青藤祛湿外敷散的长期毒性试验研究

吕邵娃，李永吉，孙 凌，郭玉岩，王 锐，田世超

(黑龙江中医药大学药学院，哈尔滨150040)

青藤祛湿外敷散是以盐酸青藤碱为主要成分，加适宜辅料，通过PVA薄膜及纸塑压封包装的一种新型外敷散剂.盐酸青藤碱具有抗炎、镇痛、免疫抑制、降压、抗心律失常等药理作用，用于治疗各种风湿关节疼痛等各种风湿病及抗心律失常.为了进一步考察该药的安全性，根据长期毒性试验要求［1］，并参考相关文献［2－4］，本文对其进行了家兔的长期毒性实验，现报道如下.

1 材料和方法

1.1 实验动物

50只大耳白家兔，(2.0±0.25)kg，雌雄各半，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供.

1.2 实验药物

青藤祛湿外敷散由黑龙江中医药大学药剂实验室自备.

1.3 实验方法

健康家兔分笼饲养，每笼1只饲养1周后，按性别随机分成5组，分别为1个赋形剂组和4个实验组，4个实验组:完整皮肤两个剂量(高、低)组和破损皮肤两个剂量(高、低)组，每组10只.制备完整皮肤:在给药前24 h将家兔背部脊柱两侧去毛，去毛面积约为150 cm2.去毛后24 h检查皮肤是否因去毛而受伤，选皮肤未受伤家兔进行试验.制备破损皮肤:按完整皮肤制备方法去毛、消毒皮肤后，用砂纸划破皮肤，使皮肤出现渗血为度.

实验组分别给予高剂量、低剂量青藤祛湿外敷散，对照组给予赋形剂.将供试品均匀涂于脱毛区，以医用灭菌纱布两层覆盖后再用胶带加以固定.每日用药1次.连续用药8周后，各组处死动物6只，剩余动物在停药后继续观察2周后处死，所有动物每日检查用药处皮肤变化，同时观察动物是否有全身中毒反应，包括精神状态、饮食变化、粪便性状、黏膜情况及运动情况，每周称体重1次.实验结束时解剖观察全身内脏的情况.取心、肺、肝、脾、肾、脑、肾上腺、胰腺、前列腺、睾丸(包括附睾)或卵巢(包括子宫)、用药部皮肤称重，计算脏器指数，并与对照组比较.

一般观察，体重每周称重1次.血液学、血液生化及病理组织学检查分别与给药后8周及停药2周后各测1次.

2 实验结果

2.1 一般情况

赋形剂组及各实验组在8周后和停药2周期间，无一例动物死亡，食量、大小便、行为活动、皮肤和黏膜、大小便与赋形剂组比较均无显著性差异(P＞0.05)，各组动物随着试验时间的延长，体重也逐周增加，增长速度接近，结果见表1.

表1 青藤祛湿外敷散对家兔体重增长的影响±S)

表1 青藤祛湿外敷散对家兔体重增长的影响±S)

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2.2 血液生化

长期外用青藤祛湿外敷散的家兔，分别测血糖、尿素氮、甘油三酯、碱性磷酸酶、肌酐、谷氨酰转酞酶、谷丙转氨酶、总胆红素、胆固醇、谷草转氨酶指标.与赋形剂组比较均无显著性差异(P＞0.05).结果见表2、3.

表2 青藤祛湿外敷散对家兔生化指标的影响S)(给药8周末)

表2 青藤祛湿外敷散对家兔生化指标的影响S)(给药8周末)

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表3 青藤祛湿外敷散对家兔生化指标的影响)(恢复2周)

表3 青藤祛湿外敷散对家兔生化指标的影响)(恢复2周)

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2.3 血液常规

长期外用青藤祛湿外敷散的家兔，分别测得血常规(白细胞计数、淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、凝血酶原时间、凝血酶时间等).与赋形剂组比较均无显著性差异(P＞0.05).结果见表4、5.

表4 青藤祛湿外敷散对家兔血常规指标的影响)(给药8周末)

表4 青藤祛湿外敷散对家兔血常规指标的影响)(给药8周末)

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表5 青藤祛湿外敷散对家兔血常规指标的影响)(恢复2周)

表5 青藤祛湿外敷散对家兔血常规指标的影响)(恢复2周)

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2.4 对家兔脏器系数的影响

各剂量组用药后肉眼观察的形态、位置、色泽、硬度等均未见药物引起的异常.各组脏器系数与赋形剂组比较均无显著性差异(P＞0.05).

2.5 对脏器组织的影响

组织病理学检查结果显示:长期外用青藤祛湿外敷散的家兔心、肺、肝、脾、肾、脑、肾上腺、胰腺、前列腺、睾丸(包括附睾)或卵巢(包括子宫)、用药部皮肤与赋形剂组相似，未见因药物引起得实质细胞变性、坏死、间质炎症等毒性病变，停药后也未见新出现的迟发性病变.

3 结语

本实验观察了青藤祛湿外敷散的长期毒性反应.结果表明，使用青藤祛湿外敷散后，各组动物一般体征良好，体重增长正常，血液学、血液生化指标、组织病理学检查结果与赋形剂组比较均无显著性差异.由此可知，青藤祛湿外敷散经皮使用对家兔无长期蓄积性的毒性作用，是一种可以安全使用的外用制剂.本实验结果和各项指标可为今后临床用药提供重要的依据.

［1］ 徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学［M］.北京:人民卫生出版社，2002:232－233.

［2］ 金可可，叶天申，蒋松鹤，等.类风关巴布剂毒理学研究［J］.中国中医药信息杂志，2004，l1(3):216－217.

［3］ 莫遗盛，王冬梅，黄 茜，等.伤必止对家兔的长期毒性实验研究［J］.时珍国医国药，2008，19(7):1712－1713.

［4］ 刘 悦，靳洪涛，李 偃，等.精苓消瘤胶囊对Beagle犬的长期毒性研究［J］.哈尔滨商业大学学报:自然科学版，2010，26 (2):129－135.