AB-8大孔树脂分离纯化甘草总黄酮

王芸芸，刘利军

(宁夏师范学院化学与化学工程学院，宁夏 固原 756000)

大孔树脂(Macroporous resin)是一种不溶于酸、碱及各种有机溶剂的有机高分子聚合物，具有吸附容量大、吸附速度快、解吸条件温和、易于再生、使用寿命长等优点，近年来已广泛应用于黄酮类化合物等植物活性成分的提取和分离，尤其适于工业化生产。作者在此采用AB-8大孔树脂分离纯化了甘草总黄酮。

1 实验

1.1 材料、试剂与仪器

甘草渣，宁夏红寺埠。

95%乙醇、NaOH、碳酸钠，北京化工厂；乙酸乙酯、硝酸铝、亚硝酸钠、HCl、石油醚，天津化学试剂厂。以上试剂均为分析纯。

AB-8大孔树脂，沧州宝思化工有限公司。

TU-1810型紫外可见分光光度计，北京普析通用有限责任公司；BS224S型电子天平，北京赛多利斯科学仪器公司。

1.2 方法

1.2.1 AB-8大孔树脂的预处理[1]

AB-8大孔树脂用乙醇浸泡24 h，充分溶胀后装柱，用30%乙醇洗至流出液加蒸馏水无浑浊现象，再用蒸馏水洗涤至无醇，备用。

1.2.2 甘草总黄酮的制备[2]

1.2.3 甘草总黄酮的分离纯化

(1)装柱：取处理好的AB-8大孔树脂20 g置于80 cm×2 cm的离子交换柱，加95%乙醇浸没，待树脂沉积好后，倒去多余的乙醇，用水洗涤，待用。

(2)层析：将制备的甘草总黄酮粗品溶于热水，调pH值至6～7，用已预处理过的AB-8大孔树脂柱层析，以40%乙醇溶液为洗脱液，收集浓缩，得0.4 g甘草总黄酮，测定纯度。

1.3 分析与检测

1.3.1 熔点的测定

测定甘草总黄酮纯化前后的熔点，进行比较。

1.3.2 总黄酮含量的测定

分别称取甘草总黄酮粗品和纯化产品各0.1 g，用100 mL 80%乙醇溶解，分别移取1.0 mL置于10 mL容量瓶中，加入0.3 mL 5%亚硝酸钠，6 min后再加入10%硝酸铝溶液，再过6 min，加入4 mL 4%氢氧化钠，用水定容至刻度，15 min后用紫外可见分光光度计进行全波长扫描，在510 nm处均有最大吸收。平行测定3次。

按下式计算总黄酮含量(W)：

式中：A为吸光度值；V1为移取的体积，mL；V2为稀释后的体积，mL；V为提取总体积，mL。

2 结果与讨论[2，3]

2.1 熔点分析

上柱前甘草总黄酮粗品的熔点为206～214℃，上柱后纯化产品的熔点为210～214℃，表明经AB-8大孔树脂纯化后产品纯度有所提高。

2.2 红外光谱分析(图1)

由图1可以看出，AB-8大孔树脂纯化甘草总黄酮粗品效果较好。

图1 纯化前后甘草总黄酮的红外光谱

2.3 总黄酮含量测定

甘草总黄酮纯化前后的总黄酮含量见表1。

表1 纯化前后总黄酮的含量

由表1可以看出，纯化后总黄酮含量明显增加，计算得到平均纯度提高了39.97%。这表明经AB-8大孔树脂纯化后甘草总黄酮产品纯度明显提高。

3 结论

采用AB-8大孔树脂分离纯化甘草总黄酮。总黄酮含量分析表明，纯化后的产品总黄酮含量较纯化前明显增加，平均纯度提高了39.97%；红外光谱分析表明，AB-8能较好地纯化甘草总黄酮。为生产高浓度的甘草总黄酮及进一步精制甘草黄酮粗提物提供了快捷、有效的方法。

[1] 何琦，及元乔，丁立生，等. D140大孔吸附树脂银杏黄酮提取纯化性能研究[J]. 天然产物研究与开发，2001，13(1)：56-59.

[2] 曹群华，瞿伟菁，李家贵，等. 大孔树脂吸附纯化沙棘籽渣总黄酮的研究[J]. 中国中药杂志，2004，29(3)：226-228.

[3] 冯福盛，宣春生，陈树伟，等.吸附树脂AB-8对甘草酸的吸附性能及其提取纯化中的应用[J].天然产物研究与开发，1998，10(l)：60-64.