术前镜检标本VEGF-C和CCR7表达预测胃癌淋巴结转移的临床研究

赵金伟,王钟林,马 震,王广义

(1.吉林省人民医院,吉林长春 130021;2.吉林大学第一临床医院)

术前镜检标本VEGF-C和CCR7表达预测胃癌淋巴结转移的临床研究

赵金伟1,王钟林1,马 震1,王广义2*

(1.吉林省人民医院,吉林长春 130021;2.吉林大学第一临床医院)

目的通过对胃癌患者术前镜检标本VEGF-C、CCR7蛋白表达的检测,探讨镜检标本VEGF-C、CCR7蛋白表达预测淋巴结转移的价值。方法采用Western blotting技术对37例胃癌镜检标本的VEGF-C、CCR7蛋白表达进行检测。结果37例胃癌患者术前镜检标本中,VEGF-C蛋白表达的阳性率为54.1%(20/37);CCR7蛋白表达的阳性率为67.6%(25/37),通过ROC分析,联合检测镜检标本VEGF-C、CCR7表达对术前预测胃癌淋巴结转移有较高的准确性,阳性预测值为94.7%。结论对术前镜检标本采用Western blotting技术联合检测VEGF-C、CCR7蛋白表达对术前预测胃癌淋巴结转移具有一定的临床价值。

胃癌;趋化因子受体CCR7;内皮生长因子;淋巴结转移

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1049)

本实验采用Western blotting技术检测胃癌镜检标本VEGF-C、CCR7表达,观察两种标记物联合检测预测胃癌淋巴结转移的价值。

1 方法

1.1 材料 收集吉林大学第一医院及吉林省人民医院2004年12月-2006年3月门诊及住院的胃癌病人(均经手术及病理证实)的术前镜检标本(胃癌组织及癌旁正常粘膜组织)共37例,均未经任何抗肿瘤治疗。标本取出后立即放入液氮中冷冻,-80℃冰箱中保存备用;收集其中的20例病人的胃癌组织标本,福尔马林溶液固定,石蜡包埋,以备切片用于免疫组化染色。术后手术及病理证实,30例为伴有淋巴结转移;7例为无淋巴结转移。

1.2 蛋白质印迹法(Western blotting)检测VEGFC、CCR7蛋白表达 取37例胃癌镜检标本,裂解组织,蛋白质变性后聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,电转移至硝酸纤维膜上,染色后,剪下相应蛋白电泳条带,8%脱脂牛奶封闭后,分别加入鼠抗人VEGF-C第一抗体(购自北京莱勃生物技术研究所);鼠抗人CCR7第一抗体(购自Peprotech RD公司),4℃过夜孵育,洗膜后加羊抗鼠IgG第二抗体孵育,洗膜后电化学发光法显影。Western blotting图片中出现31 KD的条带为VEGF-C蛋白表达阳性;出现45 kD的条带为CCR7蛋白表达阳性。

1.3 统计学处理 样本阳性率采用 χ2检验,显著性差异为P＜0.05,应用统计软件SPSS10.0处理。

2 结果

2.1 VEGF-C、CCR7蛋白在胃癌患者镜检标本中的表达

37例胃癌镜检标本中,VEGF-C、CCR7蛋白表达的阳性率见表1。淋巴结转移组和非淋巴转移组二者相比,差异均具有显著性。共有5例(13.5%)癌旁正常组织出现VEGF-C表达阳性,但较癌组织弱。共有4例(10.8%)癌旁正常组织出现CCR7蛋白表达阳性,但较癌组织弱。VEGF-C,CCR7蛋白表达预测胃癌淋巴结转移的敏感性(Se)、特异性(Sp)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)和准确性分别为63.3%(19/30),85.7%(6/7),95.0%(19/20),35.3%(6/17),67.6%(25/37)和76.7%(23/30),71.4%(5/7),92.0%(23/25),41.7%(5/12),75.7%(28/37)。

