薄层色谱法鉴别睡安胶囊的研究

钟力 洪美华 宋增炫 周俊述

睡安胶囊收载于卫生部药品标准中药成方制剂第二十册，由酸枣仁(炒)、五味子、远志、首乌藤、丹参、石菖蒲、知母、甘草、茯苓等药味组方，有养血安神，清热除烦之功效，主治心烦不寐，怔忡惊悸，梦多易醒或久卧不眠。睡安胶囊原质量标准中只有一个化学反应及知母的薄层鉴别，未收载五味子的鉴别，而且知母鉴别中大量使用了剧毒试剂苯作为溶剂，操作繁琐［1］。为了简便、有效地控制药品的质量，提高药品的质量标准，笔者采用薄层色谱法对处方中主药知母、五味子进行了鉴别，取得了满意的效果，为睡安胶囊的质量控制提供了依据。试验结果如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 薄层摄像仪(REPROSTAR-ⅡCAMAG);硅胶G(青岛市市北区海化干燥剂厂)，自制规格为10×20 cm，厚0.5 mm;预制板有三种:1)Gel de silice 60 F254(MERCK板)2)青岛海洋化工厂(青岛板)3)烟台市化学工业研究所生产(烟台板);超声波清洗器(功率300W，频率40kHz)昆山超声波仪器有限公司;瑞士METTLER AG135电子天平。

1.2 试药 睡安胶囊(由市场上购买，广西玉林制药有限责任公司，批号为20080407);对照品、对照药材来源于中国药品生物制品检定所:五味子对照药材(0922-9803)、知母对照药材(1070-200002)、菝葜皂苷元对照品(11074-200509);其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 知母的薄层色谱鉴别［2］

2.1.1 供试品溶液制备 取本品内容物1 g，加70% 乙醇30 ml超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml溶解，加盐酸1 ml，加热回流2 h，冷却后滤过，滤液用乙醚萃取2次，每次30 ml，将乙醚液蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2 对照药材溶液制备 取知母对照药材1 g，同2.1.1制成对照药材溶液。

2.1.3 对照品溶液制备 取菝葜皂苷元对照品10 mg，加乙醇溶解并稀释至10 ml，摇匀即得对照品溶液(1 mg/ml)。

2.1.4 阴性对照溶液的制备 缺知母的阴性对照1 g同2.1.1制成阴性对照溶液。

2.1.5 鉴别 照《中国药典》2005年版一部附录薄层色谱法(附录ⅥB)试验，分别吸取以上供试品溶液及三种对照溶液各20 μl点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-石油醚-丙酮(9∶5∶1)为展开剂，展开，取出晾干，喷以1份8%香草醛乙醇溶液与10份硫酸溶液(7→10)的混合液为显色剂，105℃加热至斑点清晰。

2.1.6 结果 在日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照色谱无干扰。(结果见图1)

图1 知母的TLC图

2.2.7 耐用性试验 试验中考察了手铺和预制两种薄层板，并在不同温度(4℃ ～10℃和室温)、不同湿度(20%和75%)进行了考察试验。结果表明在高湿低湿、常温低温的条件下，用手铺或预制板进行展开的结果基本一致。

2.2 五味子的薄层色谱［2］

2.2.1 供试品溶液的制备 取本品内容物2 g，加甲醇(或乙醚)水浴回流1 h，过滤，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。

2.2.2 对照药材溶液的制备 取五味子对照药材1 g，同2.2.1制成对照药材溶液。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 缺五味子的阴性对照1 g，同2.2.1制成阴性对照溶液。

2.2.4 鉴别 照《中国药典》2005年版一部附录薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，分别吸取供试品溶液10 μl、对照药材及阴性对照溶液各5 μl溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)为展开剂，展开，取出晾干。

2.2.5 结果 于紫外光灯(254 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照色谱无干扰。(结果见图2)

图2 五味子的TLC图

2.2.6 耐用性试验 试验中考察了手铺和预制两种薄层板，并在不同温度(4℃ ～10℃和室温)、不同湿度(20%和75%)进行了考察试验。结果表明在高湿低湿、常温低温的条件下，用手铺或预制板进行展开的结果基本一致。

3 讨论

3.1 睡安胶囊原标准的知母薄层鉴别项下，采用了苯溶解残渣，作为供试品溶液，并采用苯－丙酮(9∶1)作为展开剂。考虑到苯是毒性大的试剂，实验中尽量避免使用，所以以甲苯替代，并参考《中国药典》2005年版一部知母药材项下方法，将展开剂改为甲苯－石油醚－丙酮(9∶5∶1)。经多次试验，结果斑点清晰，Rf值适中，阴性无干扰，分离度好。

3.2 五味子的薄层鉴别是参考《中国药典》2005年版一部五味子药材的薄层鉴别方法修订而成的。实验中，尝试了甲醇和乙醚提取样品，结果表明两种提取方法所得斑点基本一致，而且甲醇所提溶液的斑点更清晰，故使用甲醇为提取溶剂;还尝试使用的展开剂有石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)、石油醚－甲酸乙酯－甲酸(25∶5∶1)、石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶8∶1)、甲苯－乙酸乙酯(4∶6)，结果以石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)的斑点Rf值较适中，分离度较好，故将展开剂确定为石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)。

3.3 所拟定的薄层色谱法鉴别睡安胶囊中的主药知母和五味子，操作简便、分离快速、专属性强、重现性好，可以用于该制剂的质量控制。

［1］卫生部药品标准，WS3-B-4038-98．

［2］中国药典，2005 年版．一部.44、148．