杨芳,李进
(1.安康学院 农学与生命科学院,陕西 安康 725000;2.陕西省富硒食品工程实验室,陕西 安康 725000)
随着科学技术的发展,动物实验已成为医学实验研究的基本方法。在建立疾病动物模型、探讨疾病的发病机制及病理过程、评判药物疗效中,实验大鼠占有很重要的位置[1]。根据实验目的不同,需对实验大鼠实施不同的人工干预。干预因子是指用某种手段对动物施加影响,如使用新药、工具药、功能因子等。在实验周期长的实验中,通过胃肠道干预方式是对动物施加影响的常用途径。最简单可行的方式是将药物或某种物质添加到大鼠的饲料中。有的研究人员将待测物质涂抹在大鼠饲料的表面,尽管这种方法十分简便,但保证不了涂抹的均一性。而实验动物饲料标准化是实验研究质量控制的关键环节之一,饲料相关性状的均匀度显得尤为重要。目前生产大鼠饲料的实验动物中心,也有饲料加工的服务,方便、快捷,但由于机器制作的原因,加工每一个样最少需要25 kg。在实验过程中,由于单个样品浓度的加工饲料量并不需要那么多,同时可能需要加工几个浓度规格的饲料样品,无形中实验的成本会提高很多。而且,机械饲料加工过程中基本上均采用高温烘干的方法制作,不适合添加某些不耐高温样品饲料的制作。作者介绍一种经济、实用,制作少量大鼠特配饲料的制备装置。
10 ml的一次性注射器,大鼠粉状饲料。
1.2.1 自制装置的设计 将10 ml的一次性注射器前端用手术刀片切除,然后将注射器活塞插入套管即可(图1)。
将大鼠粉状饲料、添加成分和适量的水按一定比例混合后,成团,把混匀的饲料团块填充到10 ml的一次性注射器套管中,压实,然后用注射器的活塞将饲料推出。根据实验情况的具体要求,后期饲料可以采用冷冻干燥,也可以高温烘干。同期将手工捏成小的团块作为对照进行比对分析。
1.2.2 饲料相关性状的检测分析 根据中华人民共和国国家标准GB/T 6435-2006,测定手工捏制和自制装置制作饲料经过冷冻或高温干燥后其中的水分。
图1 大鼠饲料自制装置Fig 1 Rats feed self-made
根据现行大鼠饲料的终端标准,对手工捏制和自制装置制作饲料的基本性状进行比较分析,分析结果见表1。
表1 饲料相关性状的比较Tab 1 The comparison of rat feed traits
手工捏制的饲料团块大小、质地不均一,在干燥过程中,饲料干燥时间不同步,导致有的饲料烘得过于干燥、太硬,大鼠对这种饲料偏嗜性较差。用简易大鼠饲料自制装置制作的饲料大小、质地均一,在干燥过程中,饲料干燥时间同步(图2)。
图2 饲料外观Fig 2 Feed appearance
1 kg干大鼠粉状饲料和适量水混合后,手工捏成小的团块,3人同时制作需要1 h;用简易大鼠饲料自制装置制作大鼠饲料,3人同时制作需要20 min,节省了实验时间。
目前由各实验动物中心或生物科技有限公司提供的大鼠维持饲料价格约6元·kg-1,而配合饲料价格在20元·kg-1左右(自行提供特定添加成分)。实验设计中一般会有阳性对照,待分析成分的浓度也不止一种,这样需要配合饲料的规格需要好几种,按各实验动物中心或生物科技有限公司提供的饲料价格和机器制作加工每种规格最少量计算,配合饲料加工所需的实验经费就不少。因此,自制大鼠特配资料节省的实验费用还是比较可观的。
自制的大鼠饲料可以根据实际情况选择冷冻干燥或高温干燥。
在建立动物模型和对实验动物实施干预研究过程中,经口给法是一种很常见的方法。尽管经口灌胃方法是一种给量相对精准的给药途径,但是灌胃方法不适合周期较长的实验,同时由于经口灌胃方法产生的灌胃插管刺激,容易出现相关的并发症,导致大鼠死亡或干扰最终的实验结果[2-4]。将待测物质添加到大鼠饲料中依然是一种方便、简单、可操作性强的方法,例如糖尿病肾病模型高糖高脂饲料的制备,适合磷代谢、继发性甲状旁腺功能亢进研究的含不同磷、钙剂量的大鼠饲料。机器加工的饲料成本高,有加工最小量的限制,用不完造成不同程度的浪费,同时只适合耐高温的添加剂的饲料制备。手工捏制费时费力,饲料均一性不良。
大鼠属于啮齿类动物,需用力嚼咬维护门齿。由于门牙不断地生长发育,必须以足够硬度的饲料帮助其磨牙。按实验需要给实验组配合饲料的同时,给予维持饲料。大鼠白天常挤在一起休息,夜间活动,晚上活动量大,采食量多。根据实验大鼠这种生活习性,可以在晚上7点给大鼠配合饲料。实验中发现,大鼠对自制装置制作的饲料冻干或烘干后偏嗜性好。这样由于饲料浪费极少,可以提高摄入量判断的准确性。
大鼠饲料制备装置经济、实用,制作简单。用简易大鼠饲料自制装置制作的饲料均一性良好,自制的大鼠饲料根据实验的具体情况按量制备。干燥方式灵活多样,可以根据饲料中成分耐高温的具体情况采用冷冻干燥或高温烘干,使特定配方更贴切实验者的研究领域和方向,为后期实验奠定良好的基础。
另外,此装置的应用范围还可延伸到其他的一些实验动物饲料的制作,根据实验动物的具体情况,选择相应规格的注射器即可。
[1]魏泓.医学实验动物学[M].成都:四川科技出版社,1998:273-277.
[2]杨芳,韩玉翠.大鼠酒精性脂肪肝两种建模方法的比较[J].山东医药,2011,51(13):15-17.
[3]古赛.枸杞多糖防治大鼠酒精性脂肪肝的实验研究[D].重庆:重庆医科大学,2007:4.
[4]魏玉.几种实验动物灌胃给药方法简介[J].上海实验动物科学,2003,23(3):180.
东南大学学报(医学版)2011年5期