血清中胎盘生长因子水平变化与子痫前期的关系研究

何 云，王晨虹，石泽真，宋彩珍，钟 梅

（1.深圳市妇幼保健院妇产科，广东深圳 518028;2.武汉市武昌医院检验科，武汉 430071;3.南方医科大学附属南方医院妇产科，广州 510515）

子痫前期（preeclampsia，PE）是妊娠期特有的疾病，以高血压、水肿、蛋白尿为主要症状，严重时出现抽搐、昏迷，甚至母婴死亡。我国的发病率为9.4%［1］。PE 病因至今仍未能阐明，严重危害母婴生命安全，影响了对该病的诊断、治疗和预防水平的进一步提高。目前研究认为胎盘生长因子（placenta growth factor，PlGF）可能参与了子痫前期的发生及发展［2］，文献报道 PE 患者的PlGF水平低于正常妊娠组［3，4］。本研究采用酶联免疫吸附法测定妊娠妇女的外周血清PlGF表达情况，同时收集患者临床资料，探讨PlGF在PE发病中可能的作用以及其对PE诊断预测的价值。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2009年2月至2010年4月在深圳市妇幼保健院住院分娩的妊娠妇女53例，其中PE轻度15例、PE重度患者21例;血压正常无妊娠合并症的孕晚期孕妇17例（对照组），均为单胎妊娠。PE诊断标准参照全国高等学校教材妇产科学第7版［1］。排除标准:既往无高血压、心脏病、肾病、糖尿病、甲状腺亢进、血小板减少等病史;无胎膜早破、早产及感染征象。对照组、PE轻度、PE重度组平均年龄分别为（31.29 ±4.34）、（31.27 ±3.93）、（30.05±3.54）岁，平均分娩孕周（39.24 ±0.97）、（39.53 ±1.38）、（38.62 ±1.93）周。三组年龄及分娩孕周有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 外周血PlGF水平的检测 PE孕妇入院时未采取任何治疗措施之前取肘静脉血3 mL，注入不抗凝的玻璃试管中，静置0.5 h，3000 r/min离心10 min取上清，置－70℃冰箱保存。取对照组孕妇肘静脉血，同法处理。应用酶联免疫吸附（ELISA）法测定已分离保存的血清中PlGF浓度，操作严格按试剂盒（购自美国R＆D System公司）的说明书进行，所有标本均为同批测定，同人在同次实验中完成。检测值范围:0～800 ng/L，灵敏度:1.0 ng/L。

1.2.2 24 h 尿蛋白定量、血尿酸、肌酐、β2微球蛋白、白蛋白测定 按常规方法收集子痫前期孕妇入院当天始24 h尿液及开始治疗前血液送检验科检查。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，数据以均数±标准差（±s）表示，采用单向分类方差分析（one-way ANOVA），组间多重比较选用Dunnett T3法。以P＜0.05为差异有统计学意义。应用ROC曲线（receiver operating characteristic curve）进行判别效果的分析与评价。

2 结果

2.1 对照组、PE轻度组和重度组孕妇外周血中PlGF检测 对照组外周血中PlGF的水平为（147.55±86.66）ng/L，PE 轻度、重度孕妇的水平分别为（62.41±38.86）、（35.91 ±24.28）ng/L。经单向分类方差分析，三组比较有显著性差异（F=214.433，P=0.000），三组间进一步做两两比较，PE轻度、重度分别与正常对照组相比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），PE轻度与重度组间比较，差异无显著性（P＞0.05）。

2.2 对照组、PE轻度组和重度组孕妇临床生化指标检测 三组白蛋白、血尿酸、肌酐、β2微球蛋白水平比较，差异有统计学意义（P＜0.01），除白蛋白逐渐降低外各组均数随病情加重逐渐升高。PE重度组外周血中血尿酸、血清肌酐、β2微球蛋白明显高于对照组，血浆白蛋白水平低于对照组（P＜0.05）（表1）。

