复方氨基酸注射液(18AA－I)中钾含量测定方法的改进

董雪菊，陈美田，徐艳华，刘 妍

(1.山东大学药学院，山东 济南 250012;2.山东鲁抗辰欣药业有限公司，山东 济宁 272031)

复方氨基酸注射液(18AA－I)为复方制剂，是由18种氨基酸与钾、钠、钙、镁等无机盐配制而成的灭菌水溶液。静脉滴注于人体，用于改善手术前后病人的营养状况及各种原因所致低蛋白血症患者。在能量供给充足的情况下，氨基酸输液可进入组织细胞，参与蛋白质的合成代谢，获得正氮平衡，并生成酶类、激素、抗体、结构蛋白，促进组织愈合，恢复正常生理功能。

复方氨基酸注射液(18AA－I)执行部颁标准二部第六册，部颁标准中钾的含量测定存在如下缺陷:①以前因仪器本身灵敏度不高，故钾的测定浓度较高。现使用的原子吸收分光光度仪灵敏度大幅提高，因而部颁标准中钾的测定浓度太高，甚至超出了仪器规定的线性范围;②火焰原子吸收分光光度法是根据某元素的基态原于对该元素的特征波长辐射产生选择性吸收来进行测定的分析方法。由于复方氨基酸注射液(18AA－I)含有其他高浓度的钠、钙、镁金属离子，存在电离干扰，因而造成钾的含量检测不稳，实际得出的检测结果比理论值高出60%以上，无法体现真实样品的含量，更无法保证产品质量。所以样品中需加入消电离剂氯化铯溶液和氯化锶溶液以消除其他金属离子的干扰。

1 仪器和试药

1.1 仪器 电子天平AE－200和SX205(梅特勒)，原子吸收分光光度计TAS－986(北京普析通用公司)。

1.2 试剂 氯化钙、硫酸镁、氢氧化钠、焦亚硫酸钠、氯化锶、氯化铯与氢氧化钾均为分析纯。注射用水为山东鲁抗辰欣药业有限公司自制。

1.3 对照品及样品 氯化钾为基准试剂。其他氨基酸溶液［18种氨基酸原料谷氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸、门冬氨酸、异亮氨酸、盐酸赖氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、组氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、盐酸半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸(天津天安药业有限公司)］按照工艺处方由山东鲁抗辰欣药业有限公司配制。

2 方法与结果

2.1 小试溶液的配制 ①称取氯化钾0.3760 g，置100 mL容量瓶中用注射用水稀释至刻度，摇匀即得;②氢氧化钾0.4150 g，置50 mL容量瓶中用注射用水稀释至刻度，摇匀即得。

分别精密量取①、②溶液各5 mL置50 mL量瓶中，制备2个样品(样品a和样品b)，样品a:加19 mL其他氨基酸溶液，后用注射用水稀释至刻度，摇匀即得(与复方氨基酸注射液18AA－1工艺配制一致);样品b:用注射用水稀释至刻度，摇匀即得。

2.2 检验方法

2.2.1 标准曲线的绘制 取经130℃干燥至恒重的氯化钾约1.14 g，精密称定，置1000 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀;再精密量取5 mL至50 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，再精密量取1 mL、2 mL、3 mL、4 mL分别置100 mL容量瓶中(浓度比原标准缩小了10倍)，分别加入氯化铯溶液(取氯化铯6.35 g，加水溶解成100 mL)4 mL，和氯化锶溶液(取氯化锶15.25 g，加水溶解成100 mL)4 mL(消电离剂氯化铯溶液和氯化锶溶液以消除其他金属离子如钠、钙和镁的干扰)，加水稀释至刻度，制成每1 mL中含钾0.60、1.20、1.80、2.40 μg 的溶液。按照原子吸收分光光度法［1］(《中国药典》2010年版二部附录Ⅳ D第一法)，分别在766.5 nm的波长处测定钾的吸光度。以相应的吸光度和相应的浓度计算回归方程。

2.2.2 钾供试品溶液的制备 精密量取钾溶液1 mL置10 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀;再精密吸取1 mL置50 mL容量瓶中，加入上述氯化铯、氯化锶溶液各2 mL，用水稀释至刻度，摇匀。照标准曲线制备项下的方法测定吸光度，根据回归方程计算含量。

2.3 线性关系 按照原子吸收分光光度法［1］(《中国药典》2010年版二部附录IV D第一法)，分别在766.5 nm的波长处测定，测得每 1 mL 中含标准钾0.60 μg、1.20 μg、1.80 μg、2.40 μg的溶液测得钾的吸光度，以吸光度为纵坐标，以浓度(μg·mL－1)为横坐标，绘制标准曲线，其回归方程为 Y=4.069X －0.4017，r=0.9995，结果表明钾在 0.60 ～2.40 μg范围内呈良好的线性关系。

2.4 重复性试验 将样品a连续测定6次吸光度，根据回归方程计算平均含量为 1.51 μg·mL－1，RSD 为 0.24%(n=6)，实验结果表明本方法重复性良好。

2.5 回收率试验 根据2.1小试溶液的配制方法分别配制供试品(小试1，2，3)测定吸光度，根据回归方程计算含量，见表1～3。

表1 小试1的回收率实验结果

高中低浓度平行做3份，平均回收率为:99.8%，9份样品测定结果的RSD(n=9)为:0.685%。结果表明，测定方法的回收率良好。

表2 小试2的回收率实验结果

表3 小试3的回收率实验结果

2.6 专属性试验 从表1、表2、表3的结果可以看出，样品a(加入其他成分)和样品b(未加其他成分)结果无显著性差异。说明处方中其他成分对钾的测定结果无影响。

2.7 样品测定 取6批样品，分别制备样品溶液，照标准曲线制备项下的方法测定吸光度，根据标准曲线制备项下绘制的回归方程计算含量，测定结果见表4。

表4 钾的含量测定结果

3 讨论

3.1 通常在原子吸收光谱法中，吸收在0.5以下校准曲线呈现线性，所以改进后的方法，钾的浓度比原标准降低了10倍，吸收度在0.2～0.6之间，线性关系良好。

3.2 当未知样品的浓度高于设置的浓度范围，则可调节燃烧器的角度降低火焰原子吸收法的灵敏度。如果燃烧器角度转动90°，灵敏度下降到1/20，与标准条件比较可测定相当于20倍的浓度。

3.3 经试验表明本方法专属性、准确度和精密度能达到试验的要求。结果准确、可靠、重现性好，可有效控制该制剂的质量。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录ⅣD.