海奥免冲洗洗浴液对家兔皮肤、眼刺激性试验研究

王凌菲,胡家庆,李 康,陆姚池,刘博深,殷 萌,杨 峰

免冲洗洗沐产品主要针对特殊环境下,特别是环境比较密闭且水供应困难、缺乏洗浴条件的潜艇、水面舰艇以及其他特殊军事环境下的作业人员研发生产的。人处于这种环境下,挥发性有机物多,身体、头发易脏易污染,而且洗浴困难,因此免冲洗洗浴液的开发对海军舰艇卫生具有重要意义。海军医学研究所前期经过配方研究,研发出海奥免冲洗洗发液、免冲洗洗浴液产品。由于免冲洗洗浴液与皮肤直接接触,且在皮肤表面要滞留一段时间,故要对其安全性和毒理学进行考察和研究。本研究根据中华人民共和国卫生部颁布的《化妆品卫生规范》(2007年)中规定的方法[1],对海奥免冲洗洗发液、免冲洗沐浴液的急性皮肤刺激性、多次皮肤刺激性和眼部刺激性进行了实验研究,从而为其安全应用提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 动物和仪器

1.1.1 试验动物 家兔 8只,雌雄各半,雌者无孕,体质量 2.5～3.0 kg。

1.1.2 试验仪器与试剂 便携式裂隙灯显微镜(YT-02,苏州医疗器械厂),去离子水,无菌纱布,胶布,10%荧光素钠注射液。

1.2 测试产品 由海军医学研究所研制并批量试制的海奥免冲洗洗发液和免冲洗洗浴液。

1.3 方法

1.3.1 急性皮肤刺激性试验[2,3]试验前约 24 h,将 8只家兔脊柱两侧毛剪掉,不损伤表皮,去毛范围左、右各约 3cm×3cm。将 8只家兔随机分为 A、B组,取受试物约 0.5 ml直接涂在皮肤上(A组涂洗发液,B组涂洗浴液),然后用 2层纱布(2.5cm×2.5cm)和 1层玻璃纸覆盖,再用无刺激性胶布和绷带加以固定。另一侧皮肤作为对照。采用封闭试验,敷用时间为 4 h。于清除受试物后的 1、24、48、72 h观察涂抹部位皮肤反应,按《化妆品卫生规范》(2007年)规定的标准进行皮肤反应评分,以受试动物积分的平均值进行综合评价,根据 24、48、72 h时的最高积分均值,判定皮肤刺激强度。

1.3.2 多次皮肤刺激性试验方法[4,5]试验前将动物背部脊柱两侧被毛剪掉,去毛范围各3cm×3cm,涂抹面积 2.5cm×2.5cm。取受试物约 0.5 ml涂抹在一侧皮肤上(A组涂洗发液,B组涂洗浴液),另一侧涂去离子水作为对照,每天涂抹 1次,连续涂抹14 d。从第 2天开始,每次涂抹前剪毛,用去离子水清除残留受试物。1 h后观察结果,按《化妆品卫生规范》(2007年)规定的标准评分,对照区和试验区同样处理。

1.3.3 眼刺激性试验[6]将 8只家兔随机分为 A、B组,轻轻揭开家兔一侧眼睛的下眼睑,将受试物0.1m l(100 mg)滴入(或涂入)结膜囊中(A组涂洗发液,B组涂洗浴液),使上、下眼睑被动闭合 1 s,以防止受试物丢失。另一侧眼睛不处理,作自身对照。滴入受试物后 24 h内不冲洗眼睛。临床检查和评分:在滴入受试物后 1、24、48、72 h以及第 4天和第7天对动物眼睛进行检查。如果 72 h未出现刺激反应,即可终止试验。如果发现累及角膜或有其他眼刺激作用 7 d内不恢复者,为确定该损害的可逆性或不可逆性,需延长观察时间,一般不超过 21 d,并提供第 7、14、21天的观察报告。除了对角膜、虹膜、结膜进行观察外,其他损害效应均作记录并报告。每次检查中均按眼损害的评分标准记录眼刺激反应的积分。使用手持裂隙灯进行眼刺激反应检查。在24 h观察和记录结束之后,用荧光素钠对所有动物的眼睛作进一步检查[7],以给受试物后动物角膜、虹膜或结膜在 24、48 h或 72 h观察时点的刺激反应的最高积分和恢复时间评价、判定受试物对眼的刺激程度。

2 结果

2.1 皮肤刺激性试验

无论是急性皮肤刺激性试验还是多次皮肤刺激性试验均未见刺激性和腐蚀性反应,积分均为 0。说明海奥免冲洗洗发液、洗浴液对皮肤无刺激性,不会对皮肤造成伤害。

2.2 眼刺激性试验

急性眼刺激性试验中,仅有 1只家兔在 1 h观察时结膜有轻微充血,说明有轻微的暂时刺激性,但24 h观察时即恢复正常;其余在 72 h内未观察到任何刺激反应,积分均为 0,说明海奥免冲洗洗发液、洗浴液对眼睛无刺激性,不会对眼睛造成伤害,但使用时要避免入眼,防止造成短暂的刺激性。

3 讨论

本试验建立了针对免冲洗洗发液、免冲洗洗浴液兔皮肤和眼刺激性的毒理学检测体系。通过试验,可确定海奥免冲洗洗发液、免冲洗洗浴液无论是对皮肤还是眼睛均无明显的刺激性,符合绿色洗涤剂的标准,将其使用于人体是安全的。本试验结果为该免冲洗洗浴液的安全使用提供了依据,为在舰艇等特殊条件下工作人员的洗沐提供了一种新的技术手段,且该产品可节约洗涤用水,降低能耗。

[1]中华人民共和国卫生部.化妆品卫生规范—2007(皮肤刺激性/腐蚀性试验)[S].北京:中华人民共和国卫生部,2007:102-105,106-109.

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[3]冯秀娟,李忠生,李冰.皮特芬溶液对家兔皮肤刺激性试验[J].中国动物检疫,2007,24(1):41.

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[5]孔福明.香妃夏露的皮肤刺激性和长期毒性试验研究[J].国际医药卫生导报,2006,12(18):189-191.

[6]王张强,周玲,胡志力.阿扎司特滴眼液对家兔眼刺激性试验[J].齐鲁药事,2005,24(2):116-117.

[7]李杰,张强.玻璃酸钠滴眼液对家兔眼刺激性试验[J].齐鲁药事,2006,25(2):116-117.