络通口服液的制备及质量控制

姜 卓

实验研究

络通口服液的制备及质量控制

姜 卓

目的 探讨络通口服液的制备及质量控制方法。方法 用薄层色谱，鉴别方中的当归、黄芪、红花；采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充亮剂；甲醇-水（75∶25）为流动相，检测波长为270nm测定了丹参酮ⅡA的含量。结果 丹参酮ⅡA在（0.45～2.7μg）范围内线性关系良好，方法平均回收率为99.95%，RSD为0.56%。结论 定性鉴别斑点明显，定量测定方法快速、准确，适用于该制剂的质量控制。

口服液；制备与质控；HPLC

络通口服液是永州职业技术学院附属医院中医科的协定处方，运用于临床十余年，疗效显著，本制剂驱风胜湿，温经通络，活血化瘀，强筋壮骨，用于风湿性关节炎，颈椎、腰椎骨质增生，坐骨神经痛，肢体麻木等症。为控制产品质量，笔者用薄层色谱法对方中药物进行定性鉴别，用高效液相色谱法进行含量测定，现将结果报道如下。

1 仪器与试药

络通口服液由本院制剂室生产，所用药材购于永州市药材公司，经永州市药检所鉴定，符合《中国药典》一部2010年版规定，各阴性样品系除处方中的某些相应药材后，按络通口服液工艺制备而成，对照品由中国生物制品鉴定所提供；硅胶G由青岛海洋化工厂生产，其它试剂均为分析纯。美国HP109M液相色谱仪；陈列检测仪；自动进样器。

2 处方与制备

2.1 处方

当归150g、桂枝100g、红花65g、五加皮150g、杜仲150g、威灵仙150g、秦芄150g、牛夕150g、丹参200g、黄芪150g，制成1000mL。

2.2 制备

以上10味药照浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，当归、桂枝、杜仲、红花分别用原生药数7倍，杜仲用原生药数6倍的70%乙醇浸渍48h分别进行渗漉。其中当归，红花分别收集初滤液180和90mL，另器保存，继续渗漉收集全漉液。五加皮、威灵仙、秦芄、牛夕、丹参、黄芪及上述药渣煎煮2次，每次2h合并煎液滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.20，加乙醇使含醇量为50%，搅匀，静置滤过，滤液与续滤液合并，回收乙醇浓缩至适量，加上述当归、红花初滤液及草糖浆294mL，再用乙酸调配便成1000mL，搅匀，静置滤过、即得。

3 质量控制

3.1 当归的鉴别

取本品20mL，用乙醇萃取2次，每次20mL，合并萃取液，自然挥干，用1.0mL甲醇溶解，作为样品供试液。另取缺当归阴性样品液20mL经同法制成阴性对照液。当归阳性对照液，为取当归对照药材0.5g，加20mL乙醚冷浸1h，时时振摇，过滤，滤液自然挥干，再加1.0mL甲醇溶解，作为对照品溶液，吸取样品供试液，阴性对照液各5μL，对照液1μL，分别点于同一硅胶G-薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂展开取出，晾干，置紫外灯365nm下检视，供试液色谱中与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，见图1。

3.2 黄芪的薄层鉴别

3.2.1 取本品10mL，置分液漏斗中，加乙醚15mL，振摇10min，分取醚层，滤过，挥干乙醚后，加10%香草醛硫酸溶液，显紫红色。

3.2.2 取本品10mL，加甲醇10 mL加热回流1h，滤过，滤液加入中性氧化铝柱（100～120目，5g，内径为10～15mm）上，用40%甲醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲酸制成每1mL含1mg的溶液，对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，各2分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下层溶液为展开剂，展开、取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；紫外光灯（365nm）下显相同橙黄色的荧光斑点，见图2。

3.3 红花的薄层鉴别

取本品10mL，加80%的丙酮5mL密塞，振摇15min，静置，吸取上清液，作为供试品溶液。另取红花对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μL，点于同一硅胶H薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-水-甲醇（7∶2∶3∶0.4）为展开剂，展开、取出、晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图3。

图1 当归薄层鉴别

图2 黄芪薄层鉴别

图3 红花薄层鉴别

3.5 含量测定

3.5.1 色谱条件与系统适应性试验

固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水（25∶75）为流动相；检测波长：270nm；理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。

3.5.2 对照品溶液制备

精密称取丹参酮ⅡA对照品适量置棕色瓶中加甲醇溶解制成每1mL含丹参酮ⅡA16μg的溶液，即得（图4）。

图4 3种溶液对照色谱图

3.5.3 供试品溶液制备

精密量取不同批号的络通口服液10mL（5份），置分液漏斗中，用乙醚萃取3次（20、15、15mL）合并萃取液，挥去乙醚，残渣用甲醇溶解并定溶于2mL量瓶中，摇匀、备用。

3.5.4 空白对照实验

取不含丹参的供试品溶液，按供试液制备法制备作为空白对照液，分别吸取丹参酮ⅡA对照液，供试品溶液和空白对照液4μL按上品溶液述色谱条件分别进样测定，结果表明其它成份对测定无干扰。

3.5.5 线性关系考察

精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5、6μL于上述色谱条件下测定峰面积，以丹参酮ⅡA进样量为横生标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。其回归方程为：Y＝2910.602X－47.865，r=0.9996。结果表明原儿茶醛在0.45～2.7μg/mL的范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。

3.5.6 加样回收率实验

精密移取络通口服液10mL共5份，置分液漏斗中，加入对丹参酮ⅡA照品0.465mg，用乙醚萃取3次（20、15、15mL）合并萃取液，挥去乙醚残渣用甲酸溶解并定溶至2mL，摇匀、备用，将上述处理好的样品经微孔滤膜过滤后测定，结果见下表1。

表1 加样回收实验表

精密吸取供试液5～10μL，对照品溶液10μL，分别注入液相色谱仪，记录峰面积结果3批样品（批号分别为100310、100421、100512）中丹参酮ⅡA的含量分别为0.59、0.58、0.58mg/支。

4 讨 论

永州职业技术学院附属医院根据经验方制成的络通口服液，临床观察疗效确切，易于携带贮藏。为临床提供了疗效肯定，服用方便，且价格低廉的成药。

从当归、黄芪、红花的薄层鉴别图看，斑点明显，专属性强。络通口服液由多种中药材制备而成，丹参是主要成份之一，其生理活性成份是丹参酮及丹酚酸B等，本人用高效液相色谱法对方中的丹参作了定量分析。该测定方法简便、稳定、准确，排除了方中其他主药的干扰，可以作为进一步对制剂提取和质量检测标准的研究方法[1,2]。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:70.

[2] 王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究[M].北京:中国医药科技出版社,1994:213-245.

R282.710.3

B

1671-8194（2010）24-0045-02

湖南永州职业技术学院附属医院（425006）