卵巢肿瘤中survivin和COX-2表达的意义

何若英 李 晶 广东省广州市番禺疗养院 5490; 广东省广州市番禺区中心医院病理科

卵巢恶性肿瘤的发病率在女性生殖道肿瘤中居第3位,但由于缺乏典型的临床症状,早期诊断较困难,其死亡率在妇科恶性肿瘤中居第1位。sruvivin是凋亡抑制蛋白基因家庭新成员,大量研究表明,survivin在正常组织中不表达,在许多肿瘤组织中高表达,这一特点为肿瘤的早期诊断和基因治疗提供了靶点。环氧合酶-2(cyclooxyengase-2,COX-2)具有影响细胞的增殖及分化、抑制细胞凋亡作用,并可促进肿瘤血管形成,与多种肿瘤的发生、发展密切相关。本文探讨survivin和COX-2在卵巢上皮性肿瘤中表达情况和其与卵巢癌病理特征之间的关系,以及二者之间的相互关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选用我院与番禺区中心医院2006年1月-2009年6月病理科存档的卵巢癌34例、卵巢交界性囊腺瘤27例、卵巢良性囊腺瘤58例、正常卵巢组织46例的手术标本蜡块。标本均经过10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续4μm切片。所有病例均经H E切片诊断证实。所有患者术前均未接受化疗或者放疗。

1.2 方法 免疫组化采用EnV ision法。兔抗人survivin多克隆抗体及鼠抗人COX-2单克隆抗体购自北京中衫金桥生物技术有限公司。用已知survivin阳性表达的胃癌切片及COX-2阳性的结肠癌切片作为阳性对照,用PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 免疫组化阳性结果判断 由两位病理学专家双盲予每张切片评分,结合阳性细胞百分比及阳性细胞染色强弱两个方面进行分析评分。(1)阳性细胞百分比:无阳性细胞为0分,阳性细胞占1%～10%为1分,11%～50%为2分,51%～80%为3分,81%～100%为4分。(2)阳性细胞染色强弱:基本不着色为0分,着色淡者为1分,着色适中者为2分,着色深者为3分。(1)、(2)两项乘积为其最后得分:0分为阴性(-),1～4分为弱阳性(+),5～8分为中等阳性(++),9～12分为强阳性(+++)。

1.4 统计学方法 应用SPSS11.5统计软件包,蛋白阳性率用χ2检验和Fisher确切概率法,蛋白阳性之间的相关性和等级相关资料用Spearman相关分析处理,P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 sunrivin与COX-2蛋白在卵巢上皮性癌组织和对照组织中的表达 sunrivin蛋白阳性表达的染色部位主要位于肿瘤细胞的细胞浆中,为粗细不一的棕黄色颗粒。在46例正常卵巢组织中均未发现survivin的阳性表达,在良性浆液性肿瘤58例中,sunrivin蛋白阳性表达率为19.0%(11/58),在交界性肿瘤和卵巢癌中sunrivin蛋白的阳性表达率分别为51.9%(14/27)和73.5%(25/34)。COX-2阳性染色为棕黄色颗粒。定位于细胞核周及细胞浆内,呈片状或颗粒状分布。46例正常卵巢组织中COX-2蛋白表达为阴性。在58例良性卵巢浆液性肿瘤中,COX-2蛋白表达阳性率为29.3%(17/58)。交界性卵巢上皮肿瘤及卵巢癌组织中COX-2蛋白表达阳性率分别为 74.1%(20/27)和88.2%(30/34)。

2.2 survivin与COX-2在卵巢癌组织中表达的相关性survivin与COX-2之间具有显著正相关性(r=0.387,P＜0.01)。

3 讨论

卵巢癌的发生、发展是多步骤的过程,必然涉及变异的积累和细胞正常周期的紊乱。研究表明细胞异常增殖和凋亡抑制是卵巢癌发生的重要机制[1]。survivin又名生存素或生存蛋白,是1997年由耶鲁大学的A ltieri实验室应用效应细胞蛋白酶受体-1(effec tor cellp roteasa recep tor-1)的cDNA通过杂交方法在人类基因组文库中筛选并获得的凋亡抑制蛋白。survivin在正常胚胎发育过程中有所表达。在成人终末分化中很少见到(除了睾丸、胸腺和胎盘),但在大量的肿瘤组织如肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、淋巴瘤、子宫内膜癌、子宫颈癌和卵巢癌等组织中可见其表达[2]。Sui等[3]发现,survivin基因在卵巢良性囊腺瘤中无表达或低表达(0%～12.1%),在恶性卵巢上皮性癌细胞浆或细胞核中表达丰富。认为其表达与卵巢癌手术病理分期、病理类型、预后、生存率等指标显著相关。本文结果显示,sunrivin在正常卵巢组织中无表达:在良性卵巢上皮肿瘤、交界性卵巢上皮肿瘤、卵巢癌中的阳性表达率逐渐增强。sunrivin的高表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后,是评价卵巢癌预后的潜在指标。因此,检测sunrivin的表达,对临床上作出早期诊断、估计预后具有一定的指导意义。survivin在肿瘤组织中高表达而在正常组织中不表达的特性。为卵巢癌的基因治疗提供了理论依据。COX-2是参与花生四烯酸的环氧酶代谢途径中的限速酶。可催化花生四烯酸转化为前列腺素(p rostaglandins)。多项研究表明COX-2在许多肿瘤中的表达上调。并与增强的抗凋亡能力相关,提示COX-2可能与肿瘤发生、发展密切相关。临床研究表明,COX-2表达与卵巢上皮性癌患者的治疗反应相关。是影响其预后的独立危险因素。本研究结果显示,COX-2在正常卵巢组织中无表达,在良性卵巢上皮肿瘤组织、交界性卵巢上皮肿瘤、卵巢癌中的表达呈增强趋势,差异有高度显著性,该结果与Matsumoto等研究结果相同。提示COX-2在卵巢癌发生的早期即开始起作用,进展期持续存在,并不是晚期事件[4]。新近研究指出[5],特异性的COX-2抑制剂能明显减少survivin蛋白在细胞中的表达,同时在动物模型中还发现,survivin蛋白表达水平的高低依赖于细胞中COX-2蛋白是否存在。在本研究中,检测了卵巢癌中survivin与COX-2的表达情况并且分析两者的相关性,结果显示COX-2在卵巢癌组织中的表达与survivin的表达密切相关。该结果初步提示两者具有协同作用,抑制细胞凋亡,共同参与了卵巢癌的发生、发展。

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