三种常用中药注射液的过敏性研究

王增仙，武敏霞，高萧枫，李艳丽，王明军，李 平

（山西生物应用职业技术学院，山西太原030031）

双黄连注射液清热解毒、清宣风热，用于外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛，适用于病毒及细菌感染引起的上呼吸道感染、肺炎、扁桃体炎、咽炎等，临床静脉滴注剂量1 mL/kg时出现急性过敏性不良反应，临床主要表现为皮疹［1］、血尿［2］、头晕［3］、心悸［3］、过敏性休克［3-6］，甚至死亡［6-7］等不良反应。清开灵注射液为中成药制剂，主要成分为胆酸、珍珠母、猪去氧胆酸、桅子、水牛角、板兰根、金银花等，具有清热解毒、化痰通络、醒神开窍之功效，在临床上常用于病毒所致的上呼吸道感染、肺炎等病症，静脉滴注20 mL/d～40 mL/d即可出现过敏反应，其临床过敏反应主要临床表现为过敏性休克、烦躁不安、面部及全身发红、急性喉头水肿、过敏性哮喘等［8］。复方丹参注射液临床上广泛用于冠心病、高血压、脑血管疾病的治疗，还可用于慢性肝炎、颈椎病、心肌炎、糖尿病等的辅助治疗，临床过敏多发生于静脉滴注，10 mL/次～20 mL/次即可出现过敏反应，主要临床表现为过敏性休克、急性肾功能损害、过敏性哮喘等［9］。关于双黄连注射液、清开灵注射液和复方丹参注射液过敏性临床不良反应的报道有很多，本文按照《中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光变态反应）研究的技术指导原则》对临床上常见的以上3种注射液进行了豚鼠全身主动过敏试验和大鼠皮肤被动过敏性研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 SD大鼠，体重180 g～220 g，由山东中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号为SCXK（鲁）2005-0015。一级白色豚鼠，体重300 g～400 g，由山东省米歇尔生物制品公司提供。

1.1.2 药品与试剂 双黄连注射液，苏州东瑞制药有限公司，批号：080531003；清开灵注射液，河南神农制药厂，批号：09041105，规格10 mL；复方丹参注射液，10 mL／支，正大青春宝药业有限公司，批号：0807111。卵白蛋白，上海伯奥生物科技有限公司，批号：080601。0.9% 氯化钠溶液，由山东临淄制药厂生产，批号：07050202。伊文斯兰，由北京利科生化科贸有限公司生产。

1.2 实验方法

1.2.1 给药剂量设计 双黄连注射液静脉滴注发现过敏剂量在1 mL/kg，按每次70 mL/人换算大鼠等效剂量为6.3 mL/kg，故设计给药剂量为6.3 mL/kg；同样方法换算豚鼠等效剂量为5.5 mL/kg，故设计给药剂量为5.5 mL/kg。清开灵注射液静脉滴注发现过敏剂量在20 mL/次～40 mL/次，按每人40 mL/d换算大鼠的等效剂量为3.6 mL/kg，故设计剂量低剂量为3.6 mL/kg，高剂量为7.2 mL/kg；同样方法换算豚鼠等效剂量为3.1 mL/kg，故设计低剂量为3.1 mL/kg，高剂量为6.2 mL/kg。复方丹参注射液静脉滴注发现过敏剂量在 10 mL/次～20 mL/次，1 次/d，按每人 20 mL/d换算大鼠的等效剂量为1.8 mL/kg，故设计剂量低剂量为1.8 mL/kg，高剂量为5.4 mL/kg；同样方法换算豚鼠等效剂量为1.6 mL/kg，故设计低剂量为1.6 mL/kg，高剂量为4.8 mL/kg。卵白蛋白阳性对照组，大鼠给药剂量为75 mL/kg，按7.5 mg/mL给药浓度和1 mL/100 g的给药体积给药；豚鼠给药剂量为5 mg/只，按5 mg/mL给药浓度和1 mL/只的给药体积给药。0.9%氯化钠溶液阴性对照组给药体积同阳性对照组。

