远志对DPN大鼠血糖和尾部SNCV的影响*

马洪伟，和亚强，钟美蓉，付文亮，陈志宏，薛景凤

(承德医学院，河北承德 067000）

糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN）是糖尿病(diabetic mellitus,DM）最常见的慢性并发症之一，发病率高达47%-91%，主要临床特征为四肢远端感觉、运动障碍，且多数感觉神经先于运动神经受损。目前针对DPN的治疗，临床上尚未找到确切有效的药物。现代医学研究表明，中药远志富含皂苷类、酮类、寡糖酯类等化合物，具有神经保护作用，且可调节血糖、血脂代谢[1-3]。本研究观察了远志对DPN大鼠尾部感觉神经传导速度(sense nerv conduction velocity,SNCV）及血糖的影响。

1 材料与方法

1.1 实验仪器 RM6240C型多道生理信号处理系统(成都仪器制造厂），MD-100型自动生化分析仪(USA），京立LD4-2A离心机(北京）。

1.2 药物与试剂 链脲佐菌素(STZ)，美国Sigma公司，临用时用PH4.4的枸橼酸钠-枸橼酸缓冲液配成2%的溶液。血糖检测试剂盒，保定长城临床试剂有限公司，批号:20090511。中药远志，安国市康盛华药材有限公司。远志水煎液的制备:称取中药远志100g，加入500ml水，浸泡12h，煎煮1h，过滤;重复煎煮5次，合并滤液，浓缩为1ml药液含1g生药。

1.3 实验动物分组及处理 清洁级雄性Wistar大鼠48只，体重(200±10）g，由河北医科大学实验动物中心提供(合格证号:905075）。将大鼠随机分为4组:正常对照组、DPN模型组、远志治疗组和远志预防组，每组12只。DPN模型组、远志治疗组和远志预防组大鼠均采用2% STZ(25mg/kg，3d）连续腹腔注射的方法建立DM模型，以空腹血糖≥16.7mol/L作为DM成模标准。待成功建立DM模型后，远志预防组大鼠给予远志(2.7g生药/kg/d）灌胃6w;DPN模型组和远志治疗组大鼠继续饲养6w，以尾部SNCV＜30m/s为DPN成模标准，待DPN模型成功建立后，DPN组大鼠不做任何处理，远志治疗组大鼠给予远志(2.7g生药/kg/d）灌胃6w。

1.4 检测血糖 各组大鼠禁食12h以上，4%水合氯醛腹腔注射麻醉，经内眦于眶后静脉丛采血，3000r/min离心20min，收集血清，应用MD-100型半自动生化分析仪检测血糖。

1.5 检测大鼠尾部SNCV 4%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，俯卧位固定，保持室内温度25℃，分别用温水、75%乙醇清洁大鼠尾部皮肤。将一对刺激电极(负极位于正极近心侧）插入大鼠尾部远端皮下，两电极间隔0.5cm，依次将记录电极Ⅰ和记录电极Ⅱ插入大鼠尾部近端皮下，其中记录电极Ⅰ在刺激电极负极近心侧3cm处，记录电极Ⅱ在记录电极Ⅰ近心侧4cm处，再将参考电极Ⅰ、Ⅱ分别插入距记录电极Ⅰ、Ⅱ近心侧0.5cm处皮下，最后将接地电极插入刺激电极负极与记录电极Ⅰ之间。采用RM6240C型多道生理信号处理系统测定各组大鼠尾部SNCV，重复给予刺激3次，每次间隔30s，取平均值。尾部SNCV(m/s）=两记录电极之间的距离/动作电位潜伏期时间差。

1.6 统计处理 采用SPSS 11.5统计软件进行处理，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。

2 结果

2.1 血糖检测结果 与正常对照组比较，DPN模型组大鼠血糖明显升高(P＜0.01）;远志治疗组、远志预防组大鼠血糖均明显低于DPN模型组(P＜0.01）。见附表。

2.2 大鼠尾部SNCV检测结果 与正常对照组比较，DPN模型组大鼠尾部SNCV明显降低(P＜0.01）;远志治疗组、远志预防组大鼠尾部SNCV明显高于DPN模型组(P＜0.01）。见附表。