表1 VEGF-C、CCR7蛋白在胃癌镜检标本中的表达

2.2 镜检标本VEGF-C,CCR7蛋白表达的联合检测对胃癌淋巴结转移的预测价值

通过ROC分析表明,联合检测胃癌镜检标本的VEGF-C和CCR7表达对预测胃癌淋巴结转移具有较高的准确性,Az=0.764。如果VEGF-C和CCR7蛋白同时阳性表达视为淋巴结转移阳性,同时无表达视为无淋巴结转移,联合检测VEGF-C和CCR7蛋白表达预测淋巴结转移的阳性预测值为94.7%(18/19),但阴性预测值仍较低,为45.5%(5/11),见表2。

表2 VEGF-C、CCR7联合检测的预测

3 讨论

本实验对37例胃癌患者术前镜检标本(胃癌组织及癌旁粘膜组织)采用Western blotting技术检测VEGF-C和CCR7蛋白表达,结果发现,37例胃癌镜检标本中,VEGF-C蛋白表达的阳性率为54.1%(20/37)。在淋巴结转移组和非淋巴结转移组中,VEGFC蛋白表达的阳性率分别为63.3%(19/30);14.2%(1/7),二者相比,差异具有显著性,P值为0.019 04。共有5例(13.5%)癌旁正常组织出现VEGF-C表达阳性,但较癌组织弱。CCR7蛋白表达的阳性率为67.6%(25/37)。在淋巴结转移组和非淋巴结转移组中,CCR7蛋白表达的阳性率分别为76.7%(23/30);28.6%(2/7),二者相比,差异具有显著性,P值为0.014 38。共有4例(10.8%)癌旁正常组织出现CCR7蛋白表达阳性,但较癌组织弱。

VEGF-C,CCR7蛋白同时表达阳性率在淋巴结转移组为60.0%(18/30),在非淋巴结转移组中的阳性率为14.3%(1/7),二者相比,差异具有显著性,P值为0.029 3。这进一步说明VEGF-C、CCR7蛋白同时表达与胃癌淋巴结转移密切相关[1-6],通过ROC分析表明,联合检测胃癌镜检标本的VEGF-C和CCR7表达对预测胃癌淋巴结转移具有较高的准确性,Az=0.764。如果VEGF-C和CCR7蛋白同时阳性表达视为淋巴结转移阳性,同时无表达视为无淋巴结转移,联合检测VEGF-C和CCR7蛋白表达预测淋巴结转移的阳性预测值为94.7%(18/19),但阴性预测值仍较低,仅为45.5%(5/11)。

综上所述,对术前镜检标本采用Western blotting技术联合检测VEGF-C和CCR7蛋白表达对术前预测胃癌淋巴结转移具有一定的临床价值。

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Expression of endothelial growth factor C and chemokine receptor CCR7of endoscopic biopsy specimens and its correspond- ing properative predicting lymph node metastasis in gastric carcinoma

ZHAOJin-wei,WANGZhong-lin,MAzhen,et al.(Jilin Province Peoples Hospital,Changchun130021,China)

ObjectiveTo measure the combined examination of VEGF-C and CCR7 protein expression in endoscopic biopsy specimens of gastric carcinoma and assessed their usefulness as a diagnostic tools of predicting lymph node metastasis before surgery.MethodsEndoscopic biopsy specimens(tumor and corresponding normal mucosa)of gastric tissue from 37 patients with gastric carcinoma who later underwent surgical resection,which were included in the current study.VEGF-C and CCR7 protein expression were examined in 37 cases of endoscopic biopsy specimens by Western-blotting assay.ResultsIn the endoscopic biopsy specimens of 37 patientswith gastric carcinoma,the positive rate of VEGF-C and CCR7were 54.1%(20/37)and 67.6%(25/37).By receiver operating characteristic(ROC)analysis,it showed that the accuracy of the combined examination of VEGF-C and CCR7 expression of endoscopic biopsy specimens in predicting lymph node metastasis before surgery was relatively high(area under ROC curve[Az=0.764].The positive predictive value(PPV)was 94.7%.ConclusionThe accuracy of the combined examination of VEGF-C and CCR7 protein expression in predicting lymph node metastasiswas relatively high.

endothelial growth factor;chemokine receptor 7;gastric carcinoma;metastasis

R735.2

A

1007-4287(2010)07-1049-02

吉林省科技厅自然科学发展基金资助项目(20010536)

*通讯作者

2009-01-18)