食管癌患者血清胸苷激酶1检测的外科临床意义

赵国红 柳硕岩 杨 永 Ellen He Sven Skog

（1 福建省肿瘤医院胸外科，福州 350014；2 Department of Oncology，Karolinska University Hospital，Stockholm）

食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的2%，目前其发病率仍有逐年升高的趋势。胸苷激酶（ thymidine kinase，TK）是嘧啶代谢循环中的关键酶之一，它能够催化脱氧胸苷转变为脱氧- 1 - 磷酸胸苷酸，为DNA 的合成提供原料，是衡量细胞增殖活性的重要指标[1]。TK在人类细胞中以2种同工酶的形式存在，即细胞质TK（TK1）和线粒体TK（TK2） 。研究证明[2-7]，TK1是一种与细胞周期调控密切相关的细胞增殖标志物，对肿瘤细胞增殖速度的检测十分有用，适用于对体格检查人群恶性肿瘤的风险预测及恶性肿瘤患者的疗效监测和预后判断。TK1作为肿瘤细胞的血清学增殖标志物，在乳腺癌、肺癌、膀胱癌等恶性肿瘤中已有相关研究[3,8]。本研究中，我们同时检测食管癌癌患者和正常健康人群血清中的TK1水平，以探讨在食管癌的早期诊断、疗效评判、预后评估等方面的临床意义。

1 资料与方法

1.1 标本来源

2007年10月至2009年2月我科行根治性食管鳞癌切除手术348例 。其中男性243例，女性105例，男女比例为2.3∶1。平均年龄为59±7岁。肿瘤部位: 胸上段51例，胸中段 217例，胸下段 75例，多发癌5例。按UICC1997年分期标准，肿瘤浸润深度T1期25例 ，T2期84例，T3期 202例，T4期 37例。组织分化程度，高分化83例，中分化213例，低分化52例。术后病理均证实为鳞状细胞癌。所有患者以前均未化疗过，均有可测病灶。收集同期福建省肿瘤医院健康体检者41名作为健康对照组，其中男19名，女22名，年龄介于28～79岁，平均年龄（60±6）岁。

1.2 仪器和试剂

CIS-1型化学发光数字成像分析仪；硝酸纤维素薄膜，anti-TK1 Ab，TK 标准品，ECL 试剂，生物素化二抗，辣根过氧化物酶标记亲和素，封闭剂，抗体稀释液，抗体洗涤液（ 以上组成TK1 诊断试剂盒） 。试剂及仪器均由深圳华瑞同康生物技术有限公司提供。

1.3 方法

在根治性切除的前提下，结合术前胸、上腹部CT及双颈彩超所提示的病变部位及淋巴结可疑转移区域而采用颈、胸、腹三野淋巴结清扫术及胸、腹二野淋巴结清扫术以及经左胸食管癌根治术。其中上、中段食管癌及多发癌以及上纵隔及气管旁有可疑淋巴结转移者行颈、胸、腹三野淋巴结清扫术，中下段食管癌以及上纵隔及气管旁无可疑淋巴结转移者选择性行胸、腹二野淋巴结清扫术及经左胸食管癌根治术。有235例行颈、胸、腹三野淋巴结清扫术，78例行胸、腹二野淋巴结清扫术，35例行经左胸食管癌根治术。空腹抽取健康对照组体检者静脉血2mL，并于术前、术后2周和术后随访1～3个月期间，分别空腹抽取患者静脉血2mL，在3h内，用离心机离心8～10 min，4000 r/min，分离血清，分装于2个离心管内，进行编号，放在-20℃冰箱里备测（一管用于检测、另一管用于复检），标本收集完成后，进行血清TK1值测定。

1.4 统计学方法

计量资料采用均数±标准差表示，利用SPSS13.0 软件进行t检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 食管癌不同分期与健康者血清TK1水平的比较

健康对照组血清TK1值为0.3～1.1 pmol/L，平均（0.5±0.2）pmol/L。与食管癌患者组（3.34±2.11）比较，差异有统计学意义（P＜0.001，表1）。根据分期，T1–T2两组患者血清TK1值为。1.70 ～12.03 pmol/L，平均值为（4.27±2.57） pmol/L，T3–T4组患者血清TK1值为1.51～9.71 pmol/L，平均值为（3.72±1.43）pmol/L，两组比较P＜0.05，差异尚无明显统计学意义。

表1 手术前食管癌患者及健康者血清TK1水平的比较 (pmol/L，±s)

表1 手术前食管癌患者及健康者血清TK1水平的比较 (pmol/L，±s)

