系统性硬化患者中抗原纤维蛋白抗体的临床意义探讨

姚中强,王国峰,马 军,刘 坚,刘湘源,于孟学

(1.北京大学第三医院风湿免疫科,北京100191;2.河北廊坊管道局医院风湿免疫科;3.长治医学院和平医院医学部;4.北京军区总医院风湿免疫科;5.中国医学科学院北京协和医院风湿免疫科)

系统性硬化(systemic sclerosis,SSc)是一种以皮肤先后发生水肿、硬化、萎缩为特点,累及血管、关节、肌肉及内脏的系统性自身免疫病。系统性硬化患者随其血清中自身抗体的不同,其临床表现、预后不尽相同,因此,识别患者外周血中的自身抗体有重要的临床价值。

目前为止,已经发现的SSc患者中的自身抗体包括:抗着丝点抗体(ACA)、抗DNA拓扑异构酶Ⅰ抗体(又名抗Scl-70抗体)、抗RNA多聚酶Ⅲ抗体、抗U1RNP抗体、抗 PM-Scl抗体、抗 Ku抗体、抗U3RNP抗体等。其中原纤维蛋白是抗U3RNP抗体的主要抗原表位[1],国内关于抗原纤维蛋白抗体(anti-fibrillarin antibody,AFA)在系统性硬化中的临床意义尚缺乏系统的研究,其在中国SSc患者中的阳性率及临床意义尚不明了,本试验拟对此展开研究。

1 资料与方法

1.1临床资料来自北京大学第三医院、廊坊市管道局医院、北京军区总医院、长治和平医院门诊和病房的系统性硬化患者216例,男性28例,女性188例,平均年龄(45.06±9.88)岁,平均病程(5.59±2.93)年,所有患者均符合美国风湿病学会关于系统性硬化的分类标准。

1.2诊断标准器官系统受累的标准及定义:肌肉受累定义为体格检查发现近端肌无力、或CK升高、或核磁共振/超声/肌电图发现肌肉炎症表现。患者超声心动图估测肺动脉收缩压峰值≥40 mmHg则认为患者存在肺动脉高压,肺动脉高压的严重程度分级如下:40-50 mmHg为轻度肺动脉高压,51-69 mmHg为中度肺动脉高压,≥70 mmHg重度肺动脉高压。严重胃肠道受累定义为吸收不良综合征、复发性假性肠梗阻或严重的需要胃肠外高营养的胃肠道病变。硬皮病肾危象定义为突发恶性高血压伴有血清肌酐升高和(或)微血管病性溶血性贫血。心脏受累定义为充血性心衰症状或者EF＜45%、或者心肌特异性肌酶升高、核素心肌显像异常或者心包积液或需要治疗的心律失常。

1.3方法

1.3.1血清学检测 抗核抗体(ANA)和抗着丝点抗体(ACA)用间接免疫荧光法检测,抗Scl-70抗体和抗U1-RNP抗体采用免疫印迹方法进行检测。

1.3.2酶联免疫吸附法检测抗原纤维蛋白抗体采用试剂盒(allelebiotech公司)进行检测。使用倍比稀释的阳性血清制作标准曲线,用标准曲线法获得抗体的相对单位(relative unit,RU)滴度。按照文献和试剂盒推荐,采用15 RU/ml作为 cut-off值。

1.3.3统计分析 抗原纤维蛋白抗体阳性组和阴性组年龄、病程及性别构成比的比较分别采用t检验和非参数检验。使用logistic回归分析抗原纤维蛋白抗体与临床特点及自身抗体的相关性。统计分析采用SPSS18软件进行,P＜0.05为有统计学差异。

2 结果

2.1 抗原纤维蛋白抗体阳性组和阴性组之间人口学特点比较

216名系统性硬化患者中23例患者抗原纤维蛋白抗体阳性,阳性率为10.846%。从表1可见,抗原纤维蛋白抗体阳性组和阴性组之间患者年龄、病程及性别构成比之间无显著差异。

2.2 抗原纤维蛋白抗体与患者临床表现之间相关性分析

Logistic回归分析表明,抗原纤维蛋白抗体与雷诺氏现象、肌炎、心脏受累、间质性肺炎、肾危象、严重胃肠道受累无关,而与弥漫型皮肤受累和肺动脉高压显著相关(见表2)。

