胡 波
(武汉市普爱医院西院,武汉 430034)
Survivin为凋亡蛋白抑制剂(IAP)家族成员,广泛表达于人胚胎组织和肿瘤组织,并能强烈抑制细胞凋亡,与恶性肿瘤发病相关。2010年10月,我们采用RT-PCR法对Survivin mRNA在24份胃癌组织中的表达进行了检测,旨在进一步探讨胃癌发生、发展机制。
材料与方法:2008年1月~2010年6月我院胃肠外科胃癌组织及癌旁正常组织手术标本各24份,患者男17例,女7例;年龄49~75岁,平均62岁。其中胃癌临床分期为T1、T2、T3、T4期各6例,术前均未行化疗、放疗、生物治疗等。取上述标本,采用Trizol一步法取组织总RNA:循环32次,退火温度为56℃;GAPDH引物上游为CAGGAACAGCCGAGATGAC、下游为 CCATGGAGAAGGCTGGGG,循环 32次,退火温度为58℃。用紫外分光光度计测定总RNA在波长260和280 nm吸光度(A)值;取PCR反应产物6 μl加1 μl载样缓冲液,以1×TAE为电泳缓冲液,在1.5%琼脂糖凝胶上电泳(电压 80 V),紫外灯下观察结果并摄片,用JS2300凝胶成像分析仪进行图像扫描分析,以检测产物A值与对应 GAPDH吸光度值的比值作为表达结果。采用SPSS12.0软件进行统计学处理,计量资料以表示、行t检验,检验水准α=0.05。
结果:癌组织Survivin mRNA表达 T1、T2、T3、T4期分别为 0.8043 ±0.0107、0.8752 ±0.0156、0.9234 ±0.0117、0.9734±0.0218,癌旁正常组织无 Survivin mRNA 表达,两两比较P均<0.01。
讨论:胃癌是我国最常见的消化系统肿瘤,死亡率占恶性肿瘤第一位,发病率男∶女约为3∶1,发病年龄高峰为50~60岁,但发病原因尚未完全查明。Survivin特异性表达于胚胎发育组织及未分化成熟组织,并在几乎所有恶性肿瘤组织中出现高表达,而在正常成人多数组织中不表达(胸腺、胎盘、子宫内膜除外)。Survivin是迄今发现的最强的凋亡抑制因子,可促进细胞表型恶性转化,可能是某些恶性肿瘤发生的关键因素,而其本身的抗凋亡与细胞周期特异表达特性为肿瘤的基因治疗提供了新的靶向物。本研究显示,Survivin在癌旁正常组织中无表达,而在 T1、T2、T3、T4期胃癌组织中均呈逐渐递增的高表达状态。提示Survivin可能通过抑制恶性肿瘤细胞凋亡参与胃癌发生过程,并通过促进胃癌肿瘤细胞增殖进一步参与肿瘤浸润。
总之,Survivin可能与胃癌发生及肿瘤浸润程度相关,此为临床进一步研究胃癌的发生机制及提供新的治疗靶点提供了理论依据。