LiCA光激化学发光检测仪应用评价

韩文明

（中国航天科技集团公司七三八疗养院医疗部检验科，江苏 无锡 214081）

光激化学发光免疫技术是一种利用化学发光物质进行免疫测定的方法，其基础原理是一种均相免疫反应。它是基于两种微粒表面包被的抗原或抗体，在液相中形成免疫复合物而将两种微粒拉近，在激光的激发下，发生微粒之间的离子氧的转移，进而产生高能级的红光，通过单光子计数器和数学拟合将光子数换算为靶分子浓度。而当样本不含靶分子时，两种微粒间无法形成免疫复合物，两种微粒的间距超出离子氧传播范围，离子氧在液相中迅速淬灭，检测时则无高能级红光产生。LiCA与传统的化学发光分析仪在方法和原理等方面存在一定差异，为保证检测结果的准确性，在使用中与i2000SR的测定结果进行对比评价。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集标本来自到中国航天科技集团公司七三八疗养院健康体检的中国航天科技集团公司上海第八研究院职工，共100例。

1.2 仪器与试剂

博阳生物科技（上海）有限公司的LiCA光激化学发光检测仪及原装配套试剂，美国雅培公司的i2000SR化学发光微粒子免疫分析仪及原装配套试剂，定值血清由博阳生物提供。检验过程均按照试剂和仪器操作说明书进行。

1.3 方法

所有标本均抽取清晨空腹静脉血4mL，离心分离血清待测。两种仪器同时检测100份血清中AFP和CEA，且用LiCA分别检测AFP和CEA两项指标的低、高值定值血清。由于两种仪器检测方法不同，其检测项目的正常范围也不同。参考值：LiCA AFP 0～7ng/mL、CEA 0～8.2ng/mL；i2000SR AFP 0～13.4ng/mL、CEA 0～5ng/mL。

1.4 统计学分析

用SPSS13.0统计软件进行数据分析，两组间采用配对t检验和直线回归分析。

2 结 果

2.1 相关性试验

用LiCA和i2000SR同时对100份血清标本检测AFP和CEA两项指标，检测结果见表1。由表1可见，LiCA和i2000SR两种仪器检测结果具有很好的相关性，且无显著差异（P＞0.05）。

表1 LiCA与i2000SR检测AFP和CEA结果比较（n=100）

2.2 准确度和精密度试验

用LiCA检测AFP和CEA的低、高值定值血清（批号AFP：C1004；CEA：C1012）各测定20次，得低值和高值批内精密度，CV在1.95%～4.65%之间，检测结果见表2。由表2可见LiCA检测结果准确度高，精密度好。

表2 LiCA检测AFP和CEA的低、高值定值血清的测定结果

3 讨 论

LiCA检测原理源于LOCI（luminescent oxygen channeling immunoassay，LOCI）技术，最初由Ullman等[1]在1994年报道，后由PerkinElmer公司生产相关试剂。该技术采用了纳米级颗粒，增加了反应表面积，极大地提高了检测灵敏度，这种纳米颗粒在液相中保持稳定的悬浮状态，并借助于“结合则发光”原理，实现了均相、一步、免清洗和高通量检测[2]。检测过程不易受到荧光淬灭现象、样本常见干扰物质、pH值、离子强度及温度等因素的影响，保证了检测稳定性[3-5]。

本实验100例血清标本分别用LiCA和i2000SR同时检测AFP和CEA，各项目的相关系数均＞0.96；两种仪器对各项目检测结果配对t检验，P＞0.05，表明LiCA和i2000SR具有较高的相关性。

对定值血清检测结果表明，LiCA具有较好的准确性和精密度，本法的批内CV＜5%与其他文献的报道基本一致[6,7]。LiCA是均相免疫测定法，避免了酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫法（RIA）等检测方法中繁琐的分离和洗涤步骤，且由于微粒表面积的增加，提高了检测的灵敏度。

LiCA以其独特的检测技术实现了均相、免清洗检测且具有标本用量少、检测速度快、成本低等优点，适用于临床和大批量健康体检人群肿瘤筛查的检测。

[1]Ullman EF,Kirakossian H,Singh S,et al.Luminescent oxygen channeling immunoassay: measurement of particle binding kinetics by chemiluminescence[J].Proc Natl Acad Sci,1994,91(12):5426-5430.

[2]Ullman EF,Kirakossian H,Switchenko AC,et al.Luminescent oxygen channeling assay(LOCITM):sensitive,broadly applicable homogeneous immunoassay method[J].Clin Chem,1996,42(9):1518-1526.

[3]Poulsen F,Jensen KB.A luminescent oxygen channeling immunoassay for the determination of insulin in human plasma[J].Biomol Screen,2007,12(2):240-247.

[4]Li Y,Choi M,Cavey G,et al.Crystallographic identification and functional characterization of phospholipids as ligands for the orphan nuclear receptor steroidogenic factor-1[J].Mol Cell,2005,17(4):491-502.

[5]Motola DL,Cummins CL,Rottiers V,et al.Identif i cation of ligands for DAF-12 that govern dauer formation and reproduction in C.elegans[J].Cell,2006,124(6):1209-1223.

[6]高云朝,赵卫国.光激化学发光法检测甲胎蛋白实验性能评价[J].检验医学,2009,24(8):578-581.

[7]Le Moigne F,Beauvieux MC,Derache P,et al.Determination of myoglobin: comparative evaluation of the new automated VIDAS assay with two other immunoassays[J].Clin Biochem,2002,35(4):255-262.