人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑溶出度的测定

韦广辉

人工牛黄甲硝唑胶囊为复方制剂，主要成分为甲硝唑与人工牛黄。甲硝唑对大多数厌氧菌具有抗菌作用，主要用于治疗急性智齿冠周炎、局部牙槽脓肿、牙周炎、根尖周炎等。国家药品标准[1]中未收载其溶出度检查项。为了有效控制药品质量，为评价和控制药品质量提供依据，笔者参考文献[2]采用紫外分光光度法，测定3个生产厂家样品的体外溶出度，现报道如下。

1 仪器与试药

UV－2550型紫外分光光度计(日本岛津公司);D－800LS型智能药物溶出仪(天津大学精密仪器厂);AE－240型电子天平(梅特勒－托利多仪器〈上海〉有限公司)。人工牛黄甲硝唑胶囊(市售品，A厂产品批号为1010008，B厂产品批号为101201，C厂产品批号为20091203);甲硝唑对照品(批号为0191－9804，中国药品生物制品检定所);盐酸为分析纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

取人工牛黄甲硝唑胶囊各1粒，用(37±0.5)℃的盐酸溶液(9→1 000)溶解后，稀释至900 mL，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，再精密取滤液3 mL，置50 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。称取甲硝唑对照品10 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，用(37±0.5)℃的盐酸溶液(9→1 000)溶解后，稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液;再精密取3 mL，置50 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取空白胶囊1粒，加入按处方比例称取的1粒胶囊量的人工牛黄和辅料，按供试品溶液的制备方法配制成阴性对照品溶液。

2.2 测定波长确定

以盐酸溶液(9→1 000)为空白对照，在200～400 nm波长范围内对照品、供试品和阴性对照品溶液进行扫描。结果见图1。可见，供试品和对照品溶液紫外吸收图谱峰谷特征基本一致，最大吸收波长为277 nm，而阴性对照品溶液在此波长处无紫外吸收，故选择277 nm为测定波长。

2.3 方法学考察

图1 紫外分光光谱图

标准曲线制备:精密吸取对照品贮备液 1，2，3，4，5 mL，分别置50 mL容量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)稀释至刻度，摇匀，照紫外分光光度法在277 nm波长处测定吸光度，以质量浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=0.037 8X－0.002 8，r=0.9998(n=5)。结果表明甲硝唑质量浓度在 4.22 ～20.10μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。

精密度试验:取同一批对照品，依法制备对照品溶液并测定吸光度。结果的 RSD为0.3%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取由35 min溶出液制备的供试品溶液，分别于0，1，2，4，8 h 时测定吸光度。结果的 RSD 为 0.56%(n=5)，表明供试品溶液在8 h内稳定。

加样回收试验:精密移取已知质量浓度的溶出液2，3，4 mL各2份，置100 mL量瓶中，分别加入对照品贮备液2，3，4 mL，加溶出介质至刻度，摇匀，测定吸光度，计算回收率。结果见表1。

2.4 溶出度测定

采用桨法，按2010年版《中国药典(二部)》附录溶出度测定法[2]项下操作。量取经脱气处理的盐酸溶液(9→1 000)900 mL，注入溶出杯中，恒温至(37±0.5)℃，转速为50 r/min，取人工牛黄甲硝唑胶囊1粒，装入沉降篮，投入溶出杯中，启动旋转并开始计时，分别在第 5，10，15，25，35，50 min 时间点取溶液 10 mL，每次取样后，立即补充同体积同温度的溶出介质，所取溶出液经0.45μm滤膜滤过，精密量取滤液3 mL，置50 mL量瓶中，稀释至刻度，测定吸光度，并计算各时间点的累积溶出百分率。结果见表2。

表1 甲硝唑加样回收试验结果(n=6)

表2 各时间点样品累积溶出百分率(%，n=6)

2.5 溶出曲线绘制

将表2中的数据以时间为横坐标、累积溶出百分率为纵坐标，绘制成溶出曲线。结果见图2。

3 讨论

选择溶出方式时，曾对比转篮法和桨法，转篮法有时会出现转篮被胶囊碎片堵塞的现象，影响药物溶出，因此选择桨法。但因溶出过程中胶囊会浮在水面，影响溶出，故需使用沉降篮。转速通常选用50～75 r/min，一般不超过100 r/min，但考虑到对胃动力减弱的患者也能有较好的治疗效果，故选用50 r/min。人工牛黄甲硝唑胶囊是一种胃溶型制剂，故选择盐酸溶液(9→1 000)作为溶出介质，这也与含量测定项的溶剂保持一致。对于溶出温度，选择接近人体正常温度的(37±0.5)℃作为测定温度较适宜。

图2 样品溶出曲线

试验结果表明，采用紫外分光光度法测定人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑的溶出度，方法简便、快速、准确，可用于产品的质量评价与控制。

[1]WS－1001(HD－0204)－2002，国家食品药品监督管理局国家药品标准·化学药品地方标准上升国家标准(第三册)[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:153－154，附录85－附录87.