王正蓉,程树强,夏曙华,彭晓枫,王 琴
(1.贵阳医学院 检验系临床检验学教研室,贵州贵阳550004;2.贵阳医学院医学检验系,贵州贵阳550004)
近年来UF-100全自动尿沉渣分析仪在临床上得到了广泛应用,它对尿沉渣直接荧光染色后利用流式细胞和电阻抗原理进行检测[1],具有精密度好、参数多、简便快速等特点[2]。为了证实其可靠性,本文选择住院和门诊病人的尿液RBC和WBC阳性标本,从精密度,线性,携带污染率和可比性等方面对其进行评价,探讨其临床应用价值。
1.1 标本来源 来自贵阳医学院附院门诊和住院部患者的新鲜尿液。
1.2 仪器与试剂 日本Sysmex公司生产的UF-100全自动尿沉渣分析仪及其配套试剂(染液色;R8011;稀释液:R8006;鞘液 G8084)和质控品(批号A8008)、OLYMPUS显微镜、牛鲍氏细胞计数板。
1.3 方法
1.3.1 UF-100法 仪器正常开机后进行日质控,新鲜尿液标本取10mL按仪器操作要求进行测定。
1.3.2 计数板法将尿液充分混匀并充入牛鲍氏细胞计数板内,静置2min后,计数10个大格内的细胞数,按下列公式计算出每微升尿液RBC、WBC数。RBC、WBC数/μl=10个大格内细胞数
1.3.3 精密度 选取在UF-100尿液分析仪上测定的新鲜尿液标本(RBC,WBC>100/μl),再测定 10 次,计算均值,标准差,变异系数。
1.3.4 线性范围 选取在UF-100尿液分析仪上测定的新鲜尿液标本(RBC=1448/μl,WBC=346.6/μl),用正常尿液离心后的上清进行 1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64倍比稀释,稀释标本重复测定3次取均值。
1.3.5 携带污染率 连续3次高值测定(H1,H2,H3)后,立即作连续3次低值测定(L1,L2,L3),按公式(L1-L3)/(H3-L3)×100%计算。
1.3.6 可比性 选择 2~100/μl、100~500/μl、>500/μl三个浓度范围的RBC、WBC标本各35例,采用双盲法分别用牛鲍氏细胞计数板和UF-100法进行计数,细胞计数由临检科具有丰富临床检验经验的两位检验人员采用双盲进行计数,结果取均值。
1.4 统计方法 使用SPSS11.5软件进行统计,UF-100法与牛鲍氏细胞计数板法的结果采用配对t检验。
2.1 精密度检测 依照Sysmex仪器说明书要求RBC 、WBC 精密度 CV(%)应在(±10.0%)范围 ,从检测结果可见RBC、WBC精密度CV在此范围内,符合要求;检测结果见表1。
表1 UF-100 RBC和WBC精密度测定结果(n=10)
2.2 线性检测 用RBC、WBC的理论值和UF-100的测定值进行线性回归相关分析,可知相关系数均大于 0.99;结果见表 2、图 1、图 2。
表2 UF-100 RBC、WBC线性回归统计
2.3 携带污染率 UF-100检测尿RBC,WBC的携带污染率分别为0.14%和0.17%,在实验室可接受范围内。结果见表3。
表3 Sysmex UF-100携带污染率测试结果
2.4 可比性 选择 2-100/μl、100-500/μl、>500/μl三个浓度范围的RBC、WBC标本各35例,采用双盲法分别用牛鲍氏细胞计数板 和UF-100法进行计数,结果RBC在<500/μl浓度范围内无显著性差异(P>0.05),>500/μl的浓度范围有显著性差异(P<0.05);WBC在2-100/μl浓度范围内无显著性差异(P>0.05),>100/μl的浓度范围有显著性差异(P<0.05)。结果见表4
表4 UF-100法和牛鲍氏细胞计数板测定RBC、WBC可比性分析(t检验)
Sysmex UF-100全自动尿沉渣分析仪是目前临床应用于尿液分析的较先进仪器之一,其工作原理是采用流式细胞和电阻抗原理,利用两种染料菲啶和羧花青对细胞染色后,通过细胞的荧光强度、前向散射光强度及电阻抗的大小来区别尿中有形成分[3]。
在本文中我们对UF-100检测RBC和WBC的精密度,线性,携带污染率进行测定,从结果来看RBC和WBC精密度分别为3.8%和5.6%、线性相关系数 (r)分别为0.997和0.999、携带污染率分别为0.14%和0.17%,均在实验室可接受的标准内。我们还选择 2-100/μl、100-500/μl、>500/μl三个浓度范围的RBC、WBC标本各35例与牛鲍氏细胞计数板法进行比较,结果表明RBC在<500/μl浓度范围内无显著性差异(P>0.05),而>500/μl的浓度范围有显著性差异(P<0.05),分析其原因:我们在实验中发现在RBC>500/μl这一组,有4例尿液标本有大量草酸钙结晶,1例尿液标本有大量真菌孢子,这5例标本可能均被UF100误认为RBC,从而导致两者有显著性差异。这与罗燕飞[4]等报道的结晶和霉菌能起RBC假阳性结果相一致。实验结果还表明WBC在2-100/μl浓度范围内无显著性差异(P>0.05),而 >100/μl的浓度范围有显著性差异(P<0.05)。在进行人工计数时,我们发100-500/μl和>500μl的标本中有一部分有脓球,可能正是由于脓球的存在一方面导致我们的计数误差,另一方面可能是由于细胞团的体积较大被UF-100误认为其他有形成分,从而导致两者有显著性差异.
总体来说UF-100检测尿液RBC和WBC,具有精密度高,线性好,携带污染率低,自动化程度高,易开展质量控制,并能提供较多参数且在低值范围内准确性较好等优点,但由于结晶、霉菌、粘液丝、细菌等其他有形成分的影响而易出现假阳性[5,6],因而还不能完全代替人工镜检。因此我们可结合干化学和人工镜检进行联合过筛,来提高工作效率和检验质量。
[1]许文荣.临床检基础验学[M].北京:高等教育出版社,2006.155-156.
[2]张家红,郭丽洁.UF-100型全自动尿沉渣分析仪临床应用价值分析[J].实用医技杂志,2004,11(5):564-566.
[3]吴教仁,林敏.UF-100全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞的应用[J].预防医学论坛,2005,11(4):421-422,426.
[4]罗燕飞,龚彩平.UF-100全自动尿沉渣分析仪对红细胞、白细胞检测的影响因素分析[J].实用医学杂志,2007,23(15):2429-2430.
[5]崔海霞.UF-100全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞假阳性结果分析[J].延边大学医学学报,2008,31(3):193-194.
[6]Li Peng.such as UF-100 fully automated urine analyzer flow of influencing factors[J].Journal of modern laboratory medicine,2007,(222):35-36.