心肌三联检测卡在急性心肌梗死中的诊断价值

陈世佳

急性心肌梗死(AMI)是急性心肌缺血性坏死，是在冠状动脉病变的基础上发生冠状动脉血供急剧减少或中断，使相应的心肌因持久性缺血而发生的局部坏死［12］。是内科急诊中常见的重症病患之一。AMI发生后，如果在数小时内得不到明确诊断及适当的治疗，心肌就会缺血、缺氧造成不可逆的坏死，因此，早期诊断并及时有效的治疗对减少心肌坏死、改善预后至关重要［14］。AMI发生后，心肌损伤的标志物肌钙蛋白I(CTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Mb)可迅速释放到血液中，检测这些标志物可为AMI的诊断提供依据，检测这些生化标志物需要一定的仪器设备，有些实验室可能为因为某些原因暂时不能开展这些项目的检测，我们用肌钙蛋白I、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶联合检测卡定性检测AMI患者和健康体检者血清中CTnI，Mb，CK-MB结果，同时与我们常规检验的CK-MB结果比较，了解三联检测卡在诊断急性心肌梗死的诊断价值。旨在找到对实验条件要求不高，不需要特殊仪器设备、操作方便、实用，实验结果快速、准确的检测CTnI，Mb，CK-MB的方法为临床对AMI的诊断提供迅速准确的检验依据。

1 资料与方法

1.1 检测对象 2009年6月至2010年6月我院住院患者已确诊的AMI患者41例，其中，男35例，女6例，年龄25～86岁，民族为汉族;正常对照组为来我院的健康体检者，21例，年龄31～59岁，其中男17例，女4例。

1.2 仪器、试剂 日立7020型全自动生化分析仪，奥斯邦CK-MB测定试剂(批号:090201;批号:091001);肌钙蛋白I/肌红蛋白/肌酸激酶同工梅CK-MB联合检测卡，北京九强生物技术有限公司产品(批号:P8092420;批号:P9051903)。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 AMI患者发病后6 h内采集静脉血及时分离血清，定性测定 CTnI、Mb、CK-MB。剩余血清分装置-20℃冰存，常规工作时间定量检测CK-MB。

1.3.2 定性测定CTnI、Mb、CK-MB 使用肌钙蛋白I/肌红蛋白/肌酸激酶同工梅CK-MB联合检测卡实验前，将试剂卡和样本放置室温;从锡薄纸包装的缺口处取出检测卡，放置到洁净的平面上，加3滴样本于样本孔中;加样后15 min内读取结果。结果读取:阴性结果:控制区(C)出现一条紫色或玫瑰红色带，15 min内试验区(T)不出现色带。阳性结果:控制区和试验区15 min内各出现一条紫色或玫瑰红色带，色带深浅与检测物浓度有关。无效结果:无论试验区有无色带，控制区没有出现色带［13］。

1.3.3 定量测定CK-MB 用日立7020型全自动生化分析仪、奥斯邦试剂检测。主要分析参数按照试剂说明书设置。CK-MB≥25IU/m l为阳性。

2 结果

2.1 肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)检测结果见表1。

2.2 心肌三联检测卡定性检测 41例AMA患者中CK-MB阳性9例，阴性32例，灵敏度21.95%，21例健康体检者的血清CK-MB阳性1例，阴性20例，特异度95.24%，结果见表2。

表1 CTnI、Mb和CK-MB检测结果(例，%)

表2 心肌三联检测上卡定性检测

诊断试验评价指标计算:

(1)灵敏度(SEN)=a/(a+c)=9/41=21.95%

(2)特异度(SPE)=d/(b+d)=20/21=95.24%

2.3 日立7020型全自动生化分析仪检测 41例AMA患者中CK-MB阳性11例，阴性30例，灵敏度26.83%，21例健康体检者的血清CK-MB阳性1例，阴性20例，特异度95.24%，结果见表3。

表3 日立7020型全自动生化分析仪检测结果

诊断试验评价指标计算:

(1)灵敏度(SEN)=a/(a+c)=11/41=26.83%

(2)特异度(SPE)=d/(b+d)=20/21=95.24%

2.4 两种方法检测CK-MB结果的比较，见表4。

表4 两种方法检测CK-MB结果的比较

心肌三联检测卡和日立7020型全自动生化分析仪检测AMA患者的CK-MB阳性率无差别(P＞0.05)。

3 讨论

肌钙蛋白I、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶联合检测卡的实验原理是一步免疫显色法，利用夹心法免疫系统结合分离层析技术进行检测。样本中的肌钙蛋白I、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶任何一个升高达到可检测到的水平时，可与一种被染料标记的特异性单克隆抗体结合，此复合物然后被实验区包被的特异性单克隆抗体捕获，在薄膜上形成一条可见的紫红色色带，颜色深浅与样本中分析物的浓度相关。任何情况质控区均出现一条彩色色带［13］。

肌钙蛋白I、肌红蛋白和肌酸激酶同工酶(CK-MB)是心肌的三种特异性蛋白，它们以及它们的复合物在发生心肌梗死后立即释放到血液中，以发生心肌梗死后大约6～8 h直到10～15 d均可检测到较高水平的标记物［13］。

肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)联合检测卡的优点是:可用于快速检测。其实验是一种简单、快速、易读取结果的方法。不需要仪器设备，此检测卡包被独特的抗体，灵敏度高［13］。肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)联合检测卡用于定性检测肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)，接收到标本后约30 min左右便可得到检测结果。其检测局限性是未能达到定量检测。目前，测定肌红蛋白、肌钙蛋白临床普遍采用的是适用于各类生化自动分析仪的胶乳增强透射比浊法;CK-MB的测定当前常规应用较多的是电永法和免疫抑制法［10］，需要有一定的仪器设备，有条件的实验室已经可以进行定量测定肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)。TRAGE，METER快速心肌梗死监测仪可在20 min左右得出结果，一次检测可同时测定肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CKMB)［7］。

我们用心肌三联合检测卡定性检测了41例AMI患者血清中的肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)，结果显示:CTnI阳性21例，阳性率为51.00%，Mb阳性36例，阳性率为87.80%，CK-MB阳性9例，阳性率为21.95%;敏感性以血清 Mb最高，CTnI次之，CK-MB 最低［8］，这可能原因是Mb是AMI的早期指标，敏感性较高，升高时间早，发病后1～2 h MB浓度迅速增加，早于CK-MB和肌钙蛋白，CK-MB出现于发病时间3～8 h，肌钙蛋白出现于发病时间4～8 h［12］;我们用心肌三联检测卡定性检测了21例健康体检者血清中的肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)，结果显示:Mb，CTnI，皆为阳性:0例，阳性率皆为0%，其可能原因是:健康体健者血清中Mb，CTnI的含量很低［9，13］，未达到阳性值水平，所以其检测结果为阴性，即阳性0例，阳性率0%。CK-MB阳性1例，阳性率4.76%;我们用日立7020型全自动生化分析仪测定了41例AMI患者血清中CK-MB值(≥25IU/ML为阳性)，结果显示:阳性11例，阳性率为26.83%。用三联检测卡检测41例AMI患者血清中CK-MB所得的阳性结果(21.95%)与用日立7020检测41例AMI患者血清中CK-MB所得的阳性结果(26.83%)，阳性率比较无差别(P＞0.05)。灵敏度基本相符，特异度相当。用日立7020型全自动生化分析仪测定21例健康体检者血清中的CK-MB值(大于等于25IU/ML为阳性)，结果显示:健康体检者阳性1例，阳性率为4.76%，对于用心肌三联检测卡检测和用日立7020型全自动生化分析仪检测健康体检者血清中的CK-MB中的1例阳性结果，其可能原因是:心肌是唯一含CK-MB较多的器官，但CK-MB并不对心肌完全特异，在骨骼肌中也少量存在，外科手术和骨骼肌疾病时常出现假阳性［11］。本研究由于条件有限只是对心肌三联检测卡定性所得的CK-MB结果与用日立7020型全自动生化分析仪所测得的CK-MB结果进行比较，未能对心肌三联检测卡定性所得的肌红蛋白(Mb)，肌钙蛋白I(CTnI)结果与定量检测所得的结果进行比较。我们从心肌三联检测卡说明书可以获得某些信息:心肌三联检测卡三项指标的灵敏度和临界值如下:CTnI:1ng/m l;CK-MB:5ng/ml;Mb:70ng/ml［13］。精密度实验:选取 3组不同患者群，使用三个不同批号产品进行双份实验。每个样本做10次平行实验。结果表明样本的双份检测100%相符，不同批号的检测结果100%的相符［13］。文献报道心肌损伤早期标志物Mb的判断值为100μg/L，CK-MB的判断值为6 μg/L，CTnI的判断值为 1.0 ～3.5 ug/L［12］。说明心肌三联检测卡有很高的敏感性。本研究所得结果AMI发病6 h内的Mb(87.0%)，CTnI(51.0%%)，CK-MB(21.95%)的敏感性与文献报道的诊断敏感性Mb(90.2%)，CTnI(52.9%)，CKMB(27.45%)［8］略低，其可能原因是:由于肌红蛋白，肌钙蛋白，肌酸激酶同工酶在心肌损伤后释放入血，在血中出现的浓度峰值时间不一样，AMI时心肌损伤标志物的时相变化，AMI诊断可应用2类标志物，一是早期标志物(Mb和CK-MB)，在AMI发生6 h内血中即升高;二是确诊标志物(CTnI)AMI发生后6～12 h血中升高［12］。在AMI时所有生化标志物的敏感度都与时间有关，对于胸痛发作4 h以内的患者，首先应测定Mb水平，3 h后得到的血液标本应同时评价Mb和CTnI，所有阳性结果都可确认为某一时间段内同时测定肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)，所有阳性结果都可确认AMI，所有阴性结果都 可排除心肌损伤，当结果不一致时，需进一步联合检查至胸痛发作后9 h，此时所有的生化标志物都达到最大的敏感度［10］。

从本研究中我们得出结论:肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)都是心肌损伤的敏感性指标，三者联合检测对早期诊断AMI有着较高的临床价值。而使用肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)联合检测卡检测实验是一种简单，快速，易读取结果的方法不需要仪器设备。肌钙蛋白I(CTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)联合检测卡对AMI的诊断具有较高价值。

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