高效液相色谱法测定麻仁滋脾丸中橙皮苷含量

杨立志，姜雪敏，冯振来

(黑龙江省鸡西市药品检验所，黑龙江 鸡西 158100)

麻仁滋脾丸由大黄、火麻仁、当归、姜厚朴、炒苦杏仁、麸炒枳实、郁李仁等组方，具有润肠通便、消食导滞的功效，用于肠胃积热、肠燥津伤所致的大便秘结、胸腹胀满、饮食无味、烦躁不宁、舌红少津。其质量标准[1]中无橙皮苷的含量控制，为更好地控制麻仁滋脾丸的质量，笔者参考文献[2－4]采用高效液相色谱 (HPLC)法测定了制剂中橙皮苷的含量，报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC－2010A型高效液相色谱仪;AG285型电子分析天平、KQ－400KDE型超声波清洗器。橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号为 100721－200512);麻仁滋脾丸(批号分别为20080101，080302，091007);水为纯化水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Agilent Extend C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈－0.1%磷酸溶液(17 ∶83);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10 μL;检测波长:283 nm。理论板数按橙皮苷峰计算不低于2000。

2.2 溶液制备

精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含橙皮苷对照品0.0602 mg的溶液，即得对照品溶液。取本品10丸，精密称定，研细，精密称取0.5067 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定质量，超声处理(功率400 W，频率40 kHz)30 min，取出，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失质量，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按处方量并以相同工艺制备不含枳实的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验:取2.2项下3种溶液，按2.1项下色谱条件测定。结果阴性对照品溶液色谱图中，在橙皮苷色谱峰相应位置无干扰峰出现，表明阴性样品的其他组分对橙皮苷的测定无干扰(图1)。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察: 精密吸取橙皮苷对照品溶液 2，5，10，15，20 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以橙皮苷进样量为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归，得回归方程 Y=1.799997×106X+2.714251 ×104，r=0.9996(n=5)。结果表明，橙皮苷进样量在0.1204～1.204μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。

精密度试验:精密吸取同一对照品溶液10 μL，连续进样6次。结果峰面积的 RSD=0.28%(n=6)，表明方法精密度良好。

重现性试验:取同一批样品(批号为080302)，依法制备6份供试品溶液并测定含量。结果的 RSD=1.08%(n=6)，表明方法重现性良好。

稳定性试验:取同一份供试品溶液，分别在配制后0，2，4，8，12，16，20，24 h 时依法测定。结果峰面积的 RSD=0.31%(n=8)，表明橙皮苷在供试品溶液中24 h内稳定。

加样回收试验:称取已知含量的同批样品(批号为080302，含量为5.04 mg/g)6份，每份约0.25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，以两份为 1 组，共 3 组，每组分别精密加入 1.2550，2.5190，3.5125 mg橙皮苷，按供试品溶液的制备方法制备及上述色谱条件测定，计算回收率，结果见表1。

表1 橙皮苷加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取3批样品，按上述含量测定方法测定。结果批号为20080101，080302，091007的3批样品中橙皮苷含量分别为5.08，5.05，5.42 mg/g。

3 讨论

曾以甲醇、50%甲醇、稀乙醇为提取溶剂，结果以甲醇为提取溶剂时橙皮苷含量明显高于50%甲醇、稀乙醇。对甲醇－水、甲醇－0.1%冰醋酸、乙腈－0.1%磷酸溶液等流动相进行了考察，结果发现乙腈－0.1%磷酸溶液能很好地改善分离度和柱效，经过条件优化选择，确定了乙腈－0.1%磷酸溶液(17∶83)为流动相，橙皮苷峰与其他组分能实现完全分离。该方法简便准确，专属性强，为控制麻仁滋脾丸质量和深入研究其药效物质基础提供了参考。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:1094－1095.

[2]刘 源，沈好文.高效液相色谱法同时测定枳实导滞丸中柚皮苷与橙皮苷含量[J].中国药业，2010，19(20):43－44.

[3]廖厚知，粟华生，梁山丹，等.HPLC测定银芒止咳片中橙皮苷的含量[J].中成药，2007，29(7):附 22－ 附 23.

[4]金 艺，张红霞，许海燕，等.HPLC同时测定胃力片中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量[J].中南药学，2008，6(3):317－319.