1.2.2 被动皮肤过敏性试验

1.2.2.1 致敏 取健康大鼠14只，随机分为双黄连注射液组、清开灵注射液高剂量组、清开灵注射液低剂量组、复方丹参注射液高剂量组、复方丹参注射液低剂量组、阳性对照组和阴性对照组7组，每组2只。各组隔日腹腔注射相应的药液，共3次。

1.2.2.2 抗血清制备 末次致敏注射后第10天采血，2 000 r/min离心10 min，分离血清。-20℃保存，2 w内备用。

1.2.2.3 激发 另取42只大鼠随机分为7组，分组同1.2.2.1。大鼠两侧背部剪毛，面积约3 cm×4 cm。上述各组抗血清用生理盐水稀释成1∶2和1∶8。在预先剪毛的左侧和右侧背部皮肤皮内分别注射各相应组别1∶2和1∶8稀释的抗血清0.1 mL。24 h后各组静脉注射内含0.5%伊文斯兰染料的致敏剂量药液。

1.2.3 全身主动过敏试验

1.2.3.1 致敏 取健康雄性豚鼠42只，随机分为7组，方法同被动皮肤过敏性试验，每组6只。隔日腹腔注射相应的药液，共注射3次。

1.2.3.2 激发 于第1次致敏后第10天～第14天静脉给药激发，激发剂量为致敏剂量的2倍。由于双黄连注射液组、清开灵注射液高剂量组、复方丹参注射液高剂量组激发剂量应为致敏剂量2倍时给药体积远远超过豚鼠静脉给药的最大体积，故剂量仍给予致敏剂量，其余各组剂量为致敏剂量的2倍。

1.2.4 指标观察 30 min后麻醉处死各组动物，剪取背部皮肤，测量皮肤内层的蓝色斑点大小，直径大于5 mm者为阳性。

2 结 果

2.1 大鼠皮肤被动过敏试验（PCA）结果

结果见表1。

表1 大鼠皮肤被动过敏试验（PCA）结果 （只）

由表1可以看出，皮肤被动过敏试验双黄连注射液有过敏反应；清开灵注射液高剂量组和低剂量组均出现过敏反应，其他组均未出现过敏反应。

2.2 按照过敏反应症状评价表对豚鼠过敏反应进行评价

结果见表2。

表2 全身主动过敏试验结果

由表2可以看出，主动过敏试验双黄连注射液有4只动物过敏反应弱阳性，清开灵注射液高剂量组有1只动物过敏反应弱阳性。

3 讨论

本研究提示全身主动过敏性试验结果与临床具有更好的相关性，但复方丹参注射液在两个试验中均显示阴性结果，而在临床中不断有过敏性反应报导，是中药复方稳定性原因还是其他原因还有待进一步研究。该研究提示新药临床前研究的几种过敏性试验部分试验结果为阳性时，临床应用时应详细了解患者是否有过敏史，并谨慎用药，减少因过敏反应而引起的不良后果；新药临床前研究过敏性试验为阴性的中药复方制剂也应密切注意患者的临床反应。

［1］韵磊，刘爱辉.静滴注射用双黄连引发过敏性皮疹3例［J］.中国误诊学杂志，2007，7（8）：1 922.

［2］蒋文峰，易秋兰，严振春.静脉滴注双黄连注射液致血尿1例［J］.江西医学，2009，44（4）：354.

［3］赵红.静滴双黄连注射液致不良反应2例报告［J］.青海医药杂志，2007，37（3）：52.

［4］涂彩然，刘洋.静脉点滴双黄连过敏性休克1例［J］.井冈山学院学报：综合版，2006，27（10）：133.

［5］陈忠华.双黄连粉针剂致过敏性休克2例［J］.广东医学院学报，2000，18（4）：349.

［6］袁桂芝.双黄连注射液发生过敏反应36例临床特点分析［J］.实用医技杂志，2010，17（4）：306.

［7］尹爱群，王军栋，安勤玲.双黄连注射液不良反应致死1例［J］.中国药事，2007，21（10）：864.

［8］丰希，清开灵注射液致过敏反应 4 例［J］.中外医疗，2010，29（1）：128

［9］全良智，戴卫波，曾聪彦.复方丹参注射液过敏性不良反应84例文献分析［J］.亚太传统医药，2009，5（6）：154