高效液相色谱法测定呋喃西林溶液中呋喃西林含量

邓 芳 ，万 莉 ，崔小平

(1.重庆市涪陵区中心医院，重庆 408000;2.重庆市万州药品检验所，重庆 404000;3.重庆三峡中心医院，重庆 404000)

呋喃西林溶液由呋喃西林、氯化钠等组成，为局部抗菌药物，对多种革兰阳性和阴性细菌有抗菌作用(低浓度呈抑制作用，高浓度呈杀菌作用)，对厌氧菌也有抑制作用，细菌对其不易产生耐药性，多用于冲洗腔道、膀胱，冲洗和湿敷患处，以及滴耳、滴鼻、洗眼等。在原药品标准中，其呋喃西林含量测定方法紫外-可见分光光度法，不能完全排除方中其他成分的干扰。为进一步提高制剂质量，笔者采用高效液相色谱法测定了呋喃西林溶液中呋喃西林含量，现报道如下。

1 仪器与试药

LC-10ATVP型高效液相色谱仪(日本岛津)，包括LC-10ATVP泵、SPD-M10AVP检测器、CTO-10ASVP柱温箱、SIL-HTA自动进样器和Class-VP色谱工作站;ME 215 S型电子天平(Sartorius，Max 210 g，d=0.01 mg)。呋喃西林对照品(武汉久安药业有限公司提供的精制原料，含量为99.82%);呋喃西林溶液(本院制剂室，批号为091109，091121，091129，规格为 0.02%);甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇-水-三乙胺(40∶60∶0.1);流速:1.0 mL/min;检测波长:254 nm;进样量:20 μL。

2.2 溶液制备

精密称取呋喃西林对照品20 mg，置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照品贮备液，精密吸取此液10 mL，置50 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，得对照品溶液。精密吸取本品10 mL(约相当于呋喃西林2 mg)，置50 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按处方比例取除呋喃西林外的其他组分，制成阴性样品，再按供试品溶液制备法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验:分别取2.2项下3种溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图(图1)。可见，其他成分对呋喃西林的测定无干扰，呋喃西林的保留时间约为4.2 min，理论板数大于4 000。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:精密吸取对照品溶液 5，10，15，20，25，30，35 μL，进样测定峰面积。以峰面积积分值(Y)对呋喃西林进样量(X)进行线性回归，得回归方程 Y=3.67×106X+1.96×104，r=0.999 9(n=7)。结果表明，呋喃西林进样量在0.2～1.4 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好。

精密度试验:精密吸取对照品溶液20 μL，重复进样6次。结果峰面积平均值为2 936 567，RSD为0.21%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液 20 μL，分别于 0，2，4，6，8，10，12 h时进样，记录色谱峰面积。结果的 RSD为0.42%(n=7)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

重复性试验:取同一批号样品，依法制备6份供试品溶液，分别测定峰面积，计算呋喃西林含量。结果平均含量(标示百分含量)为98.5%，RSD为0.45%(n=6)，表明方法重复性良好。

加样回收试验:精密量取已知含量的样品6份，每份5 mL，分别精密加入对照品贮备液4.0，5.0，6.0 mL，按供试品溶液制备方法制备溶液，测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取3批样品，依法制备供试品溶液，精密量取20 μL，测定峰面积，按外标法计算含量。结果高效液相色谱法所测得含量分别为标示量的98.12%，98.53%，97.66%，紫外分光光度法所测得含量分别为标示量的98.79%，99.21%，98.29%(n=3)。

3 讨论

采用甲醇-水(35∶65)系统[1]，呋喃西林峰虽能有效分离，但峰形较差、拖尾严重，加入少量三乙胺即可改善拖尾现象。选用本法的流动相保留时间短，峰形对称。取样品溶液，用二极管阵列检测器在200～400 nm扫描，254 nm波长处呋喃西林吸光强度虽不是最大，但在此波长处杂质干扰较小，故选254 nm作为检测波长。试验表明，紫外光谱法测定的呋喃西林含量偏高，有可能是处方原料所含杂质有一定干扰所致，而本试验方法灵敏度高、重现性好，不失为呋喃西林溶液中呋喃西林含量测定的一种好方法。

[1]毛贵福.反相高效液相色谱法测定呋喃西林溶液中2组分的含量[J].中国药房，2005，16(8):622-623.