灭菌温度和pH值对克林霉素磷酸酯注射液稳定性的影响

陈美田，董雪菊，张孝莹

(1.山东大学药学院，山东 济南250012;2.辰欣药业股份有限公司，山东济宁272031)

克林霉素磷酸酯注射液的临床应用主要适用于革兰阳性菌和厌氧菌引起的多种感染性疾病.其化学名称为:6－(1－甲基－4－丙基－2－吡咯烷碳酰胺基)－1－硫代－甲基－7－氯－6，7，8－三脱氧－L－苏式－α－D－半乳糖吡喃糖苷－2－二氢磷酸酯，化学结构式为:

根据其化学结构式分析其可能存在的杂质:林可霉素、克林霉素、林可霉素－2磷酸酯等.我们根据克林霉素磷酸酯结构式及其可能存在的杂质进行了研究分析.

克林霉素磷酸酯分子结构中含有磷酸酯键，硫甲基，卤素等活泼基团，易发生水解，氧化，取代，消除，重排等反应.分子中含有硫原子，易被氧化产生高价硫.或在酸性条件下磷酸酯键和硫甲基易水解.在碱性或受热时化合物容易产生卤素水解和消除反应.在上述降解过程中还会发生异构化反应.根据以上的结构分析，确定影响本产品质量的影响因素，并进行对比实验.

1 仪器与试药

高效液相色谱仪(日本岛津);pH计(上海雷磁仪器厂);电子恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司).克林霉素磷酸酯(山东鲁抗辰欣药业自制).

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:用辛烷(C8)基硅烷键合硅胶为填充剂;检测波长:210 nm;流速:1.0 mL·min－1;流动相:磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾10.54 g溶于775 mL水中，用85%磷酸溶液调节pH值至2.5)－乙腈(775∶225).理论板数按克林霉素磷酸酯峰计算，应不低于1 500.

2.2 pH值 根据克林霉素磷酸酯的结构判断，该药的磷酸酯键和7位氯容易水解，较不稳定.中性环境有利于抑制磷酸酯键的水解生成克林霉素，酸性环境有利于抑制7位氯的水解，因此对pH做了详细的考察.

根据对本产品的质量考察得出:克林霉素磷酸酯注射液在生产、贮藏过程中变化最大的杂质是相对保留时间为0.6的林可霉素－2磷酸酯和相对保留时间为1.4的克林霉素，它们分别是克林霉素磷酸酯7位氯和2位磷酸酯水解产物.我们将这两个杂质作为主要考察对象，配制了一系列pH值的样品，100℃灭菌15 min后进行HPLC分析，结果如下:

表1 克林霉素磷酸酯的pH测定结果

图2 不同灭菌时间主要杂质含量变化图

2.3 灭菌时间 我们将产品放入100℃水浴中灭菌，分别放入 5、10、15、20、30、45、60 min 后取样进行有关物质检查，同时检测0时数据.对两个主要杂质在100℃灭菌时随时间的变化情况进行了研究，结果见图2、表2.

表2 灭菌实验测定结果

由图2可知，这两个杂质的量均随灭菌时间增加而增大，同时可以看出本品不能耐受高温灭菌，高温下本品还会产生许多新杂质，并且会放出硫化氢的气味.

3 结论

克林霉素是克林霉素磷酸酯的特定杂质，它是克林霉素磷酸酯在体内代谢产生的药效成分.林可霉素－2磷酸酯属于非特定杂质，其药理作用也未知，属于需要严格控制的杂质.根据杂质随pH值变化图，应该选择尽可能低的pH值，但在实际生产中发现料液在pH值6.1以下变得特别粘稠，克林霉素磷酸酯很容易析出，所以实际生产pH值控制在6.1左右比较合适.从灭菌实验可以看出，本品注射剂不适合在高温条件下生产.因此采用冻干粉针和无菌生产工艺除菌过滤的小针剂在临床使用上更安全.