陆英的不同提取分离物对小鼠镇痛作用的影响

袁志军 易增兴

(1.江西省宜春市人民医院; 2.江西省宜春学院化生学院 江西宜春 336000)

陆英(英)Sambucus chinensis Lindl《拼音》LUYING,又名接骨草、八棱麻、走马风。来源为忍冬科植物蒴藿Sambucus chinensis Lindl.的全草,分布于华北、华东、华南、西南及陕西、甘肃、宁夏等省区,生于山坡、路旁、溪边、荒野灌丛中,采制:夏、秋季采收,晒干,性味:性温,味苦[1]。由于陆英各个部分所含的有效成分不同,所以其作用也不同,以根、茎及叶入药,具活血散瘀、祛风除湿、通经活络之功效,能治扭伤、腰肌劳损、骨折、风湿痹痛等症,又能作兽药治牛跌伤[1]。茎、叶含绿原酸、乌索酸、齐墩果酸、香树酯醇、谷甾醇,并显黄酮甙、鞣质及还原糖反应,种子含氰甙类。陆英为民间常用药,应用广泛。《本经》:“主骨间诸痹,四肢拘挛疼酸,膝寒痛,阴痿,短气不足,脚肿。”鉴于传统文献及民间多用陆英治疗跌打损伤,有较好的止痛作用,故设计此提取分离方法及小鼠的镇痛作用实验来证明陆英的镇痛效果,以期探明陆英有效成分之所在。

1 材料

1.1 试剂

陆英原药材于2007年8月采自宜春市袁州区湖田乡,取全草晒干,切断,储存,备用。氯仿：分析纯,宁波市乐嘉化工有限公司,生产批号20080806;正丁醇：分析纯,上海源景化学品有限公司,生产批号20090301;石油醚：分析纯,天津市大茂化学试剂厂,生产批号20080924;乙酸乙酯：分析纯,天津市博迪化工有限公司,生产批号20080902;醋酸：分析纯,江西宏都生物化学有限公司,20080422;萘普生片;江西华太药业有公司,生产批号20081216;用蒸馏水配制成0.2%萘普生。

1.2 仪器

电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司),旋转蒸发仪(上海亚荣生化有限公司),分液漏斗;鼠笼,注射器(1mL),灌胃器(1mL)。

1.3 动物

昆明小鼠56只,体重20～45g,由南昌大学医学院动物科学部提供。

2 方法

2.1 提取分离方法

2.1.1 提取 将陆英原药材粉碎,称取粉末76g,于旋转蒸发仪1000mL的圆底烧瓶中,水浴温度设为80℃,用75%乙醇500mL回流提取3次,第一次回流1h,第2,3次为每30分钟1次,合并3提取液减压回收溶剂,得250mL浓缩液。

2.1.2 分离 采用的是溶剂极性依次递增分离法,即将陆英浓缩液分别用石油醚→氯仿→醋酸乙酯→正丁醇萃取,分取有机层。用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、水萃取的有机层水浴即可回收溶剂,正丁醇萃取的有机层溶剂需加热回收(正丁醇的沸点高于水浴温度)。后用5%乙醇溶解稀释,调整浓度,配成实验用药。陆英的石油醚层、氯仿层、醋酸乙酯层、正丁醇层、水层萃取物含生药量的浓度均为2.6g/mL。

2.2 小鼠醋酸扭体镇痛法

2.2.1 分组给药 取小鼠56只,禁食12h后(不禁水),随机分为7组,每组8只,称重标记。1组灌胃给药0.9%生理盐水溶液;2组灌胃给药0.2%萘普生;3、4、5、6、7组分别灌胃陆英的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取分离物配制的实验用药。给药后60min左右,各小鼠腹腔注射1.0%醋酸(灌胃、腹腔注射均按0.1mL/10g小鼠体重的剂量给药[2])。

2.2.2 观察记录 观察并记录注射醋酸溶液后15min内出现扭体反应的次数(腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部扭转)。计算扭体反应抑制率:抑制百分率(%)=(对照组平均扭体数一给药组平均扭体数)／对照组平均扭体数×100%。

3 结果及分析

采用SPSS 10.0统计软件包对各组数据进行单因素方差分析,0.2%萘普生能显著减少醋酸所致小鼠扭体反应次数(P＜0.01),扭体抑制率为72.82%;陆英正丁醇萃取物也能显著减少醋酸所致小鼠扭体反应次数(P＜0.01),扭体抑制率为72.49%;陆英氯仿萃取物也能显著减少醋酸所致小鼠扭体反应次数(P＜0.01),扭体抑制率仅为48.75%,而陆英的石油醚、醋酸乙酯、水萃取物这3组与生理盐水组比较,对醋酸所致小鼠扭体次数几无减少。陆英正丁醇萃取物的扭体抑制率较0.2%萘普生组稍低,可见陆英正丁醇萃取物具有较好的镇痛作用;陆英氯仿萃取物的扭体抑制率较0.2%萘普生组差一半,其镇痛效果相对不是很好,而其它3层相对0.2%萘普生几乎没有镇痛作用。

5 讨论

镇痛实验结果表明,陆英正丁醇萃取物和陆英氯仿萃取物能抑制醋酸刺激腹腔黏膜引起的痛反应,减少扭体鼠数和各鼠的扭体次数,说明陆英氯仿萃取物与正丁醇萃取物均有镇痛效果。

6 结语

陆英氯仿和正丁醇萃取物均有镇痛效果。陆英正丁醇萃取物作用效果相近。

[1]南京中医药大学.中药大辞典(下册)[M].上海:上海科技出版社,2005:2456.

[2]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000:484.