去甲肾上腺素致狗髋关节一过性滑膜炎的机理研究

彭朝林

彭朝林:女，本科，主管护师，护士长

近期有文献［1，2］表明，可以采用低浓度去甲肾上腺素诱导狗髋关节一过性滑膜炎的产生并推测去甲肾上腺素可能在一过性滑膜炎发病机理中起着重要作用，但其具体机理还不明确。已有研究表明［3］，去甲肾上腺素可以通过调节胞浆内钙离子浓度而影响血压。因此，本研究拟探讨去甲肾上腺素对股骨头局部血循环和关节滑液钙离子浓度的影响。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂

选择年龄在2～3个月的幼狗80只(中山医科大学动物实验中心杂种狗)，体重5～7 kg，♂♀各半。尼群地平纳米片(河北赛克药业有限公司，批号20031201，规格:10 mg/粒)。去甲肾上腺素(NA)(国药准字H12020621)。

1.2 动物模型建立

将80只狗随机分为两组，各40只。第1组(A组)，每周在一侧髋关节腔内注入2‰ 低浓度NA 1 ml(2 μg)和1 ml生理盐水，对侧注入生理盐水2 ml作对照;第2组(B组)，每周在一侧髋关节腔内注入2‰低浓度NA 1 ml(2 μg)和1 ml 10 mg/L尼群地平溶液，对侧注入生理盐水2 ml作对照。

1.3 关节内压及股骨头血流检测方法

应用99mTc－MDP三相骨显像方法［4］。在注入前和注入后行关节内压测定和99mTc－MDP三相骨显像，随后将狗处死进行病理组织学检查。每组于11个时间点即为注入前、注入后即时、注入后 3、6、12、24、48、72 h 及 1、2、4 周。每只狗强制式注入99mTC Tc－MDP 1ml，随机在股骨头连续显像10 min，获得双侧股骨头的显像时间－放射线曲线，第1 min为血流相，第2～10 min为血相，又于180 min后再次显像，即可获得静态相线代谢相，计算其核素活性计数，显示股骨头血流状态。机器为法Sophy Camera D57型ECT同位显像仪。髋关节内压测定，置幼狗于屈曲位，经髋关节内侧相当于股骨沟中点处，刺入带侧孔的6号硬膜外穿刺针头，直达股骨颈，然后退后少许进入关节腔，连接IMC骨内压测定仪，记录关节内压。

1.4 血清钙离子测定

在注入前和注入后11个时间点抽取关节滑液100 μl，采用血清钙甲基麝香草酚蓝显色EDTA褪色测定法［5］对关节滑液钙离子进行测定。于抽取关节液后将狗麻醉处死行病理组织学检查，组织石蜡包块切片，伊红－苏木素染色。

1.5 统计学处理

数据处理采用SPSS 13.0软件，重复测量资料采用方差分析。α =0.05。

2 结果

2.1 两组股骨头平均血流量之间的变化见表1。两组间关节内压的变化见表2。两组关节滑液钙离子浓度的变化见表3。

2.2 病理组织学检查

A组实验侧与B组实验侧相比，注入后3 h无明显变化，6～72 h滑膜有灶性充血，表面粗糙，关节内有积液。A组滑膜绒毛增生普遍存在，布满关节腔，无坏死病灶;镜下见:局部有滑膜水肿，少量血管轻度扩张;滑膜绒毛样增生显著，胶原大量沉积，可见透明性变，这种表现以局灶性为主而非弥漫性。B组关节大部分正常。A、B两组无1例出现股骨头坏死。

表1 去甲肾上腺素及尼群地平对两组两侧股骨头平均血流量的影响( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

表1 去甲肾上腺素及尼群地平对两组两侧股骨头平均血流量的影响( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

注:﹡与对照侧相比，P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01，与对照侧相比，＊P＜0.05，＊＊P ＜0.01

时间 实验侧A组(n=40) B组(n=40)对照侧(n=80)注药前1758±20 1745±18 1723±26注药后即时 2937±20﹡﹡＊ 3287±110 3559±29注药后3 h 7492±56﹡﹡＊＊ 8634±162 8892±31注药后6 h 1624±117﹡﹡＊ 1868±93 2027±125注药后12 h 948±29﹡﹡ 1053±103﹡ 1197±86注药后24 h 966±11﹡﹡ 1024±16﹡﹡ 1118±19注药后48 h 1110±9﹡﹡＊＊ 1210±5﹡ 1278±45注药后72 h 1131±41﹡﹡ 1234±13﹡ 1320±25注药后1周 1173±22﹡ 1210±20 1270±13注药后2周 3307±30 3489±34 3902±31注药后4周1633±13 1644±45 1674±11

表2 去甲肾上腺素及尼群地平对两组两侧关节内压的影响 (± s，mmHg)

表2 去甲肾上腺素及尼群地平对两组两侧关节内压的影响 (± s，mmHg)

注:与对照侧相比，﹡ P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01，与对照侧相比，＊＊P ＜0.01

时间 注药侧A组(n=40) B组(n=40)对照侧(n=80)注药前0.200 ±0.018 0.232 ±0.020 0.230 ±0.026注药后即时 14.100 ±0.231 14.018 ±0.221 14.000 ±0.183注药后3 h 2.069±0.040 ﹡﹡＊＊1.174 ±0.070 1.010 ±0.006注药后6 h 0.800 ±0.029 ﹡ 0.500 ±0.056 0.400 ±0.014注药后12 h 3.000 ±0.019 ﹡﹡ 0.800 ±0.070 0.500 ±0.022注药后24 h 4.000 ±0.092 ﹡﹡ 1.400 ±0.067 ﹡1.000 ±0.039注药后48 h 4.500 ±0.048 ﹡﹡ 1.600 ±0.078 ﹡1.300 ±0.018注药后72 h 4.200 ±0.018 ﹡﹡ 1.200 ±0.060 1.000 ±0.013注药后1 周 4.000 ±0.015 ﹡﹡ 1.300 ±0.056 1.200 ±0.012注药后2 周 2.000 ±0.022﹡ 1.50 ±0.067﹡ 1.000±0.016注药后4周0.290 ±0.019 0.26 ±0.062 0.250 ±0.008

