规模猪场种猪群PRRS血清驯化的血清学抗体监测与分析

周庆华 ,余兴龙

（1.湖南农业大学动物医学院，湖南长沙410128；2.湖南新五丰股份有限公司，湖南 长沙 410005）

猪繁殖与呼吸障碍综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)所引起的猪群疫病之一。该病以母猪流产、早产、死胎、断奶仔猪肺炎、育肥猪生长迟缓为主要特征，并可引起其他病原的继发感染。美国（1987）首先报道了该病的发生,而后世界各地均有报道，目前该病已被国际兽疫局（OIE）列为B类传染病。

本研究通过监测规模猪场种猪群PRRS血清驯化后血清抗体水平的消长规律，旨在为探讨规模猪场PRRS的流行规律和制定规模猪场PRRS的防控策略提供依据。

1 材料

1.1 待检血清 来自某规模化猪场，共采集种猪群不同时期段血样210份。

1.2 试剂 猪繁殖与呼吸综合征抗体监测试剂盒(PRRS 2XR)，购于IDEXX北京爱德士元亨生物科技有限公司。

2 方法

2.1 血清获取方法

自耳静脉采血（不加抗凝剂），室温静置3～6 h后，4000r/min离心10 min，取上清液置于离心管内，置-20℃冰箱保存备用。

2.2 抗体检测方法

采用IDEXX公司(美国)的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒(PRRS 2XR)对血清进行检测，其使用方法及操作步骤参照试剂盒说明书。

结果判定：PRRS抗体的有无（阳性/阴性）通过计算每个样品的样品/阳性对照（S/P）的比值判定。

如果S/P值低于0.4，样品应判定为PRRS抗体阴性。如果S/P值大于或等于0.4，样品应判定为PRRS抗体阳性。

3 结果与分析

3.1 结果

检测结果见表1。该场种猪群在2007年6月前一直使用哈兽研生产的PRRS灭活疫苗，2007年6月猪群感染高致病性PRRS后实施了种猪群的血清驯化，期后种猪群没有免疫任何PRRS疫苗。

3.2 分析

3.2.1 PRRS流行病学与诊断

该规模猪场存栏种猪620头、商品猪5 100头，年出栏生猪约11 000头。2007年6月初6周龄保育猪突然出现发热（高热，体温可达41.5℃以上）、扎堆、食欲废绝、精神沉郁、皮毛粗乱、呼吸困难等现象，部分猪关节肿大、耳朵、四肢及腹下皮肤等处发绀，病程3至7天，治疗基本无效,死亡率极高。半个月内较小日龄的保育猪及较大日龄的小猪（体重10～40kg）相继出现病症，死亡率也极高，6月下旬起种公猪及中大猪开始出现发热现象，7月份初怀孕母猪开始陆续出现发热及流产现象，发热母猪采取抗生素抗感染治疗，死亡率在5%左右。

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2007年6月13日选有典型发病症状的保育猪7头送湖南农大兽医院剖检及实验室检测，4头病猪组织样RT-PCR检测：其中高致病性PRRS有3头呈阳性，1头呈阴性，普通PRRS有4头全呈阴性；猪瘟病毒野毒检测4头全呈阴性；伪狂犬野毒鉴别检测7头全呈阴性。

3.2.2 PRRS血清驯化

2007年7月24日选取正在发热且有典型症状的保育猪10头，分别无菌采血并分离出血清。立即将此10头猪的血清样送湖南农业大学动物医学院进行病原学检测，确定除PRRS病毒外、没有检出其它致病性病原，如猪瘟病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒、口蹄疫病毒。再将此10头猪的血清混合冷冻贮藏。使用时抽取血清用生理盐水1∶10稀释，加抗菌素（如头孢噻肟钠）进行灭菌处理，配制成感染血清。

2007年7月25日将原发热且已流产的康复母猪集中到一栋栏舍，按每头母猪1mL肌肉注射配制好的感染血清，第2天同样剂量再肌肉注射1次，同时也选取部分原发病过的康复后备母猪试用，注射剂量及方法一样。原发病过的种猪接种感染血清后1周内没有反应，猪只采食及精神状况仍良好，体温不升高，说明用发病保育猪制备的血清病毒与原引起母猪发热流产的病毒一致。

