皮肤鳞状细胞癌组织中PTEN和Ki-67蛋白的表达

周树伟，苏蓓蓓，陈旻静

1)新乡市中心医院头颈乳腺外科 新乡 453000 2)新乡市中心医院皮肤科新乡453000 3)郑州大学第一附属医院整形外科郑州450052

(2010-09-13收稿 责任编辑 赵秋民)

皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)是一种常见于头面部的恶性肿瘤，随着现代化进程的发展，其已成为整形外科及头颈肿瘤外科的一种常见病。PTEN是继p53基因之后发现的一种肿瘤抑制基因，近年研究［1-2］发现，PTEN蛋白失表达与一些恶性肿瘤的生物学行为和预后密切相关。Ki-67抗原是一种与细胞增殖相关的细胞核内蛋白质，大量研究［3-5］表明Ki-67标记指数与肿瘤的发生发展、预后、复发和死亡相关。作者采用免疫组化SP方法检测了皮肤SCC及正常组织中PTEN和Ki-67蛋白的表达情况，探讨它们异常表达与皮肤SCC发生、分化等的关系。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选用郑州大学第一附属医院病理科2005年6月至2007年12月存档且病历资料完整、病理诊断明确的34例皮肤SCC组织，其中男20例，女14例。根据 Border分级标准［6］，高分化15例，中分化11例，低分化8例。患者无合并皮肤病、结缔组织病、免疫系统疾病及其他重要脏器疾病，术前均未进行放疗、化疗、免疫、冷冻及激光等治疗。15例正常皮肤组织(对照组，男9例，女6例)为郑州大学第一附属医院整形外科非癌患者行全厚皮移植时所修剪剩余的全厚皮。

1.2 2种组织中PTEN及Ki-67蛋白的检测 鼠抗人PTEN单克隆抗体(浓缩型)、鼠抗人Ki-67单克隆抗体(浓缩型)、SP免疫组化试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。采用免疫组化SP法，实验步骤严格按照试剂盒说明书进行。用PBS液代替一抗作阴性对照，用已知的阳性切片作阳性对照，PTEN及Ki-67(抗体均按1∶50稀释)蛋白染色阳性反应信号均呈棕黄色细小颗粒，位于细胞核。参考Mohsin等［7］的标准进行判析。①先在低倍镜下选取细胞分布均匀的视野，再在高倍镜下用CMIAS病理彩色图像分析系统进行图像分析，每张切片计数500个细胞中的阳性细胞数，计算阳性细胞的百分率，阳性细胞百分率＜10%为0分，10% ～为1分，46% ～70%为2分，＞70%为3分。②根据细胞着色的强弱:不着色为0分，浅黄色为1分，深黄色为2分，棕黄色为3分。结果取2项评分之和:0分为阴性(－)，1～2分为弱阳性(+)，3～4分为阳性()，5～6分为强阳性()。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0进行分析，应用χ2检验或四格表确切概率法比较正常皮肤及SCC组织中PTEN和Ki-67蛋白阳性表达率的差异、PTEN和Ki-67蛋白的表达与SCC分化程度的关系，应用Spearman等级相关分析SCC中PTEN和Ki-67蛋白表达的相关性，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 正常皮肤及SCC组织中PTEN和Ki-67蛋白的表达 正常皮肤及SCC组织中PTEN和Ki-67蛋白的阳性表达率分别为100.0%、41.2%(14/34)和 26.7%(4/15)、82.4%(28/34)，差异有统计学意义(χ2=14.909 和 14.245，P 均 ＜0.001)。见图1。

图1 正常皮肤(A)及SCC(B)组织中PTEN和Ki-67蛋白的表达(SP，×400)1:PTEN;2:Ki-67。

2.2 PTEN和Ki-67蛋白的表达与SCC分化程度的关系 高分化SCC组织中PTEN蛋白的阳性表达率为66.7%(10/15)，在中低分化组织中为 36.4%(4/19)，P=0.013;高分化SCC组织中 Ki-67蛋白的阳性表达率为66.7%(10/15)，在中低分化组织中为90.9%(18/19)，P=0.066。

2.3 SCC组织中PTEN和Ki-67蛋白表达的相关性 见表1。

表1 SCC中PTEN和Ki-67蛋白表达的相关性 例

3 讨论

作者的研究结果显示正常皮肤组织中PTEN蛋白阳性表达率高于SCC;且组织分化程度越低，其阳性表达率越低，与国内外多数学者［1-2］的研究结果一致，提示PTEN蛋白低表达或失表达可能与SCC的发生发展及病理特征密切相关，检测PTEN蛋白可能为SCC的诊断及预后提供依据。

在该实验中，作者观察到SCC组织中Ki-67蛋白阳性表达率及阳性表达程度高于正常皮肤组，且Ki-67蛋白阳性表达率随SCC分化程度的降低逐渐增强，表明SCC较正常皮肤具有更高的增殖活性，Ki-67可以作为SCC发生与发展的可靠观测指标。

该研究结果还显示SCC组织中PTEN与Ki-67蛋白的表达强度呈负相关，随着PTEN蛋白表达强度的增强，Ki-67蛋白的表达强度减弱。

总之，细胞的过度增殖可能导致肿瘤的发生，增殖又是肿瘤浸润和转移的基础，因此，联合检测PTEN、Ki-67对SCC的诊断、预后及术后治疗有着极其重要的意义，两者均有表达可能是SCC预后不良的标志。

［1］Ming M，He YY.PTEN:new insights into its regulation and function in skin cancer［J］.J Invest Dermatol，2009，129(9):2109

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［3］Ikegawa K，Matsukuma S.Immunohistochemical study of p53 and Ki-67 in inverted papillom as and nasal polyps arising from nasal or paranasal regions［J］.Rinsho Byor，2005，53(6):499

［4］ Jung SY，Han W，Lee JW，et al.Ki-67 expression gives additional prognostic information on St.Gallen 2007 and Adjuvant!Online risk categories in early breast cancer［J］.Ann Surg Oncol，2009，16(5):1112

［5］ Choudhury M，Goyal S，Pujani M.A cytohistological study of Ki-67 expression in ovarian tumors［J］.Indian J Pathol Microbiol，2011，54(1):21

［6］赵辨.临床皮肤病学［M］.南京:江苏科学技术出版社，2001:1124

［7］ Mohsin SK，Zhang M，Clark GM，et al.Maspin expression in invasive breast cancer:association with other prognostic factors［J］.JPathol，2003，199(4):432