表3 去甲肾上腺素及尼群地平对两组两侧关节滑液钙离子浓度测定( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

表3 去甲肾上腺素及尼群地平对两组两侧关节滑液钙离子浓度测定( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

注:与对照侧相比，﹡ P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01

时间 实验侧(n=4)A组(n=40) B组(n=40)对照侧(n=80)注药前2.98 ±0.54 2.97 ±0.85 2.99 ±0.95注药后即时 2.04 ±0.81 2.06 ±0.55 2.05 ±0.84注药后3 h 1.88 ±0.49 ﹡ 2.16 ±0.67 2.24 ±0.17注药后6 h 1.77 ±0.55 ﹡﹡ 2.35 ±0.45 2.45 ±0.64注药后12 h 1.89 ±0.34 ﹡ 2.45 ±0.78 2.55 ±0.76注药后24 h 1.92 ±0.44 ﹡ 2.55 ±0.34 2.60 ±0.45注药后48 h 1.95 ±0.46 ﹡ 2.65 ±0.65 2.68 ±0.74注药后72 h 1.99 ±0.34 ﹡ 2.67 ±0.54 2.77 ±0.43注药后1 周 2.10 ±0.44 2.77 ±0.89 2.87 ±0.34注药后2 周 2.21 ±0.54 2.78 ±0.34 2.89 ±0.78注药后4周2.13 ±0.56 2.82 ±0.78 2.79 ±0.78

3 讨论

急性髋关节一过性滑膜炎又称毒性滑膜炎、过敏性髋、急性髋关节暂时性滑膜炎，是小儿常见的髋关节疾患，其发病机理还不明确。有研究［1，6］采用低浓度去甲肾上腺素诱导一过性髋关节滑膜炎可以取得较好的效果，并推测去甲肾上腺素可能在急性髋关节一过性滑膜炎发病机理中起着重要作用。研究［3］证实去甲肾上腺素能诱导人主动脉血管平滑肌细胞增殖、细胞内钙离子浓度升高和三磷酸肌醇受体－1(IP3R－1)蛋白表达增强，这一效应能被钙拮抗剂维拉帕米抑制。

在本研究中，从注药后即时起，A组与对照侧相比，血流量明显增加，随着时间延长，血流量逐渐减少但与对照侧相比仍具有统计学意义，并持续到给药后1周时。B组与对照侧相比，实验侧血流量给药后即时增加，只在给药后12～72 h之间有统计学意义，随着时间延长，逐渐降低，但降低幅度远低于A组实验侧。这说明去甲肾上腺素对髋关节血流量的影响能被钙离子拮抗剂尼群地平部分阻断。另从关节内压实验结果表明，NA注射后3 h，A组关节内压随之增高，与对照侧相比具有统计学意义，随着炎症消退而逐渐恢复正常;B组关节内压较对照侧相比有所升高，但只在给药后24、48 h和给药后2周时才具有统计学差异，推测与其药物代谢有关［7］，随着尼群地平血药浓度逐渐降低，其对去甲肾上腺素拮抗效应也逐渐降低。这一推测在关节滑液钙离子浓度测定中进一步被证实，给药后，A组实验侧与对照侧相比，钙离子浓度明显降低，而B组实验侧与对照侧相比，钙离子浓度下降不明显。从而表明去甲肾上腺素对髋关节血流及压力的影响可能是通过调节钙通道，使Ca2+内流增加和细胞内钙池释放引起〔Ca2+〕i增加有关。

总之，本实验研究表明去甲肾上腺素可能在一过性髋关节滑膜炎中通过调节细胞内钙离子浓度而影响关节内压。

［1］程锦珍，卢小虎，李江林，等.低浓度去甲肾上腺素对髋关节局部组织影响的实验研究［J］.医学理论与实践，2008，21(11):1241－1243.

［2］卢小虎，刘尚礼，徐忠世，等.髋关节一过性滑膜炎99mTc－MDP三相骨显像与病理组织学变化关系的实验研究［J］.中国误诊学杂志，2006，6(5):911 －912.

［3］王佑华，周 端，曹 敏，等.三七花总皂普对去甲肾上腺素诱导人主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及机制［A］.第三届世界中西医结合大会论文摘要集［C］.北京:中医中西医结合学会，2007:755.

［4］梁九根，吕 斌，卢小虎，等.三相骨显像对髋关节一过性滑膜炎动物实验研究［J］.中华核医学杂志，1994，14(4):200 －202.

［5］尹济群，张新暖，冯敬池，等.血清钙甲基麝香草酚蓝显色EDTA褪色测定法［J］.临床检验杂志，1996，14(5):247 －249.

［6］卢小虎，肖德明，林博文，等.去甲肾上腺素诱导髋关节一过性滑膜炎与股骨头缺血性坏死关系的动物实验［J］.中国临床康复，2004，8(32):7340 －7341.

［7］杨明世，崔福德，岳 鹏，等.尼群地平缓释胶囊在家犬体内的药动学与相对生物利用度［J］.沈阳药科大学学报，2003，20(2):84 －87.