与健康对照组比较，*P＜0.05

组 别 n 血清TK1值健康对照组 41 0.50±0.20食管癌患者组 348 3.34±2.11*T1～T2期 109 4.27±2.57 T3～T4期 239 3.72±1.43

2.2 术后1周患者血清TK1的变化情况

术后1周，食管癌患者组血清TK1为（1.97～14.51）pmol/L，平均值为 （7.76±3.55） pmol/L，较术前水平明显提高（P＜0.05）。

2.3 术后1～3个月TK1水平变化情况

完成临床跟踪1～3个月的患者103例，术前的血清TK1计数值为（1.92 ～ 8.37） pmol/L，平均值为（3.21±1.88）pmol/L；术后1-3个月血清TK1值为（0.82 ～5.93） pmol/L，平均值为（1.91±1.31）pmol/L，前后差异有统计学意义（P＜0.05，表2）。其中71例TK1水平在术后1～3个月后出现下降12% ～76%。另32例患者TK1水平在术后出现上升，升幅为115% ～187%。下降组和上升组具有明显统计学差异（P＜0.005，表2）。

表2 食管癌术后随访103例患者血清TK1水平的比较 (pmol/L，±s)

表2 食管癌术后随访103例患者血清TK1水平的比较 (pmol/L，±s)

与手术前比较，*P＜0.05；与TK1 降低组比较，**P＜0.005

组 别 n 血清TK1值手术前 103 3.21±1.88随访1-3个月 103 1.91±1.31*TK1降低 71 1.47±0.97 TK1升高 32 3.12±1.43**

2.4 跟踪12个月复发情况

103例患者中，完成随访12个月病例45例，期间均接受过化疗。其中术后1～3个月血清TK1下降组有34人，平均值为（1.51±1.05）pmol/L； 术后1～3个月血清TK1上升组11人，平均值为（3.13±2.01） pmol/L；两组差异仍有统计学意义（P ＜0.05）。上升组中有7例（63.64%）复发，而下降组中有1例（2.94%）复发病例，有明显统计学差异（P＜0.001）。

3 讨 论

TK1的活性与细胞周期紧密关联，增殖周期中的TKl 含量从G 期、S 期、G2 期不断增加，G2 期达到最高，而肿瘤患者处于S 期、G2 期的细胞比例高。TK1 与DNA 合成呈正相关，TK1 活力增加会促进细胞DNA 合成速度提高，使肿瘤细胞急剧增殖，因此肿瘤恶性程度越高，TK1 的含量也相应升高，TK1可作为恶性肿瘤患者的治疗效果的监控和预后的评估，及对健康人群进行早期筛查中的参考指标[8,9]。

目前，食管癌常用的诊断方法X线钡餐造影检查，电子胃镜检查以及CT诊断不能进行大规模筛查。本研究结果表明，食管癌患者血清TK1表达水平显著高于健康人群。目前有许多肿瘤标志具有辅助诊断的作用，如AFP 用于肝癌、CA15-3 用于乳腺癌、PSA 用于前列腺癌等，但特异性和灵敏度不是非常理想。TK1 检测在肿瘤筛查中特异性很高，Chen等[7]研究表明，87% 的TK1 阳性患者存在恶性肿瘤相关的疾病，并与疾病的轻重程度有关。郭林等[10]认为血清TK1检测在诊断胃癌、判断预后和监测疗效等方面具有重要意义。本研究结果认为，TK1检测在食管癌的早期筛查、辅助诊断中具有较大的应用价值。

本研究观察到，术后1周患者血清TK1水平的暂时升高，与之前报道结果一致[12]，这可能与手术引发的复杂因素，如贫血和感染/发炎等引起的细胞增殖与坏死，导致大量TK1入血有关，具原因需要进一步研究。术后一个月患者血清TK1水平回落，比较术前有明显统计学意义，与之前报道结果一致[10,11]，提示TK1可监测手术疗效。我们建议在患者手术前和手术后一个月测STK1浓度，而不建议在术后一周内进行，以避免因非肿瘤性疾病引起的STK1浓度升高而引起的误导。

本研究在完成12个月跟踪的45例中发现，11例TK1水平在1-3个月随访中上升的病例中，有7例出现复发，而下降的34例中仅1例发生复发情况。这与之前的研究结果相似[13,14]。提示，当治疗有效时，在临床跟踪的1～3个月内TK1水平会出现显著性降低；并可以通过比较期间TK1水平的变化状况（升高或降低），判断复发风险，但需大样本研究进一步证实。

综上所述，TK1在食管癌患者血清中呈高表达。血清TK1 浓度监测对食管癌的诊断、疗效监测和复发风险评估等均有一定意义，值得临床推广。

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