连翘花蕾与花的挥发性成分研究

王金梅，姬志强，康文艺*

1河南大学中药研究所;2河南大学药学院，开封475004

连翘花蕾与花的挥发性成分研究

王金梅1，2，姬志强1，2，康文艺1，2*

1河南大学中药研究所;2河南大学药学院，开封475004

本文采用顶空固相微萃取和气相色谱质谱联用(HS-SPME-GC-MS)技术比较分析了连翘花蕾和花的挥发性成分。从连翘花蕾和花中共鉴定了83个化合物，其中40个化合物是共有的。连翘花蕾的挥发性成分以烃类(41.04%)为主，而连翘花的挥发性成分以醇、醛和酮类化合物(26.46%)为主;酯类化合物在花蕾中的含量为8.11%，在花中下降到2.12%;而酸类化合物则从3.56%上升到5.18%。结果表明，随着花蕾的开放，酯类成分逐渐被水解为酸。

固相微萃取;连翘;挥发性成分

连翘(Forsythia suspense(Thunb)Vahl.)为木犀科连翘属植物，传统以其果实入药，具有清热解毒、消肿散结之功效，其中挥发性部分为主要有效成分之一。目前，对其化学成分和药理活性的研究已有较多报道［1］;果实挥发油的主要成分是β-蒎烯，香桧烯，α-蒎烯等［2-6］。吕金顺等人采用水蒸气蒸馏法提取和乙醚萃取甘肃天水产的连翘花油的挥发性成分，发现连翘花精油的主要成分是烷烃，含量约49.84%［7］。

本文首次采用固相微萃取和气质联用技术对比分析了连翘花蕾和花的挥发性成分，为连翘资源的开发利用提供理论基础。

1 材料与仪器

连翘花蕾和花2007年3月采集于河南大学金明校区校园内，由河南大学天然药物研究所李昌勤副教授鉴定为木犀科连翘属连翘 F.suspense (Thunb)Vahl.，标本存放于河南大学天然药物研究所。

6890 N型气相色谱-5975型质谱联用仪(美国安捷伦公司);手动固相微萃取进样器和65 μm聚二甲基硅氧烷(PDMS-DVB)萃取头(美国Supelco公司);C6～C26正构烷烃样品(Alfa Aesar)。

2 实验方法

2.1 挥发性成分的提取

使用前先将SPME的萃取纤维头在气相色谱进样口250℃老化10 min，载气体积流量为1.0 mL/ min。取阴干连翘花蕾和花(均粉碎)各0.7 g，置于5 mL的样品瓶中，插入65 μm PDMS萃取纤维头，于80℃下顶空萃取30 min后取出，立即插入色谱仪进样口(温度250℃)，脱附1 min。

2.2 GC/MS分析条件

色谱条件:HP-5 MS石英弹性毛细管柱(30.0 m ×250μm ×0.25μm);载气为高纯氦气(99.999%)，流速1.0 mL/min;进样口温度为250℃;升温程序:起始温度50℃(保持1.0 min)，以3℃/min升温至120℃(保持2 min)，最后以4℃/ min升温至210℃(保持10 min);不分流进样。

质谱条件:电离方式:EI源，电离能量70 eV;离子源温度为250℃;传输线温度为280℃;四级杆温度为150℃;电子倍增器电压1765 V。质量扫描范围为30～440 amu，谱图库为Rtlpest3.L和Nist05.L。

2.3 保留指数测定

参照文献［8］，以色谱纯正构烷烃样品(C6～ C26)为参比计算各组分的保留指数KI。

3 结果与讨论

3.1 实验结果

按上述实验方法和条件进行实验，由MSD化学工作站给出各自总离子流图，对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图，经过质谱数据系统检索，并结合有关文献从基峰、相对丰度和KI值等几个方面进行直观比较，从而确定出各自挥发油中的组分。并通过化学工作站数据处理系统，按峰面积归一化法确定各组分在挥发性物质中的相对含量，其结果列于表1。

