食管鳞癌患者血清VEGF、Endostatin水平变化及意义

钱文军，纪 勇，茅卫东，刘少平，沈 东，林 峰，陆向东

(东南大学附属江阴医院，江苏江阴214400)

肿瘤的生长和转移必须依赖于血管生成［1］，抑制其血管生成能够控制其生长和转移［2］。血管内皮生长因子(VEGF)可与血管内皮细胞特异性结合，刺激血管内皮细胞增殖，并促进血管内物质渗出，为肿瘤细胞的迁徙和转移提供条件［3］。内皮抑素(Endostatin)被认为是最有效的内源性血管生长抑制因子之一，其表达水平与多种恶性肿瘤的进展和预后密切相关［4］。本研究采用 ELISA法对126例食管鳞癌患者血清中的VEGF和Endostatin进行了检测，观察其水平变化并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1．1 临床资料 2006年8月～2009年6月收治的食管癌患者126例，男86例，女40例;年龄45～74岁。本组符合以下标准:病理学检查诊断为食管鳞癌，患者术前未接受放疗、化疗及其他任何针对癌的治疗。肿瘤位置:食管上段16例，食管中段68例，食管下段42例。肿瘤T分期:T1期24例，T2期35例，T3期44例，T4期23例。肿瘤长度(以切除后测量肿瘤侵犯食管纵轴长度为标准)3～12 cm。肿瘤组织分化程度:高分化42例，中分化36例，低分化48例。选择体检健康者14例作对照，男10例，女4例;年龄40～70岁。

1．2 VEGF、Endostatin检测方法 采用非抗凝管抽取食管鳞癌患者及健康对照者的外周静脉血5 ml，室温放置30～60 min，5 000 r/min离心10 min，分离血清。将血清置2 ml的 Eppendorf管中，-20℃冷冻。采用ELISA法检测血清VEGF、Endostatin。按试剂盒说明书操作，于450 nm处检测VEGF的光密度值(OD值)，于490 nm处检测Endostatin的OD值。结果判断:①VEGF:以标准品浓度作横坐标、VEGF的OD值作纵坐标绘制标准曲线，在标准曲线上查出VEGF浓度。②Endostatin:以标准品浓度作横坐标(横轴为对数刻度)、Endostatin的OD值作纵坐标绘制标准曲线，在标准曲线上查出Endostatin浓度。所有标本重复检测2次，取均值。

1．3 统计学方法 采用SPSS13．0统计软件。组内及组间均数比较用t检验，多组均数比较用单因素方差分析，方差不齐或非正态分布资料的比较用秩和检验，VEGF与Endostatin的相关性予直线回归分析。P≤0．05为差异有统计学意义。

2 结果

食管鳞癌患者和健康对照者血清VEGF水平分别为(20．68 ± 3．09)μg/L、(3．82 ± 6．28)μg/L，Endostatin分别为(4．96 ± 1．72)μg/L、(1．60 ±0．37)μg/L，VEGF/Endostatin 分别为 4．17 ± 0．28、2．38 ±0．75，各指标相比，P 均 ＜0．05。血清 VEGF、Endostatin水平与食管鳞癌肿瘤分化程度、有无淋巴结转移、肿瘤直径、TNM分期有关(P均＜0．05)，详见表1。食管鳞癌患者血清VEGF与Endostatin水平呈正相关(r=0．594，P ＜ 0．01)，回归方程:Y=0．065 8X+90．463。

3 讨论

研究表明，VEGF和Endostatin分别是目前已知的作用最强、特异性最高的血管生成促进因子和抑制因子。由于基因表达的剪切方式不同，VEGF形成5 种不同异构体，即 VEGF121、145、165、189、206，5种异构体均能诱导体内血管生成［5］。Endostatin为胶原XⅧC-末端非胶原蛋白特征结构域(NC1)中的一内源性片段，大多分布在血管的基底膜上［6］，可抑制内皮细胞的增殖、迁移，并诱导其凋亡。

表1 血清VEGF、Endostatin水平与食管鳞癌患者临床病理参数的关系(μg/L，¯x ±s)

Kuroi等［7］检测了多种癌症患者血浆中的VEGF和Endostatin，发现其水平及二者比值明显高于健康对照组。本研究观察到，食管鳞癌患者血清中VEGF和Endostatin水平较健康对照者显著升高，且两者表达呈正相关。说明在食管鳞癌发生过程中，血管生成促进因子和抑制因子水平失衡，肿瘤通过分泌大量VEGF，促进血管生成，为肿瘤转移打下基础;同时，肿瘤细胞可能刺激包括Endostatin在内的多种血管形成抑制因子的合成，并通过血循环到达肿瘤部位，抑制肿瘤血管生成，与肿瘤血管生成促进因子相互拮抗［8］。

本研究发现，食管鳞癌患者血清 VEGF和Endostatin水平与肿瘤病变长度、淋巴结转移、TNM分期及分化程度等密切相关，食管鳞癌患者病变越长、细胞分化程度越低、TNM分期越晚，其血清VEGF和 Endostatin水平越高，且 VEGF/Endostatin增大。说明在食管鳞癌的发展进程中，VEGF和Endostatin相对性失衡表达，最终表现为促血管生成作用，导致肿瘤无限制生长、侵袭和转移。

综上所述，本研究结果进一步证明了VEGF、Endostatin表达失衡在食管鳞癌发生、发展、侵袭和转移中均起重要作用。血清VEGF、Endostatin水平可作为预测食管鳞癌预后、恶性行为的指标。

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