肿瘤坏死因子α对链脲佐菌素糖尿病大鼠血压的影响

朱海龙 秦华丽 张 翠

(皖南医学院病理生理学教研室 安徽 芜湖 241002;①南京农业大学医院内科)

众所周知，高血压可以损害心、脑、肾等人体的重要器官，造成中风、心肌梗死、肾功能衰竭等。糖尿病合并高血压后更加重了心血管病变的危险性[1]。因此，对糖尿病高血压的发病机理进行研究非常重要。本文就肿瘤坏死因子α(TNF－α)对链脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)诱导糖尿病大鼠血压的影响进行了初步探讨，以期为糖尿病高血压的发病机制研究提供资料。

1 材料与方法

1.1 材料 STZ(Sigma公司)，葡萄糖试剂盒(长春迪瑞实业)，重组人Ⅱ型TNFα受体－抗体融合蛋白(上海中信国健药业)，血糖仪及血糖检测试纸(freestyle)，酶标仪(美伯乐680型)，RM6240生物信号处理系统(成都仪器厂)。健康SD(Sprayue Dawley)大鼠32只，体重(185±10)g，由南京青龙山实验动物繁殖场提供。

1.2 方法 建立糖尿病大鼠模型，见[2]，方法略有改动。将32只SD大鼠随机分为对照组、观察组及预防组。其中观察组及预防组各11只，经腹腔一次性注射STZ 45mg/kg，并以高脂饲料喂养。对照组大鼠10只，腹腔注射同体积的柠檬酸钠－柠檬酸缓冲液，予基础饲料。第3周开始，每隔3天为预防组大鼠腹腔注射1次TNFα受体－抗体融合蛋白(0.4mg/kg)，连续用药4周，其它各组每次注射同体积的生理盐水对照。

1.3 检测项目 用药结束后，存活大鼠禁食12小时，25%乌拉坦(4mL/kg)，麻醉后行颈总动脉插管，并与RM6240生物信号处理系统相连，记录血压。另取血测定大鼠空腹血糖(FBG)，方法采用葡萄糖氧化酶法。

1.4 统计学处理 数据采用SPSS10.0软件处理，计量数据以均数±标准差()表示，两组比较采用t检验。

2 结果

与对照组(正常)大鼠相比，观察组(糖尿病)大鼠的血糖水平和血压显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。预防组(注射有TNF－α受体－抗体的糖尿病大鼠)与对照组相比，血压虽有升高，但差异无统计学意义。预防组与观察组相比，大鼠的收缩压明显下降，且差异具有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 3组大鼠血压、FBG比较(例，)

表1 3组大鼠血压、FBG比较(例，)

注:观察组与对照组比较，▲▲P ＜0.05;预防组与对照组比较，▲P ＜0.05;与观察组比较，△P ＜0.05

组别 例数 体重(g) 收缩压(mmHg) 舒张压(mmHg) FBG(mmol/L)对照组 7 245.71 ±29.74 80.84 ±18.16 49.05 ±11.40 7.86±0.61观察组 7 251.00 ±57.08 109.48±19.07▲▲ 72.07±19.85▲▲ 20.45±7.45▲▲预防组 8 271.12 ±33.45 85.52±15.69△ 54.85±15.49 13.59±2.22▲

3 讨论

糖尿病高血压的相关研究表明，45岁糖尿病患者中40%并发高血压，而在75岁左右的患者中患病率上升至60%[3]。糖尿病合并高血压后对人体的威胁更为严重，比如糖尿病合并高血压可加速心脏血管及肾脏血管的病变，从而诱发和加剧糖尿病肾病的进展，肾病形成后会进一步使血压升高，形成恶性循环，导致肾功能衰竭。因此对糖尿病高血压的发病机理进行研究非常重要。近年来炎症反应在糖尿病发病中的作用受到广泛关注[4]。TNF－α主要由活化的巨噬细胞产生，是生物体内重要的炎症介质之一。其与受体结合后，可通过级联信号转导，启动多种蛋白激酶及磷酸酯酶的活化，从而参与多种临床疾病的发病。如在脂肪肝及胰岛素抵抗的发生发展中，TNF－α起着重要作用[5，6]。另有文献报道 TNF － α 不仅能通过损伤内皮细胞，致使内皮功能紊乱;还能通过促进内皮细胞C－sis基因表达，产生血小板衍化生长因子，促进血管平滑肌细胞的增殖，可能参与糖尿病高血压的形成[3]。本研究通过皮下注射重组人Ⅱ型TNF－α受体－抗体融合蛋白，阻断TNF－α和细胞表面TNF受体结合，从而降低TNF－α活性，观察其是否具有减缓糖尿病血压上升的作用。最终实验结果显示，未注射TNF－α受体－抗体的糖尿病大鼠的血糖和血压与对照组相比均显著升高。而注射有TNF－α受体－抗体的糖尿病大鼠与观察组相比，收缩压明显下降。这说明TNF－α可能参与糖尿病大鼠血压的上升。在整个研究过程中，我们发现无论正常大鼠还是糖尿病大鼠血压普遍不高，这可能与麻醉药品乌拉坦的降压效应以及季节因素导致大鼠体温偏低有关[7]。综合研究结果显示，TNF－α与糖尿病高血压的形成具有一定的相关性，但TNF－α是否参与血压上升的整个过程，是否还有其它的炎症因子共同参与其中，还需进一步研究。

[1]Donaire JAG，Ruilope LM.Trandolapril/verapamil combination in hy-pertensive diabetic patients[J].Vasc Health Risk Manag，2007，3(1):77

[2]陈 旺，李 鸿，郭 健，等.培达对STZ糖尿病大鼠血脂及血流变学指标影响的观察[J].实验动物科学与管理，2006，23(3):12

[3]杨 伟，李海辉.2型糖尿病合并高血压患者大血管病变的炎性机制[J].中国医师杂志，2006，8(10):1355

[4]李 慧，邹大进.2型糖尿病及肥胖与慢性炎症因子[J].第二军医大学学报，2003，24(11):1244

[5]Sougioultzis S，Dalakas E，Hayes PC，et al.Alcoholic hepatitis:from pathogenesis to treatment[J].J Curr Med Res Opin，2005，21(9):1337

[6]龙 艳.瘦素、肿瘤坏死因子与胰岛素抵抗[J].华夏医学，2003，16(2):260

[7]范海燕.健康大鼠体温变化对血压与脉搏影响的定量研究[D].山东济南:山东大学，2007