表1 连翘花蕾和花的挥发性成分研究Table 1 Volatiles from buds and flowers of F.suspense

1 8 D e c a n a l癸醛C 11 H 22 O 9 7 1 2 0 3 0.8 0 0.4 0 1 9 2，3 -d i h y d r o -B e n z o f u r a n 2，3 -二氢-苯唑呋喃 C 8 H 8 O 9 4 1 2 5 1 1.7 5 1.5 7 2 0 3，7 -d i m e t h y l -2，6 -O c t a d i e n -1 -o l橙花醇 C 10 H 18 O 9 7 1 2 5 5 1.5 3 –2 1 1 -m e t h y l -N a p h t h a l e n e 1 -甲基萘 C 11 H 10 8 7 1 2 8 9 0.6 1 –2 2 T r i d e c a n e十三烷C 13 H 28 9 9 1 3 0 0 1.0 9 0.5 9 2 3 N o n a n o i c a c i d壬酸C 9 H 18 O 2 9 7 1 3 0 4 – 0.4 3 2 4 U n d e c a n a l十一醛C 11 H 22 O 9 7 1 3 1 0 – 0.6 0 2 5 2 -m e t h y l -P r o p a n o i c a c i d，2 -e t h y l -3 -h y d r o x y h e x y l e s t e r 2 -甲基丙酸2 -乙基-3 -羟基己酯C 12 H 24 O 2 8 6 1 3 1 7 – 1.2 8 2 6 ( + / -) -( 1 α，4 a β，8 a α ) -1，2，4 a，5，8，8 a -h e x a h y d r o -4，7 -d i m e t h y l -1 -( 1 -m e t h y l e t h y l ) -N a p h t h a l e n e ( + / -) -( 1 α，4 a β，8 a α ) -4，7 -二甲基-1 -( 1 -甲基乙基) -1，2，4 a，5，8，8 a -六氢-萘C 15 H 24 9 2 1 3 2 3 0.3 5 –2 7. a l p h a.-C u b e b e n e α -荜澄茄油烯 C 15 H 24 9 7 1 3 2 9 0.4 9 0.1 7 2 8 5 -E t h o x y -3，4 -d i h y d r o -2 H -p y r r o l e -2 -c a r b o x y l i c a c i d，e t h y l e s t e r 5 -乙氧基-3，4 -二氢-2 H -吡咯基2 -甲酸乙酯 C 9 H 15 N O 3 9 1 1 3 5 1 5.6 2 2 9 3 -m e t h y l -1，2 -C y c l o p e n t a n e d i o n e 3 -甲基-1，2 -环戊烷二酮 C 6 H 8 O 2 8 3 1 3 5 3 – 3.8 4 3 0 E u g e n o l丁香酚C 10 H 12 O 2 9 4 1 3 6 0 2.2 2 1.1 8 3 1 2，6，1 0 -t r i m e t h y l -D o d e c a n e 2，6，1 0 -三甲基-十二烷 C 15 H 32 9 8 1 3 7 0 1.5 1 1.0 4 3 2 T e t r a d e c a n e十四烷C 14 H 30 9 9 1 4 0 0 2.9 6 0.7 1 3 3 1 S -( 1 α，3 a β，4 α，8 a β )］-d e c a h y d r o -4，8，8 -t r i m e t h y l -9 -m e t h