附表 远志对DPN大鼠血糖和尾部SNCV的影响(±s）

附表 远志对DPN大鼠血糖和尾部SNCV的影响(±s）

与DPN模型组比较:*P＜0.01

组别 n 血糖(mmol/L） 尾部SNCV(m/s）正常对照组 12 7.53±1.31* 36.57±2.08*DPN模型组 12 25.4±4.22 27.45±1.16远志预防组 12 17.2±4.56* 33.20±1.09*远志治疗组 12 15.8±5.60* 33.01±1.98*

3 讨论

3.1 DPN动物模型的建立及发病机制 DPN是包括多种类型神经病变的一个统称，可累及感觉神经、运动神经和自主神经。在临床症状出现前，电生理检查即可发现感觉和运动神经传导速度减慢，特别是SNCV，可提示亚临床期的周围神经病变，SNCV是早期诊断DPN的敏感指标[4]。但关于DPN动物模型的建立，国内文献报道较少。本研究在成功建立DM模型的基础上，以SNCV＜30m/s为标准，成功建立了DPN动物模型。

DPN的发病机制说法众多，目前尚无明确定论。大量研究表明，DPN与胰岛素分泌不足及糖代谢紊乱密切相关。长期高血糖状态可激活醛糖还原酶活性，使葡萄糖的山梨醇代谢通路紊乱，致使神经细胞内较多的葡萄糖还原成山梨醇，山梨醇可在山梨醇脱氢酶作用下转化为果糖，而神经细胞内无果糖激酶，因此引起神经细胞内山梨醇、果糖大量积聚，渗透压增高，最终导致神经纤维节段性脱髓鞘，轴索变性。此外，高血糖也可竞争性地抑制神经细胞摄取肌醇，肌醇合成减少。神经细胞内肌醇耗竭可使Na+-K+-ATP酶活性降低，神经轴突间质中Na+蓄积，导致神经电冲动传导阻滞[5]。非酶蛋白糖基化也是导致DPN发病的重要原因之一，高血糖状态可显著增加神经髓鞘蛋白和微管蛋白的糖基化，髓鞘的完整性和微管系统的结构功能受到破坏，轴突的逆向转运出现障碍，干扰神经细胞蛋白质的合成及转运，导致神经细胞结构和功能的变化，产生神经传导功能障碍[6]。

3.2 远志的作用 远志(Polygala)为远志科多年生草本植物，以干燥根入药，为我国常用的中草药，始载于《神农本草经》，全草能益智强志，故称远志。远志味苦、辛、温，归心、肾、肺经，具有安神益智、祛痰、消肿功效，用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸、神志恍惚、咳痰不爽、疮疡肿毒、乳房肿痛。以往的研究表明，中药远志具有益智、镇静催眠、抗抑郁、抗氧化衰老、抑菌抗炎、抗诱变、镇咳祛痰、调节血糖和血脂等多方面的生物活性[2-4]。尤其是远志对神经系统具有明显的保护作用。Naito等[2]报道，远志提取物对β-淀粉样肽诱导体外培养的阿尔茨海默病神经元退行性变性具有保护作用，可使萎缩的神经元轴突再生和抑制神经元损害。

本研究发现，远志治疗可明显降低DPN大鼠血糖和提高尾部SNCV，远志预防可明显抑制DPN大鼠血糖升高和尾部SNCV降低。表明远志可延缓高血糖对周围神经系统的损伤，但远志对DPN大鼠周围神经系统的保护作用及机制尚待进一步的深入研究。

[1]宋成芝，吴章康，华燕，等.远志属药用植物化学成和生物活性研究进展[J].中国民族民间医药，2008，(3）:28-29.

[2]Naito R,Tohda C.Characterization of anti-neurodegenerative effects of polygala tenuifolia in Aβ(25-35)-treated cortica neurons[J].Biol Pharm Bull,2006,29(9):1892-1896.

[3]Kako M,Miura T,Nishiyama Y,et al. Hypoglycemic effec of the rhizomes of Polygala senega in normal and diabetic mice and its main component,the triterpenoid glycoside senegin-II[J].Planta Med,1996,62(5):440-443.

[4]王芳，范玉兰，赵文霞，等.糖尿病周围神经电生理改变的临床研究[J].中国实用医药，2008，3(9）:63-64.

[5]Sima AA,Sugimoto K.Experimental diabetic neuropathy:an update [J].Diabetologia, 1999,42(7):773-788.

[6]蔡洁，董继宏，汪昕.糖尿病周围神经病变发病机制的研究进展[J].中国临床医学，2007，14(6）:302-305.