血清血管内皮生长因子C含量对胰腺癌患者预后判断的意义

李凯 李明杰 郑直 何涛 王勇 屈碧辉

·论著·

血清血管内皮生长因子C含量对胰腺癌患者预后判断的意义

李凯 李明杰 郑直 何涛 王勇 屈碧辉

目的探讨血清血管内皮生长因子C(VEGF-C)含量对进展期胰腺癌患者预后判断的价值。方法选择2006年8月至2008年2月间收治的35例进展期胰腺癌患者，采用ELISA法检测患者血清VEGF-C、CA19-9含量，行KPS评分，应用Kaplan-Meier法计算生存率。log-rank法检验不同变量间生存率的差异，Cox回归模型进行单因素和多因素分析。结果35例胰腺癌患者血清VEGF-C含量平均为(1309±542)pg/ml，显著高于健康对照者的(278±115)pg/ml(P<0.01)。应用Cox风险模型对影响进展期胰腺癌患者预后因素行单因素分析， KPS评分、血清CA19-9及VEGF-C均为独立影响因素(χ2=7.208、6.908、3.867，P=0.007、0.009、0.049)；行多因素分析， 血清VEGF-C和KPS评分为独立影响因素(χ2=4.873，P=0.027；χ2=5.274，P=0.022)。以血清VEGF-C含量1280 pg/ml为分界点，≤1280 pg/ml患者的中位生存时间为10.0个月，平均生存时间为11.3个月， 1年累积生存率为50.0%；而>1280 pg/ml患者分别为6.0、6.3个月和5.9%。两组间差异有统计学意义(χ2=9.400，P=0.002)。以KPS评分70为界，<70患者中位生存时间为6.0个月，平均生存时间为6.6个月，1年累积生存平均为21.4%；而≥70分者分别为9.0、10.1个月和33.3%，两组间差异有统计学意义(χ2=4.040，P=0.044)。血清CA19-9值≤200 U/ml与>200 U/ml的两组患者的平均生存时间(10.0个月比7.8个月)、1年累积生存率(37.5%比21.1%)差异均无统计学意义(χ2=1.910，P=0.167)。结论血清VEGF-C含量可作为判断进展期胰腺癌患者预后的独立影响因素。

胰腺肿瘤； 血管内皮生长因子C； CA19-9； KPS评分； 预后

国内外许多研究证实，1997年发现的血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)通过肿瘤“淋巴管生成”机制促进肿瘤细胞淋巴结转移。Tamura等[1]及Mitsuhashi等[2]报道，宫颈癌和非小细胞性肺癌肿瘤患者血清VEGF-C含量与患者术后生存时间呈显著负相关。近年的研究证实，胰腺癌组织内VEGF-C的表达与其淋巴结转移及预后密切相关[3-4]。为此，本研究探讨血清VEGF-C含量在进展期胰腺癌患者预后评估中的应用价值。

资料与方法

一、研究对象及一般情况

选择本院2006年8月至2008年2月经CT检查证实的进展期胰腺癌病例35例。其中男22例，女13例；年龄35～78岁，平均(61±11)岁。CT增强扫描显示胰周主要血管(包括门静脉主干及其属支、腹腔干及其属支、肠系膜上动脉、下腔静脉、腹主动脉等)中断、闭塞，癌灶半环形至环形包埋而未行手术切除[5]，也未接受正规放射或化学治疗。所有患者均有完整病历资料及随访记录(随访时间1～16个月)，于入组时留取血清标本。另选择10例健康者血清作为对照。标本置-70℃保存。

二、血清VEGF-C蛋白含量检测

采用ELISA方法检测。ELISA试剂盒购自美国BIOSOURCE公司，检测范围94.0～6000 pg/ml。按试剂盒说明书操作。根据标准品450 nm吸光度(A450)值绘制标准曲线，通过标准曲线计算对应的浓度。

三、其他与预后相关指标的检测

患者入组时评定KPS评分(karnofsky performance scale score)；根据CT资料计算肿瘤最大直径；蛋白质芯片(数康生物科技有限公司)检测血清CA19-9值(正常参考值界限为37 U/ml)。

四、统计学处理

结 果

一、胰腺癌患者血清VEGF-C蛋白含量及生存率

35例胰腺癌患者血清VEGF-C蛋白含量为275～2316 pg/ml，平均为(1309±542)pg/ml。10例健康对照者血清VEGF-C含量平均为(278±115)pg/ml，胰腺癌患者显著高于健康者。胰腺癌患者中位生存时间为8.0个月，平均生存时间为8.9个月(95%CI：7.35～10.44)；1年生存率为28.6%(图1)。