y l e n e -1，4 -m e t h a n o a z u l e n e［1 S -( 1 α，3 a β，4 α，8 a β )］-十氢-4，8，8 -三甲基-9 -亚甲基-1，4 -亚甲基奥C 15 H 24 9 0 1 4 0 3 0.7 2 0.3 6 3 4 O l e y l A l c o h o l油醇C 18 H 36 O 8 7 1 4 0 6 – 0.6 1 3 5 C a r y o p h y l l e n e石竹烯C 15 H 24 9 4 1 4 1 3 1.8 8 1.0 2 3 6 3 -m e t h y l -2 -C y c l o h e x e n -1 -o n e 3 -甲基-2 -环已烯-1 -酮 C 7 H 10 O 8 1 1 4 3 4 3.7 2 –3 7 1 ' -H y d r o x y -4，3 ' -d i m e t h y l -b i c y c l o h e x y l -3，3 ' -d i e n -2 -o n e 1 ' -羟基-4，3 ' -二甲基-联二环己-3，3 ' -二烯-2 -酮 C 14 H 20 O 2 8 9 1 4 3 5 – 1.6 2 3 8 2，3，7 -t r i m e t h y l -D e c a n e 2，3，7 -三甲基-十一烷 C 14 H 30 9 2 1 4 4 7 2.9 8 –3 9 α -C a r y o p h y l l e n e α -石竹烯C 15 H 24 9 7 1 4 4 9 0.5 0 0.1 7 4 0 ( E ) -6，1 0 -d i m e t h y l -5，9 -U n d e c a d i e n -2 -o n e ( E ) -6，1 0 -二甲基-5，9 -十一二烯-2 -酮C 13 H 22 O 9 9 1 4 5 3 0.8 6 0.5 8 4 1 3 -m e t h y l -T e t r a d e c a n e 3 -甲基-十四烷 C 14 H 30 9 0 1 4 6 7 0.6 4 –4 2 ( 1 α.，4 a α，8 a α ) -7 -m e t h y l -4 -m e t h y l e n e -1 -( 1 -m e t h y l e t h y l ) -1，2，3，4，4 a，5，6，8 a -o c t a h y d r o -N a p h t h a l e n e ( 1 α，4 a α，8 a α ) -7 -甲基-4 -亚甲基-1 -( 1 -甲基乙基) -，1，2，3，4，4 a，5，6，8 a -八氢萘C 15 H 24 9 1 1 4 7 4 0.6 7 0.4 1 4 3 ( Z ) -7 -H e x a d e c e n e ( Z ) -7 -十六烯 C 16 H 32 8 9 1 4 7 6 0.8 4 0.9 3 4 4 ( E ) -4 -( 2，6，6 -t r i m e t h y l -1 -c y c l o h e x e n -1 -y l ) -3 -B u t e n -2 -o n e α -紫罗兰酮C 13 H 20 O 8 5 1 4 8 5 1.6 4 0.8 7 4 5 ( 1 S -c i s ) -1，2，3，5，6，8 a -h e x a h y d r o -4，7 -d i m e t h y l -1 -( 1 -m e t h y l e t h -y l ) -N a p h t h a l e n e ( 1 S -c i s ) -4，7 -二甲基-1 -( 1 -甲基乙基) -1，2，3，5，6，8 a -六氢萘C 15 H 24 8 7 1 4 8 6 1.2 6 0.8 0

