珠子草化学成分的研究

朱红霖，韦万兴，周 敏，杨 丹，樊希望，刘建雄

广西大学化学化工学院，南宁530004

珠子草化学成分的研究

朱红霖，韦万兴*，周 敏，杨 丹，樊希望，刘建雄

广西大学化学化工学院，南宁530004

利用大孔树脂吸附和多种柱层析方法，从珠子草中分离得到5个化合物，根据理化数据和波谱学等方法鉴定为柯里拉京(1)、芦丁(2)、isobubbialine(3)、丁二酸(4)和没食子酸(5)。根据2D-NMR修正了化合物3的部分碳信号归属，归属了化合物1的碳氢谱数据。

珠子草;大孔树脂;isobubbialine;柯里拉京;丁二酸;没食子酸

珠子草(Phyllanthus niriru L.)为大戟科叶下珠属植物的一种，是印度与我国的传统民间草药，一般认为其具有清肝、明目、渗湿利水等功效，临床上用于治疗肝炎，肠炎，尿路感染，糖尿病等疾病［1］。近年来，人们对珠子草化学成分的研究日益增多，我们曾经对珠子草做了一些研究，从中分离出了一系列化合物［1-4］。珠子草主要含有黄酮和黄酮甙、生物碱、木脂素、三萜及甾醇、鞣质和有机酸类物质［5］。但关于其化学成分的研究尚不深入。我们继续对其进行化学成分的研究，旨在为抗乙肝病毒药物的研发提供相应的依据。本实验利用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱和sephadex LH-20葡聚糖凝胶色谱等分离手段对珠子草中的大极性部位进行了研究，从中分离得到了5个化合物。根据2D-NMR修正了化合物3的部分碳信号归属，归属了化合物1的碳氢谱数据。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

Agilent 1100 MSD TRAPSL质谱仪，SHIMADZU气质联用仪，Bruker AVANCEⅢ500 MHz全数字化傅立叶超导核磁共振波谱仪，NEXUS470FT-IR型红外光谱仪，Perkin Elmer P341LC型自动旋光仪，X-4熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)。硅胶GF254、硅胶H(青岛海洋化工厂)，DM130大孔树脂(上海摩速科学器材有限公司)。其余试剂均为分析纯。

珠子草的地上部分于2006年12月采自广西隆安县，由西北大学生命科学学院倪士峰博士鉴定，标本存放于本实验室，编号06121。

1.2 提取和分离

珠子草地上部分经干燥粉碎后的粗粉5 kg用乙醇回流提取3 h。滤出浸提液，残渣用乙醇继续回流提取两次。合并乙醇浸提液，浓缩蒸干，到珠子草乙醇浸膏413 g。浸膏分散到水中，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取后的水溶液蒸干得极性部位浸膏A(84 g)。浸膏A分散到水中，滤去少量沉淀，用蒸馏水稀释至13.0 mg/mL，将2000 mL处理好的DM130型大孔树脂装入玻璃柱中，使样品溶液以4 BV/h(BV指柱体积)的流速流经柱床至吸附完全，用蒸馏水冲洗至无物质流出后再以1 BV/h的流速依次用10%、80%和100%的甲醇水溶液洗脱，分别得到浸膏B(9.1 g)、C(54.6 g)和D (6.3 g)。浸膏B用甲醇∶水=1∶1反复重结晶得到乳白色细针状晶体1(3.8 g)，浸膏C反复经硅胶柱层析，用Sephadex-LH20凝胶柱纯化和通过制备薄层板、重结晶等手段得到2(1.8 g)、3(7.5 mg)、4 (35.1 mg)和5(68.4 mg)。

2 结构鉴定

化合物1 乳白色细针状晶体(在甲醇-水(1∶1)溶剂中结晶)，mp.204～206℃(分解)。易溶于乙醇、甲醇、丙酮，稍溶于水。三氯化铁反应呈阳性，Molish反应呈阳性。［α］20D-8.7°(c=1.0，Acetone)。IR(KBr)νmaxcm-1:3420，1720，1620，1530，1450。ESI-MS m/z 633［M–1］–。13C NMR谱中δ 95.07～62.50六个碳信号为葡萄糖的碳信号，其NMR数据如下:1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ: 6.71(1H，s，H-3)，6.68(1H，s，H-12)，6.38 (1H，d，J=2.0 Hz，H-20)，4.00(1H，d，J=1.5 Hz，H-19)，4.98(2H，m，H-16，H-18)，4.48(1H，m，H-17)，4.53(1H，m，H-15a)，4.17(1H，m，H-15b)，7.07(2H，s，H-23，H-27);13CNMR (CD3OD，125 MHz)δ:168.5(s，C-1)，125.5(s，C-2)，110.2(d，C-3)，145.2(s，C-4)，138.2(s，C-5)，145.3(s，C-6)，117.2(s，C-7)，116.7(s，C-8)，145.7(s，C-9)，137.7(s，C-10)，146.1(s，C-11)，108.4(d，C-12)，125.6(s，C-13)，170.1 (s，C-14)，65.0(t，C-15)，71.6(d，C-16)，62.5 (d，C-17)，76.2(d，C-18)，69.5(d，C-19)，95.1 (d，C-20)，166.7(s，C-21)，120.7(s，C-22)，111.0(d，C-23，C-27)，146.4(s，C-24，C-26)，140.4(s，C-25)。以上数据与柯里拉京(corilagin，见图1)的波谱数据［6，7］基本一致，故化合物1鉴定为柯里拉京。