2007年7月26日将未感染过的正常断奶母猪集中到一栋栏舍，按每头母猪1mL肌肉注射配制好的感染血清，第2天同样剂量再肌肉注射1次，同时也选取部分未发病的正常后备母猪试用，注射剂量及方法一样。注射感染血清后的第2天，断奶母猪和后备母猪都出现发热不食现象，针对发热种猪采取了积极的抗感染治疗，1周后感染猪只康复良好，没有死亡现象，说明用于感染的血清效果较理想。

2007年8月初进行感染血清的扩大使用：在完成血清感染试验，取得了预期的效果后，再进行全群扩大使用，配制感染血清对种公猪、空怀母猪、断奶母猪、怀孕100天内的母猪及后备母猪进行血清驯化，对以上种猪每头肌肉注射1mL感染血清，第2天同样剂量再重复一次。临产前2周内的怀孕母猪、正在分娩的母猪及哺乳母猪，待其产仔断奶后再分批感染（约5周后全群种猪全部感染完毕）。血清驯化过程中，对发热种猪都采取了积极的抗感染治疗，怀孕60天内的母猪流产率在20%左右，怀孕60天至100天内的母猪流产率在80%左右，种猪的死亡率不超过2%。

3.2.3 PRRS防控策略

2007年4月经PRRS血清学检测，该场种猪群PRRS血清抗体阳性率为36.67%，30份血清样S/P值均值为0.4637，预示种猪群属于PRRS易感群；2007年6月猪群感染高致病性PRRS，种猪群7月表现出病症，在8月份血清驯化后,整个种猪群都接触到了PRRSV。从10月的PRRS血清学检测结果可知，该场种猪群PRRS血清抗体阳性率达到100%，30份血清样S/P值均值达到2.1342，预示种猪群获得了高的PRRS抗体，同时，血清驯化后的母猪所产仔猪的成活率较前大大提升，母猪的繁殖性能也有提升。

种猪群血清驯化后，从2008年4月、10月及2009年4月每隔半年的血清学检测结果来看，PRRS血清抗体阳性率分别为80%、40%、46.67%，血清样 S/P值均值分别为1.3293、0.5429、0.5574，整体上看，随着时间的推延，种猪PRRS抗体水平呈下降趋势，PRRS阴性猪比例上升。种猪群在此期间配种分娩率、窝平健壮仔等繁殖性能指标稳定在较好的水平，所产仔猪在产房、保育、生长育肥阶段生长性能与成活率指标都较高。

2009年10月种猪群抽样进行PRRS血清学检测，PRRS血清抗体阳性率为46.67%，30份血清样S/P值均值为0.8503，其中S/P值＞2.5的样本有4份，而前一年半的时间内没有出现过，预示种猪群中已有个体感染了新的PRRS，此时猪场生产尚较稳定。2009年11月中旬起种猪群陆续出现发热、厌食、流产的母猪，至12月底约10%的怀孕母猪发热并流产，同时，生长猪出现了严重呼吸道疾病综合症，死亡率达到15%～20%。2010年1月起，母猪零星出现流产现象，种猪繁殖性能降低，母猪产后无乳症状突出，产房仔猪成活率明显下降。2010年4月种猪群血清学检测结果显示：PRRS血清抗体阳性率为60%，30份血清样S/P值均值为1.3033，其中S/P值＞2.5的样本有6份，表明种猪群中仍存在持续的PRRV感染。

因此，该规模猪场实施PRRS血清驯化措施，能显著缩短种猪群中PRRS的持续感染时间，能在较短的时间内使种猪群获得高的PRRS抗体，并能维持较长时间（约2年）的良好繁殖与生产性能。但随着种猪群PRRS抗体水平的下降及阴性猪比例的上升，新的PRRSV能持续感染种猪群，造成PRRS临床症状在种猪群中暴发。该规模猪场采取血清驯化防控策略对于指导PRRS综合防控的临床实践与实验研究具有一定的参考价值。

综上所述，通过对规模猪场种猪群定期的PRRS血清学抗体水平监测，根据PRRS抗体水平的消长规律，种猪群在血清抗体水平较低、阴性猪比例较高时，需要提前采取相应的防控措施，如重点做好生物安全工作，防止从外引种带来新的PRRSV，可注射弱毒疫苗提高种猪群的阳性率等，这对规模猪场如何防控PRRS具有重要意义。 □

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