高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中对乙酰氨基酚的含量

闫海燕

(宝鸡文理学院 陕西省植物化学重点实验室，陕西 宝鸡 721013)

小儿氨酚烷胺颗粒是由对乙酰氨基酚、咖啡因、扑尔敏、人工牛黄等组成的复方制剂，常用于儿童伤风感冒引起的鼻塞、咽喉痛、头痛、发热等[1，2]。其中主要成分对乙酰氨基酚含量测定的药典方法不仅复杂且不够准确。在文献[3，4]的基础上，作者建立了一种快速检测小儿氨酚烷胺颗粒中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法，结果令人满意。

1 实验

1.1 材料、试剂与仪器

小儿氨酚烷胺颗粒(批号为1008035、20100834、623136726100815)购自药店。

对乙酰氨基酚对照品(批号为100018-200408)，中国药品生物制品检定所；甲醇(色谱纯)，美国Methanex公司；娃哈哈纯水。

Agilent 1200型高效液相色谱仪(G1328B二级管阵列检测器)，美国安捷伦公司；KQ5200E型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；DZF-1型电热恒温鼓风干燥箱，上海一恒科学仪器有限公司；ME254S型电子天平，德国Sartorius公司；UV-2550型紫外分光光度计，日本岛津公司。

1.2 对照品溶液的制备

精密称取105 ℃干燥至恒重的对乙酰氨基酚对照品0.0146 g，置50 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

1.3 样品溶液的制备

分别取3种批号的小儿氨酚烷胺颗粒6袋，研细，精密称取1/6袋，置100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，用微孔滤膜(0.45 μm)过滤，即为样品溶液。

1.4 色谱条件

Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水(40∶60)，流速1.0 mL · min-1，进样量20 μL，柱温25 ℃，检测波长275 nm。

2 结果与讨论

2.1 线性关系

分别量取对照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，加入50 mL容量瓶中定容，定容后的浓度(μg·mL-1)分别为5.84、17.52、29.20、40.88、58.40，每次进样20 μL，得到色谱流出曲线。以对乙酰氨基酚浓度(μg · mL-1)为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，结果见图1。

图1 对乙酰氨基酚标准曲线

由图1可知，对乙酰氨基酚浓度与峰面积在5.84～58.4 μg · mL-1范围内线性关系良好。其拟合回归方程为y=20.96x+0.8787，R2=0.9998。

2.2 精密度

取同一种对照品溶液(58.4 μg · mL-1)重复进样6次，每次20 μL，记录峰面积，计算其RSD值为1.19%(n=6)，表明该方法精密度良好。

图2 对乙酰氨基酚对照品(a)与样品(b)的HPLC图谱

2.3 重复性

分别取3种批号的样品溶液按色谱条件重复进样3 次，记录峰面积，计算其RSD值分别为0.71%、0.15%、0.38%(n=3)，表明该方法的重复性好。

2.4 稳定性

分别取3种批号的样品溶液，在0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h按色谱条件进样，记录峰面积，计算其RSD值分别为2.87%、2.08%、1.31%(n=6)，表明样品在5 h内稳定。

2.5 样品测定

样品溶液的HPLC谱图见图2。

由图2可知，对乙酰氨基酚与其它组分分离较好，保留时间约为2.15 min。含量测定结果见表1。

表1 3种样品中对乙酰氨基酚的含量测定结果

2.6 加标回收率

取已知含量样品，加入对乙酰氨基酚对照品，进行回收实验，结果见表2。

表2 对乙酰氨基酚回收率测定结果

由表2可知，平均加标回收率为103.3%，RSD为3.57%。

2.7 讨论

尝试用乙腈-水、甲醇-水(40∶60)、甲醇-水(20∶80)体系为流动相，其中甲醇-水(40∶60)体系保留时间合适、分离度高、峰形对称，故选定甲醇-水(40∶60)为该方法的流动相。

3 结论

利用高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中对乙酰氨基酚含量。对乙酰氨基酚浓度在5.84～58.4 μg · mL-1范围内与峰面积线性关系良好，回归方程为y=20.96x+0.8787，R2=0.9998，平均加标回收率为103.3%，RSD=3.57%。该方法快速、简便、结果可靠，可用于小儿氨酚烷胺颗粒中对乙酰氨基酚含量的测定。

[1] 姜红，周希英，贾善学.HPLC 法测定小儿速效感冒颗粒中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].山东医药工业，2002，21(5)：9-10.

[2] 孙桂荣，卢华伟，潘舒平.HPLC测定氨咖麻敏胶囊中各组分的含量[J].中国药学杂志，2004，39(7)：542-544.

[3] 吴卫涛.高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚片的含量[J].中国医药导报，2009，6(15)：52-53.

[4] 陈莹，莫连峰，明娜，等.高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量[J].海峡药学，2007，19(7)：41-42.