化合物2 黄色细针状晶体(甲醇)，mp.174～177℃，易溶于热吡啶、热甲醇，溶于热乙醇。不溶于乙醇、氯仿、石油醚、乙酸乙酯。与三氯化铁反应呈阳性，盐酸镁粉反应呈阳性，Molish反应呈阳性，说明该化合物为黄酮苷。ESI-MS m/z 611［M+ 1］+。［α+13.8°(c=1.0，EtOH)。IR(KBr) νmax cm-1:3419，1656，1600，1505，1456，1362，1296，1204。与芦丁红外图谱匹配度很高，化合物2与芦丁标准品混合熔点不下降，硅胶薄层板显示两者Rf值完全一致，故化合物2鉴定为芦丁。

化合物3 无色透明长柱状晶体(氯仿中重结晶)，mp.113～114℃，溶于氯仿、甲醇。碘化铋钾反应呈阳性。IR(KBr)νmaxcm-1:3400(OH)，1765 (C=O，内酯)，1696(C=C)，1410，1110，1080，981。［α］20D+11.1°(c=0.1，MeOH)。ESI-MS m/z 222［M+1］+。其 NMR数据如下:13C NMR (CD3OD，125 MHz)δ:64.8(d，C-2)，27.9(t，C-3)，26.5(t，C-4)，53.6(t，C-5)，57.5(d，C-6)，72.5(d，C-7)，33.7(t，C-8)，86.3(s，C-9)，177.3(s，C-11)，112.2(d，C-12)，175.9(s，C-13)，31.9(t，C-14)。1H NMR(CD3OD，500 MHz) δ:3.06(1H，m，H-2)，2.24(1H，m，H-3a)，1.97 (1H，m，H-3b)，1.74(1H，m，H-4a)，2.18(1H，m，H-4b)，3.02(1H，m，H-5a)，3.82(1H，m，H-5b)，3.27(1H，s，H-6)，4.20(1H，dd，J=9.5，4.0 Hz，H-7)，1.91(1H，m，H-8a)，2.35(1H，dd，J=13.5，4.5 Hz，H-8b)，5.83(1H，t，J=1.8 Hz，H-12)，2.80(1H，dt，J=19.5，2.1Hz，H-14a)，2.96(1H，dt，J=19.5，2.7 Hz，H-14b)。以上数据与isobubbialine的NMR数据［8］基本一致，故鉴定化合物3为isobubbialine。但文献中C-3和C-4位信号归属有误，由1H-1H COSY谱中可以看出δ 3.82(H-5b)除与δ 3.02(H-5a)相关外，还与1.74 ppm及2.18 ppm的氢相关，故可确定后两者为H-4，再由HSQC谱可知，26.5 ppm处的碳与H-4直接相关，故该碳为C-4，27.9 ppm处的碳则C-3。化合物3的结构式见图1。

图1 化合物1和3的结构式Fig.1 The structure of compounds 1 and 3

化合物4 无色透明晶体(水)，mp.183～185℃，溶于水，微溶于乙醇、丙酮，不溶于乙酸乙酯。EI-MS、IR与丁二酸标准品的谱图一致。1H NMR (D2O，500 MHz)δ:2.50(3H，s，CH3)。13C NMR (D2O，125 MHz)δ:178.6(C=O)，30.20(CH3)。NMR数据与丁二酸的核磁数据［9］基本一致，故鉴定该化合物为丁二酸。

化合物5 无色透明针状晶体(甲醇中重结晶)，mp.236～239℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮，几乎不溶于苯、氯仿及石油醚。ESI-MS m/z 169［M-1］-。IR(KBr)νmaxcm-1:3496，3285，3063，1701，1614，1540，1432，1319。1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ: 7.07(2H，s，H-2，H-6)。13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:170.5(COOH)，146.4(C-3)，139.6(C-4)，122.1(C-1)，110.3(C-2)。上述数据与没食子酸的波谱数据［10］一致，故鉴定该化合物为没食子酸。

致谢:浙江工商大学食品与工程学院王奎武教授代测NMR，其它各种波谱由本学院测试中心和广西大学糖业中心测试，一并感谢!

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Chemical Constituents of Phyllanthus niruri L.

ZHU Hong-lin，WEI Wan-xing*，ZHOU Min，YANG Dan，FAN Xi-wang，LIU Jian-xiong
School of Chemistry and Chemical Engineering，Guangxi University，Nanning 530004，China

Five compounds were isolated from the aerial part whole plants of Phyllanthus niruri L.and identified as corilagin(1)，rutin(2)，isobubbialine(3)，succinic acid(4)，and gallic acid(5)on the basis of physical and chemical properties and spectra data.The assignment of NMR signals of compound 3 was revised，and the NMR signals of compound 1 were assigned with 1D and 2D-NMR spectra.

Phyllanthus niruri L.;macroporous resin;isobubbialine;corilagin;succinic acid;gallic acid

1001-6880(2011)03-0401-03

2010-01-27 接受日期:2010-06-09

国家自然科学基金项目(30660216);广西大学大学生创新性实验计划项目(A0401129)

*通讯作者 Tel:86-771-3233718;E-mail:wxwei@gxu.edu.cn

R284.2

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