滋肾宁神胶囊中芍药苷在制剂工艺中的热稳定性考察

陈剑平，林荣锋，张惜强，何耀慧，黄晓其，林吉，施旭光，苏子仁*

(1.广州中医药大学，广东广州 510006;2.广东宏兴集团股份有限公司，广东潮州 521011)

滋肾宁神胶囊中芍药苷在制剂工艺中的热稳定性考察

陈剑平1，林荣锋1，张惜强2，何耀慧1，黄晓其1，林吉1，施旭光1，苏子仁1*

(1.广州中医药大学，广东广州 510006;2.广东宏兴集团股份有限公司，广东潮州 521011)

滋肾宁神胶囊;芍药苷;热稳定性;热降解动力学;HPLC

目的:考察不同工艺因素对滋肾宁神胶囊中芍药苷含量的影响，初步探讨芍药苷热降解动力学，进而优化工艺。方法:采用高效液相色谱法测定不同工艺因素制备的滋肾宁神胶囊中间体中芍药苷的含量。结果:滋肾宁神胶囊制剂工艺过程中加热温度及时间是影响芍药苷含量的主要因素;芍药苷在复方水提液中热降解反应符合一级反应方程，随温度的升高热降解速率常数K显著增大。结论:滋肾宁神胶囊制剂工艺过程应避免高温及长时间受热;采用减压浓缩及真空干燥可降低芍药苷降解速率，明显减少芍药苷损失。

滋肾宁神胶囊是由炒白芍、制何首乌、熟地黄、五指毛桃等十六味药制成的胶囊剂，具有滋补肝肾、宁心安神的功效。用于治疗肝肾亏损、头晕耳鸣、失眠多梦、怔忡健忘、腰酸遗泄、神经衰弱等症。滋肾宁神胶囊是由国家卫生部药品标准收载的中药保护品种滋肾宁神丸改进而成［1］。方中炒白芍具有养血和阴、补肝肾之功效，笔者在滋肾宁神胶囊的工艺研究中发现，其指标成分芍药苷化学性质较不稳定，受工艺因素影响较大。本文从提取、浓缩、干燥工艺及其参数等方面入手，考察了不同制剂工艺因素对芍药苷含量的影响。

1 仪器与试药

DIONEX SUMMIT P680高效液相色谱仪(美国戴安公司);试验室专用超纯水机(重庆利迪现代水技术设备有限公司)，舒美KQ5200DA型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，40 KHz，200 W)，HH-4数显恒温水浴锅(上海悦丰仪器仪表有限公司)，DZF-6051型真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，FWG型微波干燥箱(西安市亚宝制药机械厂)。

芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110736-200629)。

实验所用药材均由广东宏兴集团股份有限公司宏兴制药厂提供;乙腈为色谱纯试剂(Merck公司)，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。

SPSS/PC V10.0数据统计分析软件(用于数据统计及回归方程计算)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相乙腈-0.1%磷酸(14∶86);检测波长230 nm;流速1.0 mL/min;柱温30℃。

2.2 对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含60 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备分别取各样品(约相当于炒白芍药材0.1 g)，精密量取或精密称定，置具塞锥形瓶中，加50%乙醇50 mL，称定重量，超声提取30 min，取出，放冷，补足减失重量，摇匀，滤过，即得。

2.4 样品测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

3 制剂工艺过程中芍药苷含量的影响因素考察

滋肾宁神胶囊初定的工艺为:称取处方中除制何首乌外各药材，加8倍量溶媒煎煮两次，每次1.5 h，滤过，滤液浓缩至相对密度1.20(55℃)的浸膏，将制何首乌粉碎成细粉，与上述浸膏拌匀，干燥，湿法制粒，装胶囊，即得。

3.1 提取溶媒考察称取3倍处方量的药材(内含炒白芍18 g)2份，分别采用水和70%乙醇两种溶媒按以上初定工艺进行提取，分别得水提液和醇提液，精密量取25 mL(约含炒白芍0.177 g)浓缩至1 mL，按2项下方法测定各提取液中芍药苷的含量。结果见表1。

结果显示，水和70%乙醇提取效果相当，提取率均达85%以上，从节约成本、生产和用药安全等方面考虑，选用水作为提取溶媒较佳。

3.2 浓缩工艺因素考察取滋肾宁神方水提液24 200 mL(内含炒白芍90 g)，平均分成4份，每2份为一组，共两组，分别采用常压100℃和减压(80℃，－0.09 MPa)方式浓缩至体积为60 mL的稠膏，精密量取0.5 mL(约含炒白芍0.187 g)，按2项下方法测定稠膏中芍药苷的含量。结果见表2。

表1 不同提取溶媒对芍药苷含量的影响(n=2)

表2 不同浓缩工艺对芍药苷含量的影响(n=2)

