。人们的生活水平虽然越来越高,但缺铁性贫血比例仍然很大,已经有研究显示,铜、锌、钙、镁、铁、铅六种金属元素都与造血功能有关[2-8]。本研究以2011 年 4月~ 2012 年 4月邹城市人民医院收治的60例小细胞低色素性贫血患儿做为研究对象,以同期的60例健康小儿做为对照。探讨儿童小细胞低色素性贫血与全血中铜、锌、钙、镁、铁、铅元素关系,为小细胞低色素性贫血的临床治疗提供依据。
1.1研究对象的选择 研究对象为2011 年4 月~ 2012 年4 月邹城市人民医院收治的小细胞低色素性贫血患儿60例,年龄在2~6岁的学龄前儿童,男32 例,女28 例。用SYSMEX -2100做血常规检查且符合小细胞低色素的标准[Hb<110 g/L,红细胞平均体积( MCV)<80 fl, 红细胞平均血红蛋白量(MCH)<26 pg,平均血红蛋白浓度(MCHC)<0.31 g/L],主要是轻,中度贫血。除小细胞低色素性贫血外,未见其他疾病,病人来自邹城镇,对照组60例为体检健康儿童(年龄、身高、体重、营养状况无统计学差异),各项血常规检查指标均在正常范围内。学龄前健康儿童来自邹城镇。
1.2实验室检测方法
1.2.1仪器和试剂 原子吸收光谱仪(北京博晖创新光电技术公司),配套装置( 乙炔气、氩气、通风设备、工作台、空气压缩机、电脑、打印机);铅空心阴极灯,钙空心阴极灯,铜锌复合空心阴极灯,镁铁复合空心阴极灯 ;对血样进行处理的稀释液有测铅元素稀释液(纯水、磷酸氢二铵、曲拉通、血清);测铜、锌、钙、镁、铁五元素的稀释液(纯水、氯化镧、曲拉通、血清);校准溶液和质控品由博晖公司提供配套试剂。
1.2.2儿童血标本的采集 (1)采血环境清洁、无灰尘并且保持一定的湿度。(2)儿童采血前采血部位(无名指末端采集)使用医用酒精进行皮肤消毒,然后用无铅干棉签吸干皮肤表面的酒精。(3)采血方法,采血严格按照医疗卫生操作规程要求,轻轻捏紧被测儿童手指使指肚部分皮肤绷紧,用一次采血针快速刺穿指肚外侧皮肤,使血液自然流出,第一滴血用滤纸擦拭弃掉。(4)用一次性定量取血管准确吸取规定量(铜、锌、钙、镁、铁为20 μl ,铅40 μl)儿童指血,管尖外壁附着的血液用滤纸拭去。采血后将一次性定量取血管伸入装有测量铜、锌、钙、镁、铁五元素的稀释液(纯水、氯化镧、曲拉通、血清),和铅元素稀释液(纯水、磷酸氢二铵、曲拉通、血清)的离心管内液面下3~4 mm轻轻缓慢排除血液,吸取清澈稀释液至刻度再排出,重复操作1~2次。盖紧管帽,轻轻震荡混匀,统一编号待检。
1.2.3铜、锌、钙、镁、铁、铅元素的测定 应用火焰原子吸收分光光度法检测铜、锌、钙、镁、铁的含量,使用石墨炉原子吸收分光光度法检测铅的含量。测定锌铁铜钙镁含量的主要步骤如下:(1)打开电脑进入BH5100连机能量调整合格后,五元素由五通道同时测量,建立标准曲线,进行质控物测量,选择进入样本测量状态。(2)清洗进样管路,将吸样管放入去离子水中,持续一段时间清洗。(3)将吸液管插入待测样品管中,待信号曲线(吸光度值)平稳后,按“ 空格键”完成样本测量。(4)清洗进样管路,以备测量下一个样本。测定铅含量的主要步骤如下:(1)打开电脑进入BH2200s连机能量调整合格后,建立标准曲线,进行质控物测量,选择进入样本测量状态。(2)从样品杯中取出20 μl待测样品加入石墨炉中进行检测。(3)待检测样品完成后,再加入下一个样品。
1.2.4铜、锌、钙、镁、铁、铅元素测定的质量控制 (1)对实验室内部环境进行严格控制,保证温度恒定在(25±1)℃,湿度控制在30%~50%,对检测中乙炔气的纯度进行检测,根据火焰颜色决定乙炔气罐是否合格。(2)对元素测定时建立标准曲线,实验的标准曲线r>0.999。进行质控物的测量、质控物在控对样本进行测量,为减少仪器漂移,每次测定标本均于20 min之内完成。在测定样本前和每间隔20份样本测定质控样本对实验条件进行控制。
1.3统计学处理 测定结果以均数±标准差表示,利用SPSS16.0软件进行统计学分析,组间比较采用t检验,P≤0.05认为差异有统计学意义。