2.3 抗原纤维蛋白抗体与系统性硬化患者自身抗体的相关性

多因素logistic回归分析表明,抗原纤维蛋白抗体与抗拓扑异构酶抗体、抗U1RNP抗体相关,而与抗着丝点抗体无关(见表3)。

表1 抗原纤维蛋白抗体阴性组和阴性组之间人口学特征比较

表2 抗原纤维蛋白抗体与系统性硬化患者临床表现的相关性分析

表3 抗原纤维蛋白抗体与其他的系统性硬化相关抗体的相关性分析

2.4 抗原纤维蛋白抗体与不同程度肺动脉高压的相关性

从表4可见,抗原纤维蛋白抗体阳性患者发生轻度肺动脉高压、中度肺动脉高压和重度肺动脉高压的风险均明显增加,尤其是轻度肺动脉高压的风险明显增加。

表4 抗原纤维蛋白抗体与不同程度肺动脉高压的相关性分析

3 讨论

自身抗体在自身免疫病,尤其是系统性硬化中有重要价值,不仅仅提示疾病诊断,而且常与疾病临床特点、预后等相关。原纤维蛋白是抗U3RNP抗体的主要抗原表位[1]。国外的研究表明,抗U3RNP抗体在系统性硬化中的阳性率为5%-8%[2]。我们的研究表明,抗原纤维蛋白抗体阳性率为10.65%,造成抗体阳性率不同的原因可能与种族、人群不同有关。有研究表明,非洲裔系统性硬化患者中AFA阳性率为 16%-22%,而高加索人种中只有4%[1,3,4]。我们纳入的患者均为汉族,汉族系统性硬化患者此抗体阳性率介于高加索人群和非洲人之间。

我们的研究表明,AFA与弥漫型皮肤硬化相关,这与国外的研究类似,非洲裔美国系统性硬化患者中几乎AFA阳性患者均为弥漫型皮肤受累者;而高加索人群中AFA在弥漫型皮肤受累患者中阳性率也显著高于局限型受累者中,但是阳性率没有非洲裔那么高[3,5,6]。我们的研究发现,抗拓扑异构酶抗体与AFA相关,可能原因是两者均与弥漫型皮肤硬化相关。

国外的研究表明,AFA抗体阳性与患者发生肾危象有关[6],而我们的研究则与之结论相反,可能的原因是种族不同,也可能与我们国家的风湿病学界对肾危象的警惕性较高有关,治疗系统性硬化患者较少使用大剂量激素。国外的研究还发现[2,6],AFA与患者发生肌炎有关,而我们的研究没有发现这种联系,其原因可能与种族有关,是否还有其他原因尚待进一步研究。

我们的研究发现,AFA抗体与肺动脉高压相关,这与国外的研究类似[6]。说明在系统性硬化患者中,对于AFA阳性的患者,需要严密监测其肺动脉压力。我们的研究发现,AFA与抗U1RNP抗体相关,两者均与肺动脉高压有关,其分子机制尚待进一步研究。国外报道,AFA阳性患者死亡风险没有显著增加[6],虽然我们的试验没有研究其与死亡的相关性,但是,我们研究了AFA与肺动脉高压的相关性,发现其主要与轻度肺动脉高压显著相关,而肺动脉高压与系统性硬化死亡相关性最强的是中高度肺动脉高压,可能这是其中的一部分原因。

本研究表明,抗原纤维蛋白抗体阳性的患者更容易出现弥漫型皮肤受累和肺动脉高压,可能需要更严密的临床监测和干预。

[1]Baserga SJ,Yang XD,Steitz JA.An intact Box C sequence in the U3 snRNA is required for binding of fibrillarin,the protein common to the major family of nucleolar snRNPs[J].EMBO J,1991,10:2645.

[2]Ho K T,Reveille JD.The clinical relevance of autoantibodies in scleroderma[J].Arthritis Res Ther,2003,5:80.

[3]Arnett FC,Reveille JD,Goldstein R,et al.Autoantibodies to fibrillarin in systemic sclerosis(scleroderma):an immunogenetic,serologic,and clinical analysis[J].Arthritis Rheum,1996,39:1151.

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[5]Bunn CC,Denton CP,Shi WX,et al.Anti-RNA polymerases and otherautoantibody specificities in systemic sclerosis[J].Br J Rheumatol,1998,37:15.

[6]Tormey VJ,Bunn CC,Denton CP,et al.Anti-fibrillarin antibodies in systemic sclerosis[J].Rheumatology,2001,40:1157.