表1 对照组、PE轻度组和重度组孕妇临床生化指标比较

2.3 PE组孕妇24 h尿蛋白的定量 PE轻度组为（701.63 ±404.18）g，重度组为（2557.89 ±2064.34）g，差异有统计学意义（t= － 3.724，P=0.001）。正常组未测尿蛋白定量。

2.4 PlGF和血清尿酸诊断PE特性 ROC曲线下的面积为0.913，标准误为0.043。PlGF诊断PEP=0.000，95%可信区间为:0.829，0.998。同时 PlGF 在截断值等于107.25 ng/L时，灵敏度是91.7%，特异度是82.4%（图1）。血清尿酸诊断PE ROC曲线下的面积为0.788，标准误为0.064。血清尿酸诊断PEP=0.001，95% 可信区间为:0.662，0.913。同时血清尿酸在截断值等于326.0 μmol/L时，灵敏度是60.0%，特异度是87.5%（图2）。可见血清中PlGF水平判断PE病情的特异度、灵敏度高于血清尿酸。

图1 PlGF诊断PE ROC曲线

图2 血清尿酸诊断子痫前期ROC曲线

3 讨论

PlGF是一种分泌型同型二聚体糖蛋白。是血管内皮生长因子家族中的一员。其基因定位于染色体14q24～q31位点。PlGF在正常妊娠胎盘及母血中呈高表达，而男性及正常未孕女性几乎检测不到［5］，随着妊娠进展其水平逐渐上升:妊娠早期水平最低，妊娠中期（15周后）开始大幅度升高，妊娠晚期（28～30周）达高峰，之后明显下降［6］。本研究为了排除由于孕周的不同导致的PlGF值不同，选用晚孕期孕妇。PlGF一方面通过自分泌方式促进滋养细胞增殖分化，另一方面通过旁分泌方式调节胎盘血管形成和生理性重铸，同时还可对血管内皮生长因子起到协同作用，显著提高其生物活性，促进胎盘血管发展，维持妊娠过程中胎盘正常的血供和功能，使其适应母体和胎儿发育的需要。Luttun等［7］应用PlGF缺陷（PlGF－/－）小鼠的研究表明PlGF缺乏减少了血管新生。目前有观点认为是由于胎盘血管重铸障碍致胎盘功能不良是子痫前期发病的重要因素［8］。也许可以这样推测由于PlGF的减少导致胎盘重铸障碍，胎盘血管发育受阻，胎盘浅着床，从而导致子痫前期。本文研究结果与文献相似［5，9-12］，证实此种推测。

通过分析比较PlGF及临床生化指标与PE发病的关系发现白蛋白、血尿酸、肌酐、β2微球蛋白、24 h尿蛋白、PlGF与疾病的严重程度相关。De Vivo等［13］前瞻性研究得出PlGF和可溶性血管内皮生长因子可能被用来作为标记，用于预测PE。本研究发现PlGF诊断子痫前期灵敏度及特异度均较高，曲线下面积为 0.913，95% 可信区间为（0.829，0.998）。PlGF诊断子痫前期有显著性意义。同时PlGF在截断值等于107.25 ng/L时，灵敏度是91.7%，特异度82.4%，优于血清尿酸。

有研究报道，妊娠期高血压疾病时孕妇血清尿酸可预测先兆子痫的发生。用血清尿酸0.33 mmol/L作为切割值，尿酸诊断PE的敏感度为69%，特异度为51%［14］。血清 β2微球蛋白的升高可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况，较血肌酐更加准确。本研究表明β2微球蛋白与PE疾病显著相关。

白蛋白水平在子痫前期重度组明显降低，与正常组比较差异显著。可能由于肝肾功能受损，合成减少，肾脏漏出过多及血液稀释有关。研究显示低蛋白血症是重度PE临床发病前的预警信息之一［15-16］。

由于PE病因不明确，病情发展迅速，有部分患者仅存在实验室指标异常，如低蛋白血症，血尿酸、β2微球蛋白升高。如何建立一种子痫前期的早期预测和诊断方法，已成为子痫早期预防和治疗的关键环节。从本研究出发，首先可通过检测PlGF值判断病情，其次可以考虑联合PlGF及临床生化指标如尿酸、β2微球蛋白等进行预测PE的发生发展。进一步研究可以扩大样本量，选取不同孕周孕妇，联合检测PlGF值和临床生化指标如尿酸、白蛋白，β2微球蛋白等，找到一条经济可行的提高诊断识别预防子痫前期的方法。

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