IFN－及VEGF在经典型霍奇金淋巴瘤发生发展中的作用及H/R-S细胞与背景细胞关系的探讨

苏 俊，侯 文

（遵义医学院附属医院病理科，贵州遵义563003）

霍奇金淋巴瘤(Hodgkin,s Lymphoma，HL)是恶性淋巴瘤的一种独特类型，是青少年最为常见的恶性肿瘤之一，约占全世界年发病率的1%，占所有恶性淋巴瘤的30%[1]。由于HL的H/RS细胞少且散在的特点，多年来对H/RS细胞的研究成为难点[2]。目前细胞因子多数是用Elisa方法来检测，我们应用免疫组化标记IFN－和VEGF对H/R-S细胞及背景细胞进行研究，在国内尚未见报道[3~5]。

1 材料和方法

1.1 材料 选用遵义医学院附属医院2003~2010年CHL存档蜡块42例，其中男性27例，女性15例，年龄5~78岁，中位年龄32岁，发生于颈部29例，锁骨上9例，腋下4例。每例均经两位有临床经验的高年资病理医师复阅片，42例CHL均行HE和CD30、CD15、CD20、CD3及EMA 免疫组化标记确定诊断，根据 WHO（2007）淋巴瘤分类标准进行亚型分类，其中结节硬化型（NS）24例，混合细胞型（MC）16例，淋巴细胞为主型（LR）2例，另外选择乳腺浸润性导管癌及慢性阑尾炎各1例作为阳性对照。

1.2 免疫组化 标本用4%中性缓冲甲醛固定，常规石蜡包埋，3m连续切片，采用免疫组化Envision二步法，微波热修复，DAB显色，苏木精对比染色，中性树胶封固切片，阳性对照用已知阳性的乳腺癌及慢性阑尾炎作为对照，阴性对照用PBS溶液取代一抗进行对比实验。

1.3 结果判定 2种细胞因子阳性结果均为棕黄色，定位于细胞质中。其中≥1个肿瘤细胞阳性，判断为肿瘤细胞阳性，≥30%的背景细胞阳性判断为背景细胞阳性。

1.4 观察方法 ①同一张切片观察有肿瘤细胞的10个不同高倍镜视野中心1平方毫米面积内肿瘤细胞的数量及其表达不同细胞因子的比例及强度，累计后平均得每平方毫米内肿瘤细胞表达细胞因子的结果；②同法观察各种背景细胞成分（包括淋巴细胞、浆细胞及嗜酸性粒细胞）的数量及表达细胞因子的结果。

1.5 统计学分析 采 用SPSS 13.0统计软件包进行不同组织学类型CHL的H/R-S细胞间、肿瘤细胞与炎性背景细胞间、背景细胞间差异比较。

2 结果

2.2 VEGF（图4-图6；表3-4） ① MCHL中肿瘤细胞和背景细胞的比较2=5.544<0.05；②NSHL中肿瘤细胞和背景细胞的比较2=14.696，<0.01；③LRHL中肿瘤细胞和背景细胞的比较2=5.635<0.05；④CHL中肿瘤细胞和背景细胞的比较2=27.077，<0.01。

图1 IFN－在LRCHL中的表达（Envision×400）

图2 IFN－在 NCHL中的表达 （Envision×400）

图3 IFN－在 MCHL中的表达 （Envision×400）

图4 VEGF在LRCHL中的表达（Envision×400）

图5 VEGF在 M CHL中的表达（Envision×400）

图6 VEGF在 NCHL中的表达（Envision×400）

表1 各种背景细胞表达IFN－ 的情况表

表2 肿瘤细胞与背景细胞表达IFN－ 的情况表

表3 各种背景细胞表达VEGF的情况表

表4 肿瘤细胞与背景细胞表达VEGF的情况表

3 讨论

经国内外大量研究证实H/R-S细胞来源于B细胞，但为什么HL的组织学表现和普通B细胞淋巴瘤会有如此大的差异？不到1%的H/R-S细胞何以能引起HL的症状和临床表现？如炎症性背景、纤维化等一直是个难题[2]。

细胞因子是多种细胞所分泌的能调节细胞生长分化、调节免疫功能、参与炎症发生、创伤愈合、肿瘤免疫等多种生理和病理过程的小分子多肽的统称。IFN-是由病毒感染细胞产生的一种细胞因子，其生物学作用有严格的种属特异性，只作用于人的细胞，具有抗病毒、抗细胞增殖及免疫调节等作用。本实验研究发现，IFN-广泛表达于肿瘤细胞及背景细胞，提示HL的发生和发展与病毒感染有关，且肿瘤细胞及背景细胞间存在相互依存的关系。

VEGF是肿瘤中最常见的促血管生长因子[6]，对微血管具有高渗透作用，以旁分泌的方式作用于血管内皮细胞，促其增殖,在原位诱导血管生成，作用十分强烈[7]。本研究发现在CHL中肿瘤细胞及其周围细胞中VEGF表达明显高于正常淋巴结组织，说明在CHL中肿瘤细胞增殖过程中，肿瘤及其周围细胞均具有分泌VEGF的功能，此结果提示在恶性淋巴瘤形成的过程中，启动了VEGF的调控，使VEGF上调，并作为主要正性调节因子，促使微血管的新生，且肿瘤细胞及背景细胞间存在相互依存的关系。

由于HL发病率低，细胞因子种类繁多，H/RS细胞的发生发展及其与背景细胞的关系还有待于增加标本量及细胞因子种类进行研究。

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