2.1两组儿童基本信息的比较 贫血组的血红蛋白含量、红细胞压积、红细胞平均体积、平均血红蛋白量、平均血红蛋白浓度均显著低于正常对照组(P<0.01),且各项指标均符合小细胞低色素性贫血入选标准,而正常对照组各项指标均在正常值范围内(表1)。
2.2两组儿童血液中六种金属元素含量的比较 见表2。全血锌、镁、铁含量贫血组显著低于正常对照组(P<0.05),血铜含量贫血组平均数低于正常对照组,但在统计学确定P=0.05认为两组无统计学意义。血钙含量平均值贫血组高于正常对照组但在确定P=0.05统计学范围内认为两组无统计学意义。血铅含量贫血组显著高于正常对照组(P<0.05)。
表1 正常对照组和贫血组血常规检查结果比较
表2 正常对照组和贫血组金属元素的比较
从本研究结果可以看出,儿童小细胞低色素性贫血主要是缺乏铁、锌、镁元素。铁是儿童需要量较多的金属元素,是红细胞内血红蛋白的重要组成成分。每日需要从食物中补充吸收大量的铁,如果血铁含量不足会直接影响到血红蛋白的合成,引起小细胞低色素性贫血[9-10]。锌是体内许多重要酶的金属成分,参与血红蛋白的合成,提高铁的利用和吸收,促进血红蛋白合成,且维持红细胞膜的稳定性,保护红细胞免遭某些溶血素的作用。锌缺乏使味觉减退,唾液中酶减少,味蕾功能障碍出现厌食而导致或加重贫血。虽然在肠系膜上铁锌相互拮抗而影响双方吸收,但二者比例适当时则无影响。补锌治疗能改善铁的吸收,防止小细胞低色素性贫血的发生。镁在脱氧核糖核酸酶激活、血红蛋白合成及红细胞膜稳定性中起到积极作用,缺镁影响脱氧核糖核酸酶激活、血红蛋白合成及红细胞膜稳定性,引起红细胞酶缺陷、血红蛋白合成缺陷、红细胞膜结构缺陷,引起贫血。本研究显示小细胞低色素性贫血组镁元素明显低于正常对照组,与李红星、洪美花[11]的研究结果一致,镁元素缺乏可能与小细胞低色素存在一定的关系,铁与镁元素具有一定的协同作用,可能铁元素的缺乏导致镁元素吸收障碍。
铜与体内造血功能有密切的关系。有铜构成的血浆铜蓝蛋白具有铁氧化酶的性质,参与铁的吸收和转运,促进肝内储存铁的释放。铜还可以影响红细胞膜功能,缺铜缩短红细胞寿命,加重贫血。研究结果显示,小细胞贫血组与对照组全血铜元素含量无统计学差异,说明铜元素在小细胞低色素发生和发展中并未发生量的改变,改变的可能是分布结构。补钙治疗小儿佝偻病已被人们公认和接受,补钙成为育儿非常重视的环节,研究中发现小细胞低色素贫血组钙含量平均值高与正常对照组,但无统计学意义。
本研究显示:小细胞低色素贫血组全血铅的浓度显著高于正常对照组。铅元素是一种有害重金属元素,广泛存在于环境中,小儿铅中毒常与铁缺乏相伴出现,而两者均能导致小细胞低色素性贫血,如铅中毒和铁缺乏同时出现更会大大增加小细胞低色素性贫血的发病率[12]。血中的铅95%分布在红细胞内,铅对红细胞的影响包括:1)通过抑制红细胞氨基酮戊酸脱水酶和亚铁螯合酶,使血红蛋白的水平下降。2)抑制球蛋白的合成,尤其是α球蛋白合成,使β球蛋白与α球蛋白链合成不同步。3)导致红细胞膜的过氧化,使红细胞膜破损。4)干扰红细胞膜Na+-K+-ATP酶的活性,导致红细胞内钾浓度降低,钠大量潴留,使红细胞水肿而溶血[13]。Wolf AW、Jimenez E等[14]研究发现血清铅水平的变化与血清铁水平密切相关,可能是由于铁和铅的吸收有相同的机制,两者在体内吸收具有竞争性,铁元素的吸收减少可能导致铅元素吸收增加。两者有竞争性抑制作用,铁吸收不足时,会导致铅的吸收过多,且铅的过量可影响血红蛋白的合成。
本研究可推断,小儿小细胞低色素性贫血发生与金属元素铁、锌、镁的缺乏以及铅的含量增高存在着一定的关系。因此有必要对儿童体内金属元素水平进行定期测定,对于血铅增高的儿童及时进行营养干预,补充必需金属元素以纠正铁、锌、镁的缺乏,使小细胞低色素性贫血得到合理治疗。
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