止嗽立效丸的抗炎及调节免疫作用的实验研究

陈魁敏 沈春红 郝 伟 余秋颖*

（1 沈阳医学院机能实验室，辽宁 沈阳 110034；2 沈阳医学院沈洲医院，辽宁 沈阳 110002）

止嗽立效丸是由麻黄、石膏、葶苈子、苦杏仁、甘草、婴粟壳所组成的中药复方制剂，具有止咳平喘、抗炎、提高机体免疫力的作用，临床应用疗效可靠。现将其抗炎、调节免疫力的实验报道如下。

1 实验材料

1.1 材料

止嗽立效丸由赤峰天奇制药有限公司提供，批号080713；消咳喘由哈尔滨松花江制药厂生产，批号061213；阿司匹林山东兴华制药厂生产；角叉菜胶由沈阳药科大学购入。

1.2 动物

昆明种小鼠，体质量l8～24g，Wistar大鼠，体质量150～200g，雌雄兼用，均由沈阳医学院实验动物研究中心提供。

2 方法与结果

2.1 小鼠二甲苯耳肿胀法

取小鼠50只，随机分成5组：生理盐水对照组，阿司匹林6g/kg和止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg组，空白对照组。止嗽立效丸组每天灌胃给药1次，连续2d。阿司匹林第2天灌胃给药1次，于第2天给药1h，右耳两面滴二甲苯0.05mL/只，致炎30min后颈椎脱白致死，用直径6mm打孔器取左右两面耳同一部位圆耳片，用分析天平称重，以两耳片重量之差为肿胀度进行t检验。结果：止嗽立效丸6g/kg组和阿司匹林6g/kg组对小鼠耳肿胀有抑制作用。结果见表1。

表1 止嗽立效丸对小鼠耳肿胀度的影响[n＝10，（±s）]

表1 止嗽立效丸对小鼠耳肿胀度的影响[n＝10，（±s）]

注：与对照组比较※P＜0.05，※※P＜0.01

组别 剂量（g/kg） 耳肿胀度（mg）等量生理盐水 9.18±1.28止嗽立效丸 1.5 9.43±2.19止嗽立效丸 3.0 8.56±1.32止嗽立效丸 6.0 6.34±2.33※阿司匹林 6.0 5.31±2.03※※

2.2 大鼠角叉菜胶致炎作用

取体质量200g左右大鼠40只，雌雄兼用，随机分为盐水对照组，阿司匹林已知药对照组，止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg剂量组。每组8只大鼠，禁食不禁水12h后，分别ig给予不同药物，给药后30min分别在大鼠右后肢足趾皮下注射1%角叉菜胶0.1mL/只致炎[1]。用玻璃容积法及足趾容积测量器测量各鼠致炎前和致炎后lh、2h、4h、6h的足趾容积，并计算出足趾肿胀度（致炎前后容积之差）。结果见表2。

表2 角又菜胶对大鼠足趾肿胀度的影响[n=8，（±s）]

表2 角又菜胶对大鼠足趾肿胀度的影响[n=8，（±s）]

注：与对照组比较※P＜0.05，※※P＜0.01

足趾肿胀度（mL）1h 2h 4h 6h等量生理盐水 16.7±6.71 18.8±2.55 19.3±0.84 18.3±2.34止嗽立效丸 1.5 13.2±40.7 16.5±6.06 16.3±8.97 15.4±2.23止嗽立效丸 3.0 14.8±2.15 13.1±10.0 13.6±7.42※ 12.2±5.67※止嗽立效丸 6.0 11.2±3.78※ 9.8±5.70※※ 13.2±6.73※ 12.1±3.348※※阿司匹林 6.0 9.50±5.89※ 9.90±4.64※※ 12.8±5.17※※ 10.6±5.96※※组别 剂量(g/kg)

2.3 对小鼠中性粒细胞吞噬活性的影响

取健康小鼠50只，雌雄兼用，体质量18～42g，分组及给药量见表3，各组小鼠连续ig给予各不同药物7d，于第7天末次给药1h后眼眶取血备用，另于一清洁玻璃上滴肝素抗凝剂2滴及NBT染液2滴，37C孵育15min再于室温下放置15min，并轻轻混匀，在己制备好的载玻片上推成薄血涂片，干燥后用甲醇固定，Wright-Giensa染色，镜检，计数100个白细胞中有还原NBT呈紫色沉淀物的白细胞数。结果可见，止嗽立效丸对小鼠中性粒细胞的吞噬指数无明显影响，即止嗽立效丸具有无影响机体非特异性免疫功能的作用。结果见表3。

2.4 溶血空斑实验（PFC法）[1]

取小鼠50只，体质量18～22g，雌雄兼用，分组及给药剂量见表4，连卖ig给予不同药物7d，于给药第3天时间10%RSBC致敏小鼠0.2mL/只（含4×108个SRBC）ip，免疫4d后，处死小鼠，分离脾脏，剪碎，加入Hanks液2mL，混匀，过滤，1500r/min，离心10min，去上清液，Hanks液洗3次，将细胞沉淀悬于4.8mL Hanks液中，取0.2mL指示细胞悬液（SRBC+补体）+0.2mL（125×）脾细胞灌注小室用（l00µL/室），密封，37C培养30min，计数空斑，抗体产生细胞数=[脾细胞悬液总mL数（50mL）/注入小室脾细胞（mL）]×标本PFC数，实验结果与对照组比较进行统计学检查，结果可见，止嗽立效丸可使溶血空斑生成减少，具有降低体液免疫功能。结果见表4。

表3 止嗽立效丸对小鼠中性粒细胞吞噬功能影响[n=10，（χ— ±s）]

表4 止嗽立效丸对小鼠抗体产生细胞总数的影响[n=10，（±s）]

表4 止嗽立效丸对小鼠抗体产生细胞总数的影响[n=10，（±s）]

注：与对照组比较※P＜0.01

组别 剂量 抗体产生细胞总数（个/只）等量生理盐水 13.14±2.67止嗽立效丸 1.5（g/kg） 8.5±2.20※止嗽立效丸 3.0（g/kg） 8.63±1.85止嗽立效丸 6.0（g/kg） 11.5±2.98消咳喘 1.5（mg/kg） 3.1±12.33

3 讨 论

实验结果显示止嗽立效丸可抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀症及角叉菜胶致大鼠足肿胀炎症。同时对小鼠中性粒细胞的吞噬功能无明显影响，并便溶血空斑实验中抗体产生数减少，具有调节机体特异性免疫及非特异性免疫功能[2]。全方在平喘化痰、消炎、止咳基础上可调节机体免疫反应，对平喘、止咳、抗炎有较好的治疗作用。

[1]徐叔云.药理实验方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,1985:532-533.

[2]陈奇.中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1996:646.