4 6 B u t y l a t e d H y d r o x y t o l u e n e 2，6 -二叔丁基对甲酚 C 15 H 24 O 9 9 1 4 9 1 – 1.2 1 4 7 P e n t a d e c a n e十五烷C 15 H 32 9 9 1 5 0 0 1 4.0 7 7.5 2 4 8 α -F a r n e s e n e α -金合欢烯C 15 H 24 9 4 1 5 0 5 – 0.3 9 4 9 T r i d e c a n a l十三醛C 13 H 26 O 9 6 1 5 0 8 – 0.5 1 5 0 C 15 H 24 9 1 1 5 1 0 0.6 6 0.3 8 5 1 3，5 -b i s ( 1，1 -d i m e t h y l e t h y l ) -4 -h y d r o x y -2，4 -C y c l o h e x a d i e n -1 -o n e 3，5 -二-( 1，1 -二甲基乙基) -4 -羟基-2，4 -环己二烯-1 -酮 C 15 H 24 O 2 8 9 1 5 2 7 2.1 4 –5 2 3，5 -b i s ( 1，1 -d i m e t h y l e t h y l ) -1，2 -B e n z e n e d i o l 3，5 -二( 1，1 -二甲基乙基) -1，2 -苯二酚( 1 α，4 a β，8 a α ) -7 -m e t h y l -4 -m e t h y l e n e -1 -( 1 -m e t h y l e t h y l ) -，1，2，3，4，4 a，5 6，8 a -o c t a h y d r o -N a p h t h a l e n e ( 1 α，4 a β，8 a α ) -7 -甲基-4 -亚甲基-1 -( 1 -甲基乙基) -1，2，3，4，4 a，5，6，8 a -八氢萘C 14 H 22 O 2 8 9 1 5 2 8 – 1.4 0 5 3 5，6，7，7 a -t e t r a h y d r o -4，4，7 a -t r i m e t h y l -2 ( 4 H ) -B e n z o f u r a n o n e 5，6，7，7 a -四氢-4，4，7 a -三甲基-2 ( 4 H )苯并呋喃酮 C 11 H 16 O 2 9 1 1 5 3 2 0.9 8 0.9 5 5 4 2，6，1 0 -t r i m e t h y l -T e t r a d e c a n e 2，6，1 0 -三甲基-十四烷 C 17 H 36 9 7 1 5 5 0 0.6 3 –5 5 4 -m e t h y l -P e n t a d e c a n e 4 -甲基十五烷 C 16 H 34 9 8 1 5 5 4 0.5 5 –5 6 2 -m e t h y l -P e n t a d e c a n e 2 -甲基十五烷 C 16 H 34 9 5 1 5 5 9 1.1 2 –5 7 1，2，3 -t r i m e t h o x y -5 -( 2 -p r o p e n y l ) -B e n z e n e 5 -( 2 -丙烯基) -1，2，3 -三甲氧基苯C 12 H 16 O 3 9 6 1 5 6 0 – 0.6 0 5 8 ( -) -S p a t h u l e n o l ( -) -匙叶桉油烯醇 C 15 H 24 O 9 0 1 5 7 9 0.9 4 0.5 9 5 9 N -A c e t y l t y r a m i n e N -乙酰基酪胺 C 10 H 13 N O 2 8 6 1 5 9 7 – –6 0 H e x a d e c a n e十六烷C 16 H 34 9 9 1 6 0 0 4.0 7 2.7 1 6 1 T e t r a d e c a n a l十四醛C 14 H 28 O 9 8 1 6 1 0 0.7 7 1.6 8 6 2 2，6 -B i s ( 1，1 -d i m e t h y l e t h y l ) -4 -( 1 -o x o p r o p y l ) p h e n o l 2，6 -二-叔丁基-4 -( 1 -氧代丙基)苯酚C 17 H 28 O 2 9 6 1 6 2 9 – 6.9 9 6 3 2 -m e t h y l -8 -p r o p y l -D o d e c a n e 2 -甲基-8 -丙基-十二烷 C 16 H 34 9 7 1 6 4 5 1.5 5 –6 4 2 -m e t h y l -H e x a d e c a n e 2 -甲基十六烷 C 17 H 36 9 0 1 6 6 4 0.3 2 –6 5 2 -d i e t h y l a m i n o -1 -p h e n y l -1 -P r o p a n o n e二乙胺苯丙酮 C 13 H 19 N O 8 3 1 6 6 5 – 1.9 1 6 6 ( Z ) -3 -H e p t a d e c e n e ( Z ) -3 -十七烯 C 17 H 34 8 5 1 6 7 2 – 1.0 0 6 7 H e p t a d e c a n e十七烷C 17 H 36 9 0 1 7 0 0 1.6 7 1.2 8 6 8 2，6，1 0，1 4 -t e t r a m e t h y l -P e n t a d e c a n e 2，6，1 0，1 4 -四甲基-十五烷 C 19 H 40 9 2 1 7 0 6 1.3 0 0.5 5 6 9 h e p t a d e c y l -O x i r a n e十七烷基环氧乙烷 C 19 H 38 O 9 7 1 7 1 2 0.4 2 7 0 1 2 -m e t h y l -T r i d e c a n o i c a c i d，m e t h y l e s t e r 1 2 -甲基十三酸甲酯 C 15 H 30 O 2 8 9 1 7 2 3 0.4 5 0.2 8 7 1 T e t r a d e c a n o i c a c i d肉豆蔻酸 C 14 H 28 O 2 9 1 1 7 8 1 1.7 8 2.1 3 7 2 O c t a d e c a n e十八烷C 18 H 38 9 9 1 8 0 0 0.4 4 0.5 9 7 3 2，6，1 0，1 4 -t e t r a m e t h y l -H e x a d e c a n e 2，6，1 0，1 4 -四甲基-十六烷 C 20 H 42 8 9 1 8 0 3 0.4 1 –

