望江南子的生药学研究*

韩文雯，李天祥

(中国人民解放军第二五四医院，天津 300142)

望江南子为豆科植物望江南(cassiaoccidentalisL)的干燥种子，又名野扁豆、喉白草、羊角豆[1]，主治目赤肿痛、头晕头胀、消化不良、胃痛、腹痛、痢疾、便秘等[2]。望江南子蒽醌类成分功效主要表现在致泻和通便的作用，而其苷元主要表现在清肝明目作用，其毒性成分主要为毒性蛋白。由于望江南子的中毒案例逐渐增多，应加强对望江南子中毒原理的研究。在临床上望江南子易与决明子混淆，这是导致中毒的关键原因。本实验可为以后研究望江南子提供了生药学上面依据，提高生理活性和药理活性研究。

1 实验材料与仪器

1.1药材 望江南子来源于本院标本馆，经李天祥老师鉴定。

1.2实验仪器和试剂 显微镜(OLYMPUS BX51)、滑走切片机(MICROTOME)、Olympus CX41显微摄像仪(奥林巴斯株式会社)、电热恒温干燥箱(天津市华北实验仪器有限公司制造)、XMTB数显调节恒温水浴锅 (北京长风仪器仪表公司)、KQ-300DV型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、ZF-20D暗箱式紫外分析仪(上海顾村仪器厂)。石蜡、乙醇、二甲苯、1%番红乙醇溶液、0.1%固绿乙醇溶液、乙醚、醋酸镁、1﹪对亚硝基二甲苯胺吡啶。

2 实验方法

2.1望江南子显微镜观察的石蜡切片制做程序 软化→取材→固定→冲洗→脱水→透明→透蜡→包埋→切片→贴片→脱蜡→染色→透明→封藏。

2.1.1软化 用煮沸冷却法使药材(望江南子)细胞内充满水分，煮沸时间不宜过长否则会涨破种皮。再放入18%氨水中浸泡过夜。

2.1.2取材和样品分割 选取饱满、完整望江南子，手工切割。

2.1.3固定 用50%乙醇、冰醋酸、福尔马林(9∶05∶05)，配成FAA和甘油乙醇(1∶1)两种固定液，实验证明望江南子更适用于甘油乙醇固定。为了更好地保存和处理材料，固定时间为24 h。

2.1.4冲洗 将材料从甘油乙醇固定液中取出后用滤纸吸干表面残存的液体，置于10倍于材料的50%乙醇中浸泡12 h，中途更换乙醇一次，共冲洗两次。

将已透入石蜡的材料置入蜡杯，并和另外4个盛有新鲜石蜡的蜡杯同时放入60～62 ℃恒温箱。待石蜡熔化后，将材料依次在每个石蜡杯中放置3 h，即可常规包埋、切片和贴片。

2.2望江南子的性状及其粉末显微鉴别 本实验对望江南子进行了性状和粉末显微鉴定。通过体视镜观察其性状特征，并在显微镜下观察其粉末显微特征，其中包括水合氯醛制片和稀甘油制片。

2.3理化鉴别特征 据报道望江南子中含大黄素甲醚的匀二蒽酮、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素等多种蒽醌类化合物及多种脂肪酸、挥发油等[3]。本实验对望江南子中的蒽醌类物质进行了验证。

3 结果

3.1性状特征 望江南子呈扁平状，一端略长，长3.5～4.5 mm，宽2.5～3.5 mm厚1.0～1.5 mm；表面灰绿色或灰棕色，两平面中央有类椭圆型凹斑；质坚硬，不易破碎，无臭，味淡。

3.2横切显微镜下形态 望江南子种皮外层为一列表皮细胞，呈栅栏状，壁不均匀加厚，长65～70 μm，宽3～5 μm，在栅状细胞下方1/3处有一条光辉带。栅状细胞散开时光辉带有时不显现，栅状细胞表面观为多角形，种皮外披较厚的角质层，平滑、透明。栅状细胞下为一列支持细胞，略呈哑铃状，长25～28 μm，最宽处直径为19～30 μm，表面观呈类多角形，可见上下两层同心圆。下层为4～6层营养层细胞，呈扁平状，长9～12 μm，最宽处直径为100～108 μm。最内层为内种皮，细胞略小，排列整齐。子叶为单面叶，上下表皮为排列较整齐的薄壁细胞，栅栏组织为两层圆柱状细胞(有时可见第三层)，较下层细胞略短，第一层栅状细胞长35～40 μm，宽8～10 μm，第二层栅状细胞长23～28 μm，宽8～10 μm，海绵组织细胞类圆形，子叶含油滴。 见图1-3。

图1 望江南子种皮横切显微镜下观察

图2 望江南子子叶横切显微镜下观察

图3 望江南子横切显微镜下观察

3.3粉末显微观察结果 望江南子粉末呈黄棕色或黄绿色。①种皮栅状细胞：细胞排列多成片，无色或淡黄色，呈长方形，排列稍不整齐，胞腔明显，位于细胞1/3处的光辉带有的可见有的不可见，表面观多成类多边形，壁较厚，有时可见细胞被较厚的角质层。②种皮支持细胞：无色或黄棕色，侧面(断面)观多呈哑铃状，通常两端较膨大，外壁和内壁稍后，表面观呈类圆形(可见两个同心圆)。③角质层碎片：厚10～19 μm，多透明，光亮。④内胚乳细胞：细胞壁黏液质化，胞腔内含黄棕色物质。⑤子叶碎片：栅栏组织长圆柱状，海绵细胞类圆形。见图4。

A1、A2 栅状细胞表面观 B1、B2 栅状细胞顶面观 C角质层 D支持细胞 E支持细胞顶面观 F1F2 子叶薄壁细胞 G内胚乳细胞

3.4理化鉴别结果 称取望江南子粉末1 g，放在锥形瓶中，加入70%乙醇100 ml，超声提取30 min，过滤，以供显色试验。

3.4.1Feigl反应 醌类衍生物在碱性条件下经加热能迅速与醛类及林二硝基苯反应生成紫色化合物。取样品溶液，加入25%碳酸钠水溶液、4%甲醛及5%邻二硝基苯的苯溶液1 d，水浴加热1～4 min，颜色逐渐加深，最后呈紫色。验证可能含有蒽醌类化合物。

3.4.2Borntrager反应 羟基醌类在碱性溶液中发生颜色变化，多呈橙、红、紫红及蓝色。取少量粉末，加10%硫酸水溶液5 ml，置水浴锅上加热2～10 min趁热过滤，滤液冷却后加乙醚2 ml振摇，静置后分取乙醚层，加入5%氢氧化钠水溶液1 ml振摇。加入碱后水层变为红色，醚层有黄色变为无色。验证可能含有蒽醌类化合物。

3.4.3与金属离子的反应 在蒽醌类化合物中，如有ɑ-酚羟基或邻二酚羟基结构时，则可以与Pb2+、Mg2+等金属离子形成有颜色的络合物。取样品溶液2 ml，加入醋酸镁后颜色变红，验证可能含有ɑ-酚羟基或邻二酚羟基结构。

3.4.4三氯化铁反应 取样品溶液1 ml于试管中。加入三氯化铁溶液数滴，液变为蓝黑色。验证种子中可能还有鞣质。

1 中国科学院植物研究所主编. 中国高等植物图鉴(第二册).北京：科学出版社，1972：339

2 王强，杨竟雄. 望江南子中蒽醌类化合物的含量测定. 福建药学杂志, 1990 ,2(3) :1

3 刘娟，邹纯才，孙佐富.决明子及其代替品望江南子的比较鉴定.黑龙江医药科学.2006.29(2)：63