结果表明，减压浓缩方法明显优于常压浓缩方法;常压浓缩温度高，芍药苷损失大，而减压浓缩温度明显低于常压浓缩，且芍药苷含量显著提高。温度的提高可显著降低样品中芍药苷的转移率。提示在浓缩过程中，温度是影响芍药苷含量的主要因素之一，采用减压浓缩方法能显著提高芍药苷含量。

3.3 干燥工艺因素考察取滋肾宁神方浓缩液3 000 mL(内含炒白芍300 g)，平均分成6份，每2份为一组，共三组，分别置恒压干燥箱、微波干燥箱和真空干燥箱内，干燥得干膏，取约0.5 g(约含炒白芍0.165 g)，精密称定，按2项下方法测定干膏中芍药苷的含量，结果见表3。

表3 不同干燥方法中干膏的含水量及芍药苷含量(n=2)

结果表明，真空干燥明显优于其它两种干燥方法。在干燥过程中，微波干燥法与常压干燥法相比，干燥温度一样但效率不同。微波干燥可明显减少干燥时间，提高芍药苷含量。提示受热时间是影响样品中芍药苷含量的主要因素之一。而真空干燥法与微波干燥法相比，干燥温度明显降低，且干燥时间较少，芍药含量显著提高。提示温度和受热时间均是影响样品中芍药苷含量的主要因素之一。

4 受热温度及其时间考察

取滋肾宁神方水提液32 000 mL(内含炒白芍120 g)，平均分成8份，每2份为一组，共四组，密封后，分别置于65℃、85℃、100℃恒温水浴锅及120℃油浴4个温度值下进行考察，并在相应时间点精密量取25 mL(约含炒白芍0.1 g)，测定，得线性回归方程，并绘制热降解动力学曲线［2］，见表4。

表4 各温度下水提液热降解动力学(n=2)

结果表明，芍药苷在复方水提液中降解反应符合一级反应方程，随着温度的提高，芍药苷的降解速率常数K显著增大。而在相同温度条件下，随着加热时间的增加，芍药苷的含量不断降低。提示温度和受热时间是影响芍药苷含量的主要因素。因此，在工艺过程中应该尽可能降低加热温度，并缩短加热时间。采用减压浓缩和真空干燥工艺，可明显提高芍药苷含量。

5 讨论

已有的研究工作中，笔者所在实验室建立了制剂中芍药苷含量测定方法［3］，该法稳定可靠，重复性强;并已对白芍药材水提液在不同加热温度及时间下芍药苷含量变化情况进行考察［4］。而关于复方水提液在此方面的研究目前文献尚未见报道;本文实验结果表明单味白芍药材水提液与本复方水提液二者在不同加热温度及时间下芍药苷含量变化情况相当，提示高温及长时间受热是引起芍药苷含量下降的主要因素，而提取溶媒对芍药苷含量影响不大;芍药苷在碱性条件下不稳定［5］，本复方中水提液显弱酸性而白芍药材水提液呈中性，均对芍药苷含量影响不大，提示弱酸性或中性条件下芍药苷相对稳定。

因此，在制剂工艺过程中主要考虑温度及加热时间的影响，避免高温及长时间受热。浓缩工艺宜采用减压浓缩，且须进行单次浓缩工序放膏，不宜多次加料一次放膏，此法可使浓缩过程中温度明显降低和受热时间明显减少;干燥工艺中采用真空干燥可明显降低干燥温度。为减少芍药苷的受热时间，亦可将稠膏于其他生药粉拌匀后再行干燥。

此外，笔者在提取过程中发现，经炒制的白芍药材其芍药苷提取得率明显高于未经炒制的白芍药材，提示以炒白芍组方可提高本制剂中芍药苷含量。笔者推测炒制可使白芍中芍药苷的溶出效率增大，其原因有待进一步研究。

［1］中华人民共和国卫生部药典委员会.《中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂第十八册)》［S］.北京:人民卫生出版社，1992:339.

［2］张兆旺.中药药剂学［M］.北京:中国中医药出版社，2003(1): 523-524.

［3］林荣锋，何耀慧，黄晓其，等.RP-HPLC法测定消渴通络胶囊中芍药苷的含量［J］.中药新药与临床药理，2009，20(1):60-62.

［4］曾宝，黄晓其，易智彪，等.芍药苷在生产工艺过程中的含量变化和影响因素研究［J］.中国中药杂志，2007，32(14):1472-1474.

［5］姚仲青，朱虹，姚海峰.温度及pH值对赤芍总苷稳定性的影响［J］.时珍国医国药，2006，17(7):1214-1215.

R944

A

1001-1528(2010)05-0767-03

2009-02-07

广东省科技计划项目(2007B031408006)

陈剑平(1984－)，男，硕士研究生，主要从事中药研究。E-mail:lycjp@126.com

*通讯作者:苏子仁(1964－)，男，教授，主要从事中药研究。E-mail:suziren@gzhtcm.edu.cn