图1 35例胰腺癌患者生存曲线

二、胰腺癌患者预后因素分析

将35例胰腺癌患者的年龄、肿瘤最大直径、肿瘤生长部位、KPS评分、血清CA19-9及VEGF-C含量等指标一起纳入Cox风险模型进行预后单因素分析，其中KPS评分、血清CA19-9及VEGF-C含量为影响进展期胰腺癌患者预后的独立因素(表1)。

对上述筛选变量进行多因素Cox回归模型分析，引入标准为0.10、删除标准为0.11，采用后退法。最先退出模型的是CA19-9含量(χ2=3.738，P=0.053)，然后是VEGF-C含量(χ2=4.873，P=0.027)，最后是KPS评分(χ2=5.274，P=0.022)，KPS评分、血清VEGF-C含量为影响进展期胰腺癌患者预后的独立因素(表2)。

表135例胰腺癌患者相关变量Cox回归模型单因素分析

变量回归系数标准误χ2值P值OR值(95%CI)年龄0.0510.0293.0820.0791.052(0.994～1.113)肿瘤部位0.9020.5862.3660.1242.464(0.781～7.777)肿瘤直径0.3110.3140.9860.3211.365(0.738～2.525)KPS评分-0.0730.0277.2080.0070.929(0.881～0.980)CA19-90.0050.0026.9080.0091.005(1.001～1.008)VEGF-C0.0010.0003.8670.0491.001(1.000～1.002)

表235例胰腺癌患者相关变量Cox回归模型多因素分析

变量回归系数标准误χ2值P值OR值(95%CI)KPS评分-0.0530.0235.2740.0220.948(0.906～0.992)VEGF-C0.0010.0004.8730.0271.001(1.000～1.002)CA19-90.0030.0023.7380.0531.003(1.000～1.006)

三、KPS评分、血清CA19-9值及VEGF-C值与胰腺癌预后的关系

全组患者KPS评分平均为(62.71±18.34)分，将KPS评分分为<70分与≥70分两组。<70分14例，中位生存时间为6.0个月，平均生存时间为6.6个月， 95%CI为4.73～8.46，1年累积生存率为21.4%；≥70分21例，中位生存时间为9.0个月，平均生存时间为10.1个月， 95%CI为8.26～11.97，1年累积生存率为33.3%(图2)。两组间的差异有统计学意义(χ2=4.040，P=0.044)。

以血清CA19-9值200 U/ml为界。≤200 U/ml16例，中位生存时间为10.0个月，平均生存时间为10.0个月， 95%CI为7.66～12.31，1年累积生存率为37.5%；>200 U/ml 19例，中位生存时间为7.0个月，平均生存时间为7.8个月， 95%CI为5.96～9.56，1年累积生存率为21.1%。两组间差异无统计学意义(χ2=1.910，P=0.167)。

图2 KPS评分<70分与≥70分的两组病例生存分析

以血清VEGF-C含量1280 pg/ml为分界点[1-2]，≤1280 pg/ml 19例，中位生存时间为10.0个月，平均生存时间为11.3个月， 95%CI为9.08～13.45，1年累积生存率为50.0%；>1280 pg/ml17例，中位生存时间为6.0个月，平均生存时间为6.3个月，95%CI为5.03～7.55，1年累积生存率为5.9%。两组间差异有统计学意义(χ2=9.400，P=0.002)。

讨 论

VEGF-C是特异性的肿瘤淋巴结转移促进因子。Tamura等[1]采用ELISA法检测78例非小细胞性肺癌患者血清中VEGF-C含量，其对肿瘤淋巴结转移的预测敏感性高达85%、特异性达68%，其预测能力明显高于另2种肿瘤转移相关因子VEGF与MMP-9。Mitsuhashi等[2]对78例妇科恶性肿瘤的检测结果显示，患者血清中VEGF-C含量与患者预后呈明显正相关。我们以往的研究[3]证实，胰腺癌组织VEGF-C的表达与其淋巴结转移相关。Hiroshi等[6]报道，胰腺癌组织VEGF-C高表达与低表达者的5年生存率分别为7.7%和30.3%，相差非常显著。本结果显示，胰腺癌患者血清VEGF-C蛋白含量较正常健康者显著升高，经Cox回归模型单因素及多因素分析，均为影响胰腺癌患者预后的独立因素。以血清VEGF-C 1280 pg/ml为界，≤1280 pg/ml组患者的平均生存时间、1年累积生存率均显著高于>1280 pg/ml组患者。同样，KPS评分也是影响胰腺癌患者预后的独立因素。但它是体质状况评分，属保护性因素。

Berger等[7]的研究结果显示，CA19-9值>200 U/ml的胰腺癌患者预后明显差，具有一定的预后判断价值。本结果显示，血清CA19-9含量在单因素分析中是影响胰腺癌预后的因素，但在多因素分析时被剔除，且血清CA19-9含量≤200 U/ml与>200 U/ml的两组患者平均生存时间、1年累积生存率均无统计学意义。本结果与Berger等的结果存在一定的差别，可能与本组病例排除根治术后及远处转移等类型的病例有关。

