年龄和处理季节对山羊超数排卵效率影响因素的研究

刘长河 常仲乐 邱建华 （山东农业大学动物科技学院 泰安 271018）

赵中旺 （山东省汶上县粮食局）

超数排卵和胚胎移植技术是加速优良种畜繁育和胚胎工程技术所必不可缺的基础，但现有超排方法的获卵率和可用胚数还都不太稳定[1～3]。自2006年代以来，泰安郊区为了扩大辽宁绒山羊的纯繁速度，先后自辽宁引进绒山羊，以改善当地山羊产绒量，为提高纯种辽宁绒山羊的数量，对辽宁绒山羊实施了超数排卵和胚胎移植研究。

1 材料与方法

1.1 材料

用于同期发情的情酮栓由南京农业大学生产，促卵泡素(FSH)由中国科学院动物研究所生产，供体羊为纯种辽宁绒山羊共40余只，年龄5岁以下，产后60d以上。选择体型较大、繁殖正常、经产的当地山羊作为受体。

1.2 方法

1.2.1 供体超排处理 于发情周期任1天在供体山羊阴道内放置情酮栓。放置栓后第14d开始进行超数排卵处理：（1）促卵泡素6～7mg以4d递减量注射；注射2次/d，于第7次注射时取出情酮栓。（2）去除情酮栓后用结扎输精管的公羊试情，接受爬跨时肌注促黄体素并输精。间隔8～10h重复输精。

1.2.2 胚胎的采集、鉴定 在供体山羊发情后6～7d，利用手术法采集桑椹胚和囊胚。按Elsden等的分级标准分为A、B、C和D4个等级。只有A、B级胚胎被判定为可用胚。

1.2.3 受体羊的发情同步处理 受体山羊与供体组同时放入情酮栓。在供体去除情酮栓前0.5d去除受体情酮栓，去栓后，用试情公羊检查发情，并记录发情日期和时间，同组供体与受体同步发情的差异不超过24h。

1.2.4 胚胎移植 受体母羊局部麻醉，腹中线切口，暴露出卵巢和子宫，向子宫角前1/3移入胚胎。

1.2.5 数据处理 利用SPSS软件进行数据处理，统计各测定指标的平均数、标准差，用LSD法检验分析组间差异。

2 结果

2.1 不同年龄山羊超数排卵和胚胎移植效果

在秋季对43只年龄为1～4岁年龄的辽宁绒山羊采用国产FSH 6～7mg 4d递减处理。从表1可以看出，2～3岁山羊平均排卵数最高，显著高于<1岁山羊；2岁和3岁山羊可用胚率差异不显著，但显著高于<1岁山羊。2～3岁山羊胚胎经移植妊娠率最高，显著高于<1岁山羊和4岁山羊。辽宁绒山羊超数排卵和胚胎移植的最佳年龄应为2～3岁。

表1 不同年龄山羊超数排卵和胚胎移植效果

2.2 季节对超数排卵效果的影响

对45只2～3岁年龄山羊在春(3～5月)、秋(9～11月)和冬季(12～次年2月)用国产FSH 6～7mg 4d递减剂量处理。结果发现，秋季平均排卵数显著高于春季，可用胚率显著高于冬季。春季与冬季在平均排卵数和可用胚率上差异均不显著。胚胎经移植妊娠率冬季显著低于春、秋两季，春季与秋季间无显著差异。

表2 季节对超数排卵效果的影响

3 讨论与小结

研究发现，秋季平均排卵数显著高于春季，可用胚率显著高于冬季。春季与冬季在平均排卵数上差异不显著。胚胎经移植妊娠率冬季显著低于春、秋两季，春季与秋季间无显著差异。这说明，在山东地区冬季对山羊移植妊娠率有影响。因此，尽管经过多年的饲养驯化辽宁绒山羊似乎已经失去繁殖的季节性，但秋季仍然是辽宁绒山羊的发情盛季，这一时期卵巢对激素的反应能力、卵质量都优于其它季节。冬季胚胎经移植妊娠率低可能与在检胚及胚胎运输过程中低温打击对胚胎造成损伤有关[4～5]。

对于优秀供体，人们总是期望尽早实施超排，获得大量胚胎进行移植[6]。笔者的试验结果还表明，辽宁绒山羊在1岁前已具备了对FSH反应的能力，超排可以获得一定数量的可用胚，但平均排卵数、可用胚率和妊娠率均明显低于其它年龄山羊。因此，辽宁绒山羊进行超排和胚胎移植的最佳年龄为2～3岁。

[1] Loi P, Ptak G.Embryo transfer and related technologies in sheepreproduction. Reprod Nutr Dev 1998; 38:615–628.

[2] Cognie Y. State of the art in sheep-goat embryo transfer.Theriogenology 1999; 51:105–116.

[3] Ptak G, Loi P.Offspring from onemonth-old lambs: studies on the developmental capability of prepubertal oocytes. Biol Reprod 1999;61:1568–1574.

[4] Ptak G, Dattena M. Ovum pick up in sheep: present situation and future perspectives. 14th International Congress on Animal Reproduction;Stockholm; July 2–6, 2000; p. 267.

[5]Downing JA, Joss J. Ovulation rate and the concentrations of gonadotrophic and metabolic hormones in ewes fed lupin grain. J Reprod Fertil 1995;103:137–145.

[6]王建国，张锁链等，山羊手术法胚胎移植对供受体母羊重复使用的影响[J]，内蒙古大学学报(自然科学版),1997,28(3).414-418.