7 4 H e x a d e c a n a l十六醛C 16 H 32 8 3 1 8 1 4 – 0.8 3 7 5 6，1 0，1 4 -t r i m e t h y l -2 -P e n t a d e c a n o n e 6，1 0，1 4 -三甲基-2 -十五烷酮 C 18 H 36 O 9 0 1 8 4 6 6.6 9 4.4 1 7 6 D i i s o b u t y l p h t h a l a t e邻苯二甲酸二异丁酯 C 16 H 22 O 4 9 4 1 8 6 9 0.3 4 0.3 4 7 7 4 -o c t a d e c y l -M o r p h o l i n e 4 -十八基吗啉 C 22 H 45 N O 8 9 1 8 7 8 – 2.4 1 7 8 O c t a d e c a n a l十八醛C 18 H 36 O 9 0 1 9 1 5 – 0.3 4 7 9 1 4 -m e t h y l -P e n t a d e c a n o i c a c i d，m e t h y l e s t e r 1 4 -甲基十五烷酸甲酯 C 17 H 34 O 2 9 0 1 9 2 2 0.3 0 0.2 2 8 0 n -H e x a d e c a n o i c a c i d棕榈酸 C 16 H 32 O 2 9 2 1 9 7 3 0.5 4 2.6 2 8 1 D o c o s a n e二十二烷C 22 H 46 9 9 2 2 0 0 0.5 7 0.4 7 8 2 ( Z ) -9 -T r i c o s e n e ( Z ) -9 -二十三烯 C 23 H 46 9 2 2 2 6 1 0.5 5 0.6 6 8 3 T r i c o s a n e二十三烷C 23 H 48 9 9 2 3 0 0 1.5 6 2.7 7 T o t a l ( % ) 9 8.2 6 7 7.9 5烃类化合物( % ) 4 1.0 4 2 1.7 3含羰基化合物( % ) 2 9.2 3 2 6.4 6萜类化合物( % ) 8.0 8 6.0 2酯类化合物( % ) 8.1 1 2.1 2酸类化合物( % ) 3.5 6 5.1 8