目前，国内外以最常使用的肿瘤标志物CA19-9作为判断胰腺癌预后的辅助指标。本结果显示，血清VEGF-C较CA19-9对胰腺癌患者尤其是无法切除的进展期胰腺癌患者的预后评估更具有一定的应用价值。当然，尚需通过大样本、多分期的病例进行更深入地研究和验证。

[1] Tamura M,Oda M,Matsumoto I,et al.The combination assay with circulating vascular endothelial growth factor (VEGF)-C,matrix metalloproteinase-9,and VEGF for diagnosing lymph node metastasis in patients with non-small cell lung cancer.Ann Surg Oncol,2004,11:928-933.

[2] Mitsuhashi A,Suzuka K,Yamazawa K,et al.Serum vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF-C levels as tumor markers in patients with cervical carcinoma.Cancer，2005,103:724-730.

[3] 李凯,李明杰,何涛,等.血管内皮生长因子C在胰腺癌中的表达及其对淋巴结转移的影响.中华医学杂志,2009,89:2386-2390.

[4] Duff SE,Li C,Jeziorska M,et al.Vascular endothelial growth factors C and D and lymphangiogenesis in gastrointestinal tract malignancy.Br J Cancer,2003,89:426-430.

[5] 徐王磊,李宁,金法.超声内镜对胰腺癌可切除性评估的价值分析.实用肿瘤杂志,2007,22:311-313.

[6] Hiroshi K,Sonshin T,Kousei M,et al.Impact of vascular endothelial growth factor-C and -D expression in human pancreatic cancer:Its relationship to lymph node metastasis.Clin Cancer Res,2004,10:8413-8420.

[7] Berger AC,Meszoely IM,Ross EA,et al.Undetectable preoperative levels of serum CA 19-9 correlate with improved survival for patients with resectable pancreatic adenocarcinoma.Ann Surg Oncol,2004,11:644-649.

2010-06-24)

(本文编辑：吕芳萍)

ValueofserumconcentrationofVEGF-Cintheprognosisofadvancedpancreaticcancer

LIKai,LIMing-jie,ZHENGZhi,HETao,WANGYong,QUBi-hui.

DepartmentofHepatobliaryPancreaticSurgery,MunicipalCentralHospitalofWuhan,Wuhan430014,China

Correspondingauthor:LIMing-jie,Email:likaiyd@yahoo.com.cn

ObjectiveTo investigate the value of serum concentration of VEGF-C in the prognosis of advanced pancreatic cancer.MethodsThirty-five patients with advanced pancreatic cancer were selected from Aug. 2006 to Feb. 2008. ELISA method was used to detect the serum level of VEGF-C, CA19-9 and KPS score was calculated, and survival was analyzed by Kaplan Meier method. The survival difference was calculated by log rank. Cox regression model was used to perform univariate and multivariate analysis.ResultsThe mean serum concentration of VEGF-C was (1309±542) pg/ml in patients with advanced pancreatic cancer, which were significantly higher than that those in normal control [(278±115) pg/ml,P<0.01]. In Cox regression, KPS score, serum CA19-9 and VEGF-C were independent factors (χ2=7.208, 6.908, 3.867,P=0.007, 0.009, 0.049). In multivariate analysis, serum VEGF-C and KPS score were independent factors (χ2=4.873,P=0.027, χ2=5.274,P=0.022). Using serum concentration of VEGF-C at 1280 pg/ml as the cut-off point, the mean survival of patients with VEGF-C ≤1280 pg/ml was 10.0 months, and the median survival was 11.3 months, 1 year cumulative survival was 50.0%; while they were 6.0 months, 6.3 months and 5.9% in patients with VEGF-C>1280 pg/ml, and the difference was statistically significant (χ2=9.400,P=0.002). Using KPS score 70 as the cut-off point, the mean survival of patients with KPS <70was 6.0 months, and the median survival was 6.6 months, 1 year cumulative survival was 21.4%; while they were 9.0 months, 10.1 months, 33.3% in patients with KPS score≥70,and the difference was statistically significant (χ2=4.040,P=0.044). The difference of the median survival, 1 year cumulative survival in patients with CA19-9 ≤200 U/ml or >200 U/ml was not statistically significant (10.0 monthsvs. 7.8 months, 37.5%vs. 21.1%; χ2=1.910,P=0.167).ConclusionsSerum concentration of VEGF-C can used as an independent factor for predication of prognosis of patients with advanced pancreatic cancer.

Pancreatic neoplasms; Vascular endothelial growth factor C; CA19-9; Karnofsky performance scale score; Prognosis

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.03.003

430014 武汉，武汉市中心医院肝胆胰外科

李明杰，Email:likaiyd@yahoo.com.cn