气相色谱法测定小儿感冒颗粒中百秋李醇的含量

北京同仁堂科技发展股份有限公司（100079）王春燕

小儿感冒颗粒是由广藿香、菊花、连翘、大青叶、板蓝根、地黄、地骨皮、白薇、薄荷、石膏十味药组成，具有清热解表功能，用于小儿外感风热所致发热重，微恶风寒，头痛、有汗或少汗，咽红肿痛，口渴，舌尖红，苔薄黄而干，脉浮数等。处方中的君药广藿香所含的百秋李醇是主要有效成分，原质量标准中采用薄层扫描法测定百秋李醇含量，因展开剂中含毒性有机试剂苯，故改进为气相色谱法测定百秋李醇的含量，方法简便、准确，可应用于本品的质量控制。

1 仪器与试剂

Agilent N8960高效气液相色谱仪，FID检测器，弹性石英毛细管柱（柱长30m，内径0.22mm，膜厚度0.25um）OV-101;载气：氮气。百秋里醇对照品购自中国药品生物制品检定所。正己烷为分析纯。小儿感冒颗粒（外购）。

2 试验内容

2.1 色谱分析条件 程序升温：初始温度110℃，以每分钟5℃速率升温至160℃，保持20分钟。进样口温度：220℃。检测器温度：220℃，载气流速：1.5ml/min。色谱柱的理论塔板数按百秋里醇（C15H26O）峰计算，应不低于50000。

2.2 线性关系的考察 分别精密吸取百秋里醇对照品溶液（258ug/ml）1ml，2 ml，4ml，6ml，8ml，10ml置10ml容量瓶中，各加正己烷至刻度，摇匀，分别精密吸取1ul注入气相色谱仪，记录峰面积。以百秋里醇对照品进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为 Y=0.26869x+0.52725，相关系数 r=0.99997。结果表明，百秋里醇在25.8～258.0μg范围内呈良好线性关系。

2.3 供试品溶液和对照品溶液的制备

2.3.1 供试品溶液的制备 精密量取本品100ml，照挥发油测定法（《中国药典》2005版一部附录XD）试验，自测定器上端加水至刻度部分，并溢入烧瓶为止，加正己烷5ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸4小时，放冷，待溶液分层清晰，分取正己烷液。挥发油测定器内壁用正己烷少量洗涤，分取正己烷液，水液再用正己烷2ml提取1次，合并正己烷液，置10ml量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，即得。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取百秋里醇对照品，用正己烷配制成每毫升含百秋里醇100μg的溶液。精密吸取对照品溶液，供试品溶液各1ul，注入气相色谱仪，测定，即得。百秋里醇对照品和小儿感冒颗粒的高效液相色谱图（略）。

2.4 样品测定结果 3批样品(批号4260992、4260993、4260994) 测定结果分别为2.838ug/ml、3.811ug/ml及2.954ug/ml。

2.5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液（4260995）溶液，分别于配制后0，2，4，8，12，24小时测定峰面积。结果表明，百秋里醇在24小时内峰面积稳定，RSD为1.05%。

2.6 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液（批号4260995），重复进样5次，测定峰面积，RSD=0.53%（n=5）。

2.7 重现性试验 分别精密称取同一批样品，按供试品溶液制备方法制备6份，测定结果，RSD=0.57%（n=6）。

2.8 空白试验 按处方中药味的比例自配不含广藿香的群药，制成空白溶液，按样品方法测定，结果空白溶液在与对照品百秋里醇相同保留处未显示明显色谱峰，故认为无干扰。

2.9 回收率试验 采用加样回收法。精密吸取已知含量的同一批号样品（批号：4260996 百秋里醇含量为37.9ug/支）100 ml，共6份，分别精密加入百秋里醇对照品溶液（0.03068mg/ml）10ml，均按上述供试品溶液的制备方法制备，吸取1ul进样，测定百秋里醇的含量，计算加样回收率，结果平均回收率为96.9%，RSD为1.85%（n=6）。结果见附表。

附表 回收率试验

3 讨论

参考《中国药典》[1]和文献[2]中程序升温方法，认为前者主峰与其他峰未分离完全，后者主峰与其他峰分离完全（R＞1.5），且温度较低，检测时间较短，故选择后者，确定初始温度110℃，以每分钟5℃的速率升温至160℃，保持20分钟，进样口温度：220 ℃，检测器温度：220℃。