通过GC-MS分析，从连翘花蕾中分离出65个化学成分，鉴定了其中的60个(见表1)，已鉴定成分占总挥发性成分的98.26%，其中含量较高的成分是:十五烷(14.07%)、6，10，14-三甲基-2-十五烷酮(6.69%)、5-乙氧基-3，4-二氢-2H-吡咯基-2-甲酸乙酯(5.62%)、壬醛(4.14%)和十六烷(4.07%)等。

从连翘花中分离出103个化学成分，鉴定了其中的63个成分(见表1)，已鉴定成分占总挥发性成分的 77.95%，其中含量较高的是:十五烷(7.52%)、2，6-二-叔丁基-4-(1-氧代丙基)苯酚(6.99%)和6，10，14-三甲基-2-十五烷酮(4.41%)等。

3.2 讨论

3.2.1 花蕾和花挥发性成分特点

从连翘花蕾和花中共鉴定了83个化合物，其中40个化合物是共有的。连翘花蕾的挥发性成分以烃类(41.04%)为主，而连翘花的挥发性成分以醇、醛和酮类化合物(26.46%)为主;酯类化合物在花蕾中的含量为8.11%，在花中下降到2.12%，而酸类化合物则从3.56%上升到5.18%;萜类化合物在花蕾和花中的含量相差不大。

酯类化合物的含量在连翘花蕾开放的过程中从8.11%下降到2.12%，而酸类化合物从3.56%上升到5.18%，这表明，酯类化合物在连翘花蕾开放的过程中，在植物体内酯水解酶的作用下，水解成了酸类成分。

3.2.2 与文献报道比较

本研究采用SPME技术检测到的连翘花的挥发性成分和文献报道有明显的区别，吕金顺［7］等采用水蒸气蒸馏法提取连翘花挥发性成分时，发现连翘花精油的挥发性成分以烃类为主，占49.84%，醛酮类占12.68%;烃类化合物主要集中在二十三烷以上，而我们所检测到的连翘花挥发性成分以醛酮类化合物为主，烷烃主要集中在二十三烷以下。这可能与样品产地和样品前处理方法不同有关。

连翘传统以果实入药，其挥发油具有治疗风热感冒、消炎等功效。采用水蒸气蒸馏法和质谱联用检测连翘果实的挥发油，发现其药效成分是β-蒎烯、香桧烯和α-蒎烯，三者含量高达70%～80%［6］。而我们从连翘花中所检测到的单萜、倍半萜类化合物如:桉油精、萜烯醇、α-荜澄茄油烯、丁香酚和石竹烯等，总含量仅为6.02%，明显低于果实中的含量，表明花中的有效成分较果实低。

我们采用SPME技术首次在连翘花中检测到了2，6-二叔丁基对甲酚(1.21%)和2，6-二-叔丁基-4-(1-氧代丙基)苯酚(6.99%)。2，6-二叔丁基对甲酚俗称抗氧化剂264，简称BHT，广泛用于食品保鲜、药品和化妆品的包装材料上，是目前用量最大，使用范围最广的抗氧化剂，2，6-二-叔丁基-4-(1-氧代丙基)苯酚和2，6-二叔丁基对甲酚结构相似，具有抗氧化作用，这两种物质的存在提示连翘花可能具有潜在的抗氧化活性。

1Wang JM(王金梅)，Xu QT(许启泰)，Kang WY(康文艺).Research progress on chemical components and the pharmacology of Forsythia suspense(Thunb.)Vahl.Natl Prod Res Dev(天然产物研究与开发)，2007，19:153-157.

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Volatiles in Buds and Flowers of Forsythia suspense

WANG Jin-mei1，2，JI Zhi-qiang1，2，KANG Wen-yi1，2*1Institute of Chinese Materia Medica，Henan University;2Pharmaceutical College of Henan University，Kaifeng 475004，China

The volatile constituents from the buds and flowers of Forsythia suspense were analyzed by head-space solid phase microextraction，coupled with GC-MS.Eighty-three compounds were identified from the buds and flowers of F.suspense，and 40 compounds were mutual.Hydrocarbons(41.04%)were the main constituents in the buds and alcohols，aldehydes and ketones(26.46%)were dominant in the flowers.Esters decreased from 8.11%in buds to 2.12%in flowers，and acids increased from 3.56%in buds to 5.18%in flowers.It indicated that esters were hydrolyzed into acids with blooming.

solid-phase microextraction;Forsythia suspense;volatile constituents

1001-6880(2011)03-0458-06

2009-03-13 接受日期:2009-08-03

河南省教育厅基础研究计划(2008A360002);河南省教育厅青年骨干教师资助计划(2008)

*通讯作者 E-mail:kangweny@hotmail.com

R284.1;Q946.91

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