动物听觉诱发反应特点及测试技术（3）

鲁海涛 李兴启

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动物听觉诱发反应特点及测试技术（3）

鲁海涛1李兴启2

3.6 ECoch G波形识别及观察指标量取

3.6.1 CAP阈值、潜伏期量取方法 通常在高声强诱导时CAP会出现3个负波，即N1、N2、N3。其中N1出现率最高，当判断CAP阈值和潜伏期的时候，以N1作为判断标准。随刺激强度的降低潜伏期延长，幅值降低。从声刺激开始到N1波顶点的距离为CAP波潜伏期（图6）。

3.6.2 SP－AP复合波 SP波拐点到起始点的距离为其潜伏期，拐点到基线的距离为其幅值。AP幅值为N1波顶点到基线的距离。

3.6.3 CM幅度量取方法 测量取波的顶点和低点（峰－峰值）的电位差，即为CM的幅值。正常情况下，CM可严格复制刺激声的声学波形，且其输入／输出函数（I／O）曲线为非线性（图7）。

图6 SP－AP复合波示意图a显示了CAP N1和SP幅值和潜伏期的量取方法。b显示了CAP波的阈值在25 dB SPL，20 dB SPL未引出CAP波

图7 CM的变化特点a为n＝10的平均值I／O函数曲线。b为CM波形。随声刺激强度的变化，从50 dB SPL到100 d B SPL，CM幅值逐渐增大，到100 dB SPL后，CM幅值又逐渐减小

3.7 ECoch G的频率特异性

3.7.1 CAP 采用tone pip声刺激可诱发具有频率特异性的CAP波，反映了耳蜗不同部位的功能。

3.7.2 CM 采用tone burst声刺激可以诱发有频率特异性的CM波。

4 豚鼠电听觉特点及测试方法和应用

随着电子耳蜗临床应用的不断发展，植入前手术适应症的选择显得愈来愈重要。特别是听神经病（auditory neuropathy，AN）目前仍无很好的治疗方法。有报道，AN患者有50%植入电子耳蜗效果较好，提示传入神经（螺旋神经元）存活较好。然而，这或许有些盲目性，尚须进行动物模型实验研究。因而无论从电子耳蜗所属的电听觉范畴，还是AN的基础研究，都需要首先开展动物的电刺激诱发电位研究。故本节着重介绍电刺激豚鼠诱发的ABR、皮质原发反应（primary response，PR）、颅顶慢反应（SCR）的方法及其特点。

4.1 电极制作及放置部位

4.1.1 银球电极制作方法 用被覆特氟隆的银丝10 cm，在酒精灯下将银丝一头烧成小珠状（直径1 mm），放入氯化钠溶液中通过直流进行泛极化处理，尾端焊接在导线上，通常放在圆窗龛。

4.1.2 针形电极 用长约3 cm的细于22号的皮下注射针头或针灸针，除针尖和尾端外均涂以绝缘材料（如聚四氟乙烯、六氟六烯），尾端焊接到导线上。电极可经外耳道或开放的听泡放置在鼓岬处。

4.1.3 E－ABR电极位置 ①记录电极以绣花针在两耳廓前缘连线的中点钉入颅骨（注意不要进入颅内），以手指轻轻碰触针鼻处，动物头与针一起运动，即证明电极深度到位，再通过带鳄鱼夹的记录导线与放大器相连。②E－PR：典型的PR为正－负－正（P－N－P）三个波，其负波的峰潜伏期大约在10 ms（图9）。参考电极放置在对侧耳垂，地极放置在鼻尖。刺激电极放置在鼓岬或圆窗，刺激电极之回落电极（针灸用针或铜丝）放置在耳屏前方或颞骨鳞部。

4.1.4 E－PR电极位置 ①记录电极的放置：暴露头颅，显示出冠状缝合顶颞缝，在冠状缝后2～3 mm，顶颞缝上1～2 mm交点处即为听皮质在颅骨表面的投影。可将3号绣花针垂直钉入此处的颅骨至硬脑膜外（深度大约1 mm），通过带鳄鱼夹的记录导线与放大器相连。②其余电极的放置同EABR。

4.1.5 E－SCR电极位置 同E－PR。

4.2 电刺激器 电刺激器采用智听公司的Smart EP。HIS诱发电位仪，HIS诱发电位仪配套电刺激器，与诱发电位可以进行同步触发连接，其作用主要是用来产生电荷平衡双向脉冲电流。

4.3 电刺激参数的选择

4.3.1 电刺激方波宽度 采用双向脉冲电流，正波25μs，平台期25μs，负波25μs。目前对电刺激波的设置，不同的研究人员采用不同的方法。但总的原则是采用双向脉冲刺激。

4.3.2 电流强度：刺激电流强度从0μA到5 000μA。不同的动物最大刺激强度不同，以诱发出肌源电位为刺激电流强度上限。

4.3.3 E－ABR 刺激重复率是10次／秒，高通100 Hz，低通1 500 Hz，扫描时间10 ms，叠加次数512～1 024。

4.3.4 E－PR 刺激重复率是1次／秒，高通30 Hz，低通100 Hz，扫描时间50～100 ms，叠加次数1 024。

4.3.5 E－SCR 刺激重复率是1次／秒，高通1.6 Hz，低通16 Hz，扫描时间25～50 ms，叠加次数50。

4.4 减少刺激伪迹的方法

4.4.1 动物采用深度麻醉 动物麻醉后可减弱脑电波的干扰

4.4.2 给予肌松药有助于降低肌源电位的干扰 耳蜗底周紧邻面神经管，较高电流时可刺激面神经，使相应的肌肉收缩，产生肌源电位，给予肌松药可以减弱或消除肌肉的收缩。

4.4.3 采用交替极性脉冲刺激 采用交替极性刺激时，奇数次和偶数次刺激的伪迹波形相同，方向相反，通过平均叠加原理，可以消除或减弱刺激伪迹的干扰。

4.4.4 记录电极之参考电极放置对侧耳 当记录参考电极放置在同侧时，因刺激伪迹过高常导致前置放大器频繁过饱和，出现波形记录的拒接收现象。参考电极放置在对侧耳垂可有效减弱刺激伪迹。

4.5 电诱发电位的特点

4.5.1 电诱发波形图

①E－ABR波Ⅰ由于刺激伪迹的干扰常常不能分辨，波Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ较为恒定、清晰。各波出现的潜伏期明显短于声刺激ABR，且电极放置的位置不同（如鼓岬或圆窗等）对阈值和波形有较大的影响。所以，即使在正常动物，电刺激ABR的阈值也有较大的波动范围（图8）。图9左列是梁之安教授采用自制电流隔离器记录的E－ABR图，其记录电极放置在硬脑膜外，所以在波形上与图8有一定的差别。

4.5.2 刺激电流的动态范围 E－ABR、E－PR、E－SCR产生最小反应的电流和最大反应的电流相差100倍，即40 d B。可见，电刺激诱导的听觉电反应动态范围比声听觉反应动态范围（120 dB）小得多。

图8 豚鼠E－ABR波形图

（待续）

（2009－11－11收稿）

（本文编辑 李翠娥）

10.3969／j.issn.1006－7299.2011.01.034

R764.04

A

1006－7299（2011）01－0095－02

1 华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科（武汉430022）； 2 解放军总医院耳鼻咽喉研究所