肩周炎痛贴中姜黄药材醇提工艺研究

贵州省食品药品检验所（550004）王海宁

肩周炎痛贴处方由姜黄、威灵仙、见血飞、乳香、没药、冰片组成，是一种纯中药制剂，功能为活血化瘀、祛风除湿、消肿定痛，用于肩周炎、腰肌劳伤等。姜黄为方中君药，主要含酚性成分，而酚性成分中的姜黄素为抗炎消肿的活性成分[1]，故姜黄的醇提部分以姜黄素为指标进行工艺优选。实验以乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间4个因素为主要影响因素，采用四因素三水平L9（34）正交试验进行优选[2]，以有效成分姜黄素为指标。经筛选优化得到最佳醇提工艺，以确定姜黄的醇提工艺。

1 仪器与材料

HH.S1-4型电热恒温水浴锅（上海跃进医疗器械厂），FZ-102型植物粉碎机（武汉琴台医疗器械厂），AB104-S型电子分析天平（日本岛津公司），LC-10A型高效液相色谱仪（日本岛津公司）。

姜黄：产于四川，投料前粉碎成＜5mm的粗粉；姜黄素对照品（含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号：0081-0340），乙腈为色谱纯，水为三重蒸馏水，其它化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 样品中姜黄素的含量测定 样品处理：精密量取滤液总量，摇匀，并取续滤液用0.45μm的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-1%冰醋酸（50∶50）为流动相；检测波长为423nm；柱温25℃；进样量10 μl。

附表1 因素水平表

附表2 L9（34）正交试验设计及结果

附表3 姜黄素提取率方差分析表

2.2 姜黄药材提取的正交试验设计[2]通过对常规回流提取工艺中影响提取率的因素进行分析，在药材粒度、提取温度不变的情况下，以乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间4个因素为主要影响因素，进行四因素三水平L9（34）正交试验设计，筛选最佳提取工艺。见附表1。

2.3 实验方法 取处方量姜黄药材，在平行条件下按L9（34）正交表进行试验，每个条件重复1次试验，每个样品提取完毕，滤过，合并滤液，准确量取滤液，取滤液适量测定姜黄素含量。以姜黄素的提取率为考察指标进行工艺优选。结果见附表2、3。

2.4 结果分析 以姜黄素为考察指标，由附表2中极差R值大小显示，各因素作用主次为：B>C>A>D。附表3方差分析结果表明，各因素均具有显著性意义（P ＜0.01），最佳工艺条件为A3B2C3D3。在影响较小的A因素及D因素中，A2与A3、D2与D3极差较小，可选择A2B2C3D2条件与最佳工艺条件进行比较，以验证筛选工艺。两种工艺的提取率差异较小（0.87%）。从省工省时、降低能耗考虑，选择乙工艺进行生产，即药材加8倍量80%的乙醇加流提取3次，每次1h，滤过，合并滤液。

3 讨论

肩周炎痛贴主药姜黄含酚性成分为：姜黄素（Curcumin），脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素，姜黄素I、Ⅱ、Ⅲ及挥发油等成分[3][4]。姜黄的醇提物有抗炎、抗氧化、抗凝、降血脂、抗动脉粥样硬化，能对抗神经性垂体所致大鼠心电图S-T波、T波变化，增加心肌心流量，具有保肝利胆作用。姜黄素及姜黄水提物对多种实验性炎症模型均有抑制作用。对角叉菜引起的足跖肿胀有抑制作用[5]。小鼠注射姜黄乙醇提取物，对四氯化碳引起的血清ALT和AST升高有明显抑制作用[6]。大鼠灌胃姜黄乙醇提取物不仅使胃黏膜壁明显增厚，对胃黏膜有保护作用，而且使大鼠胃腺内非蛋白巯基含量恢复[7]。姜黄素对5-羟色胺诱发的豚鼠胃溃疡有抗溃疡作用[8]。实验性高脂血症大鼠灌服姜黄醇提取物有明显降低血清胆回醇、甘油三酯的作用[9]。姜黄素及姜黄醇提取物能抑制中国仓鼠卵巢细胞生长[10]，可抑制引起胆囊炎的大多数病菌的生长。姜黄临床常用于治疗风寒湿痹，如：肩周炎、骨刺。姜黄素为抗炎作用的主要活性成分，由于姜黄为方中主药，所含成分复杂，为保证有效成分充分提取，采用高浓度乙醇提取。本实验考察了药材大小对提取的影响，取饮片、2～5mm粉碎药材、20目粗粉药材3份，在相同条件下用8倍量的80%乙醇回流提取3次，每次1h，滤过，准确量取滤液体积，测定姜黄素的含量，计算提取率。结果显示，三者均无明显差异，从省工省时考虑，选择2～5mm的粉碎度进行提取。经过实验，以乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间4个因素为主要影响因素，采用四因素三水平L9（34）正交试验进行优选，以有效成分姜黄素为指标，采用HPLC法测定姜黄中姜黄素的含量。经筛选优化得到姜黄药材最佳醇提工艺，值得推广应用。