应用HPLC法测定苯苄乙草胺混配除草剂中的有效成分

2010-09-04 03:00金晨钟王义成刘桂英陈跃进王朝辉曾永贤屈双婷

湖南农业科学 2010年23期

金晨钟，王义成，刘桂英，陈跃进，王朝辉，曾永贤，谢晶，屈双婷

（湖南人文科技学院，湖南娄底 417000）

40%苯苄乙草胺WP由苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和乙草胺3种原药按科学配比加工而成，是一种新型复配稻田除草剂，并能同时适用于我国北至东北三省、南到海南省等各种生态条件的水稻抛秧田、移栽田除草，可有效防除水田禾本科、阔叶类及莎草科杂草,综合防效达95%左右，对作物则很安全[1－2]。该除草剂配比和应用范围均为国内首创,其分析方法也少见报道。笔者采用外标法，在同一色谱条件下完成苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和乙草胺3个有效成分的含量测定,并对其线性关系、精密度、添加回收率试验进行测定，获得了比较满意的结果。

1 供试材料

1.1 试剂

所用试剂为乙腈和甲醇（色谱纯）、二次蒸馏水、冰醋酸（AR）等。苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和乙草胺标准品的含量大于98%。

1.2 仪器

所用仪器为LC-10APlus液相色谱仪（具可调波长紫外分光检测器），带色谱工作站。

1.3 色谱操作条件

色谱柱，C18（5μm），250 mm×4.6 mm（id）不锈钢柱；流动相，甲醇∶水=70∶30（V/V，下同）；水用冰醋酸调 pH=3；检测波长，230 nm；流速，1.0 mL/min；进样体积，20 μL；柱温30℃。

在此操作条件下，典型色谱图如图1。

1.4 测定步骤

图1 典型色谱图

1.4.1 标准溶液的配制分别称取苄嘧磺隆、乙草胺、苯噻酰草胺标样各约50 mg（精确至0.1 mg）于3个100 mL容量瓶中，用乙腈溶解，定容。用移液管准确移入上述苄嘧磺隆、乙草胺标准溶液各1 mL和苯噻酰草胺标准溶液10 mL于100 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀后，将混合标准溶液用0.45μm滤膜过滤备用。

1.4.2 试样溶液配制称取混匀后的试样200 mg（精确至0.1 mg）于100 mL容量瓶中，用少量乙腈溶解，并用流动相稀释至刻度，摇匀离心后用0.45 μm滤膜过滤后备用。

1.4.3 测定在上述色谱条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标准溶液，待相邻两针响应值变化小于1.0%，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样检测，用两次重复所得面积计算结果。

1.5 计算方法

试样中苯噻酰草胺(苄嘧磺隆或乙草胺)含量X（%）按式（1）计算：

式中：A1——标准溶液中苯噻酰草胺（或苄嘧磺隆、乙草胺）峰面积；A2——试样溶液中苯噻酰草胺（或苄嘧磺隆、乙草胺）峰面积；m1——标样溶液中苯噻酰草胺（或苄嘧磺隆、乙草胺）的质量；m2——试样的质量；P——标样中苯噻酰草胺（或苄嘧磺隆、乙草胺）的纯度（%）。

2 结果与分析

2.1 流动相及波长的选择

经过大量反复的试验确定甲醇∶水=70∶30为流动相。其中水用冰醋酸调至pH=3，检测结果峰形对称，分离好。王德海等方法表明[3-5]，苯噻酰草胺的最大吸收在218 nm处，苄嘧磺隆的最大吸收在234 nm处，乙草胺多采用气谱法分析，综合样品中3个有效成分的含量，波长选定为230 nm。此时，乙草胺、苄嘧磺隆和苯噻酰草胺均有较大吸收。

2.2 线性范围

将苯噻酰草胺配制成 0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 mg/mL的混合标准溶液系列，将苄嘧磺隆和乙草胺配成 0.025、0.050、0.075、0.100、0.125 mg/mL的混合标准溶液系列，在上述操作条件下进样检测，以溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别测得线性关系曲线图（图2，图3，图4）。回归方程分别为 Y苄=41.329 x-0.031（R2=0.999 8），Y乙=21.083 x-0.016 6（R2=0.999 3），Y苯噻=4.891 2 x-1.670 3（R2=0.999 6）。