河北张家口地区猪瘟免疫状况血清学调查

徐明举,郑志新,温 哲,徐 彤

(1.河北北方学院动物医学系,河北宣化075000;2.河北省张家口市动物卫生监督所,河北张家口075000)

猪瘟(CSF)是由瘟病毒属的猪瘟病毒(CSFV)引起的猪的一种热性高度接触性传染病,各年龄阶段的猪和不同品种的猪对其均易感。猪瘟呈世界性分布,由于其危害程度高,对养猪业造成经济损失巨大,所以世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类传染病,并规定为国际重点检疫对象。1999年2月12日我国农业部也将猪瘟列为一类动物疫病。2007年我国将猪瘟纳入国家强制性免疫范畴,应用我国研制的兔化猪瘟弱毒苗有效控制了猪瘟的大面积流行,但是目前该病在我国仍时有发生,依然是危害我国养猪业的主要传染病之一。近年来养猪业在河北省张家口市一直处于稳步快速发展之中,饲养规模逐年扩大。但由于引种过于频繁及中小型猪场收购猪饲养比例较大等原因,使得猪瘟的流行形式、发病特点和病理变化都发生了明显的变化,主要表现为隐性感染、亚临床型感染或非典型性感染,单凭经验和临床诊断十分困难,必须依赖实验室检测技术。ELISA方法检测猪瘟抗原、抗体,操作简单、快速[6],适用于群体监测,为国际贸易检测猪瘟指定试验之一。为了掌握本市不同规模猪场猪瘟疫苗免疫后抗体水平变化规律,对张家口地区38个规模化及中小型猪场不同阶段猪群进行取样,监测免疫后猪瘟抗体,以了解猪瘟疫苗免疫效果,为开展猪瘟的免疫预防提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 被检样品的采集 被检样品采自张家口地区的12个规模化猪场和26个中小型猪场。血清样品的采集:耳静脉采血,每头10 mL,自然凝固析出血清,共采集1 256份血清样品(其中12个规模化猪场498份、26个中小型猪场758份)。扁桃体样品的采集:用采样枪采集猪的扁桃体样品565份(其中12个规模化猪场230份、26个中小型猪场335份)。样品在河北北方学院动物医学系传染病实验室检测。

1.2 检测试剂 猪瘟间接ELISA诊断试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司,批号为201006213。猪瘟荧光标记抗体购自中国兽医药品监察所。

1.3 猪瘟间接ELISA试验检测抗体方法和判定标准 按诊断试剂盒操作说明书进行。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于1.0,阴性对照孔平均OD630值必须小于0.3。样品OD630值大于0.35,判为阳性;样品OD630值小于 0.35,判为阴性。ELISA和HIA结果见表1。

表1 ELISA和HIA结果

1.4 直接荧光抗体试验检测方法和判定标准 新鲜的扁桃体制作组织切片,然后滴加猪瘟荧光标记抗体,充分反应后,封片,荧光显微镜下镜检,在视野里细胞轮廓清晰,扁桃体隐窝上皮细胞的胞浆呈现明亮的翠绿色或黄绿色荧光,则可判为猪瘟抗原阳性反应;荧光微弱,细胞形态不清或无荧光判为猪瘟抗原阴性反应。

2 结果

2.1 规模化及中小型猪场猪瘟抗体效价 见表2和表3。从表2和表3可以看出,规模化猪场中母猪、育肥猪、断奶仔猪和哺乳仔猪的免疫合格率分别为89.83%、85.00%、87.12%和 95.31%。从表 3可以看出,中小型猪场中母猪、育肥猪、断奶仔猪和哺乳仔猪的免疫合格率分别为39.80%、42.30%、23.14%和51.78%。

表2 规模化猪场不同日龄猪血清猪瘟抗体效价ELISA检测结果

表3 中小型猪场不同日龄猪血清猪瘟抗体效价ELISA检测结果

2.2 规模化及中小型猪场免疫状况 见表4。从表4可以看出,12个规模化猪场有猪瘟免疫合格率均高于60%,8个猪场(66.67%)猪瘟免疫合格率高于90%;而在 26个中小型猪场却有12个猪场(46.15%)猪瘟免疫合格率低于60%,仅有1个猪场(3.85%)猪瘟免疫合格率高于90%。

2.3 直接荧光抗体试验结果 即猪瘟病毒抗原阳性状况,见表5。

表4 规模化及中小型猪场免疫状况

表5 规模化及中小型猪场猪瘟抗原阳性状况

从表5可知,中小型养猪场猪瘟病毒感染率达16.4%,远高于规模化猪场猪瘟病毒感染率(3.91%)。

3 讨论与分析

3.1 本次调查结果显示,规模化猪场母猪、育肥猪、断奶仔猪和哺乳仔猪的免疫合格率分别为89.83%、85.00%、87.12%和 95.31%,均高于 80%(猪群猪瘟免疫保护临界线),免疫状况理想,猪群较为稳定,猪瘟病毒感染率很低,只有3.91%;而中小型猪场免疫合格率则明显低于规模化猪场,分别为39.80%%、42.30%、23.14%和 51.78%,这主要是中小型猪场防疫意识淡薄,免疫程序制定不合理或免疫操作不当所致,或者中小型猪场的猪多购自外地或外场,无法准确掌握其抗体水平,这样的猪猪瘟病毒感染率较高,往往在购入不久后或育肥时发生猪瘟。所以必须将疫苗接种和免疫监测有机结合起来,以免疫监测决定合理的免疫程序,达到最佳免疫效果。

3.2 一般认为,猪瘟抗体 HI效价大于 1∶16(ELISA OD630大于0.35)以上才具有保护力,而对猪群来说,免疫合格率在90%以上才能有效预防猪瘟的流行。本次调查结果表明,张家口市规模化猪场猪瘟免疫状况较好,12个规模化猪场中有8个猪场免疫合格率达90%以上,这主要与规模化猪场比较重视猪瘟疫苗接种,坚持做好母猪配种前疫苗接种,种母猪长期接受免疫有关。

3.3 中小猪场猪瘟抗体水平较低的原因分析

3.3.1 疫苗质量问题 根据我市实际情况分析,疫苗质量问题可能是造成各个县区猪瘟抗体滴度及抗体合格率普遍偏低的主要原因。中小猪场贪图便宜,自购疫苗自行注射,使用了过期或失效疫苗。其次是保存和运输问题,有的地方不按规定运输,造成疫苗失效。

3.3.2 免疫操作中的问题 (1)免疫密度偏低,相当数量的猪只未得到有效免疫。(2)免疫接种,不按规定免疫剂量足量注射。(3)免疫注射技术水平参差不齐。(4)重复注射,注射了一次猪瘟疫苗,时过不久,又重新注射。(5)不做母源抗体监测,过早注射,干扰破坏母源抗体,影响疫苗免疫效果。(6)为了节省人力物力,注射不换针头,造成相互感染。

3.3.3 免疫程序的问题 目前张家口市中小猪场基本没有进行猪瘟抗体水平监测的意识和能力,无法根据抗体的消长规律制定科学合理的免疫程序,结果造成盲目免疫注射。加上实际生产中很难实行“全进全出”的管理模式,猪只大范围频繁调运,造成猪的批次不同,混合饲养,容易引起应激和发病。

3.3.4 先天性感染或持续性感染 是导致猪瘟疫苗免疫后抗体水平不能有效升高的重要原因。因此,通过直接荧光抗体试验检出并淘汰猪瘟抗原阳性猪,是净化猪瘟的有效途径之一。