本刊记者/张晶
2010年1月12 日,广州香格里拉酒店金碧辉煌的会议厅内,来自广东、广西、海南3省的100多家规模猪场代表200余人,参加勃林格殷格翰猪圆环病毒疫苗在中国的首场上市会,认真听取各国权威专家关于猪圆环病毒病研究成果和防控策略的报告;温氏集团、中粮集团、海南罗牛山、广三保、广州力智、广西桂宁、广西柯新源等知名企业也参加了这一盛会。
应对养猪业复杂的疾病,特别是猪瘟、蓝耳病、猪圆环病毒病这3大免疫抑制性疾病,单纯的药物显得势单力孤,疫苗无疑是最有效的防控武器。但不是所有的猪病都有高效的疫苗成功生产,因为那是一项非常艰难的研究工作,只有那些拥有强大研究团队,也敢于大量投入研发的公司,通过长时间的实验攻关和田间试验才能实现,当然完美的产品研制成功也离不开运气。
而这3大疾病中,属猪圆环病毒最难分离培养,更难批量生产出安全有效的疫苗;这也正是该病长期难以防控的原因所在。
2010年新年伊始,勃林格殷格翰公司的圆环病毒疫苗横空上市,给我国养猪业带来了希望,同时也为猪圆环病毒病无法防控的历史划上了句号。
成功研制出猪蓝耳病弱毒疫苗的德国勃林格殷格翰动物保健公司,再次为养猪业带来福音,他们研制并生产出了猪圆环病毒疫苗,在欧美和东亚等国家广泛使用后,今年初正式登陆我国市场。这是他们继猪伪狂犬、蓝耳病、猪回肠炎等疫苗成功领跑市场后,又一实力产品率先在中国市场上市。
勃林格殷格翰猪圆环病毒疫苗2006年最先在北美上市,2008年在27个国家同时上市,至今已有49个国家开始使用这一产品。至今累计销售超过2.7亿头份,仅2009年就有1亿5900万头猪免疫接种。
为全国养猪业者尽快了解猪圆环病毒病防控的知识及疫苗应用的经验,勃林格公司邀请国内外著名猪病学专家、兽医与大猪场技术总监等连续在广州、长沙、福州、郑州4大城市举办大型上市活动。
“同一个地球,同一个圆环”是这一系列上市活动的主题。不错,全球养猪业都无法回避猪圆环病毒这一共同的难题;无论西方或是东方,无论大型集团或是个体散养,圆环病毒病无处不在、无时不在地损伤着猪群。
1974年猪圆环病毒就被发现,当时虽然在各个猪场都能检测到这种疾病,但是猪群并没有什么症状。因此,人们对猪圆环病毒的最初认识是对猪无致病性的;直到1991年在一个蓝耳病阴性的猪场中发现仔猪断奶多系统衰竭综合症,死亡率高,但不清楚是什么病原,直到检测出猪圆环病毒。从此该病在全球范围大流行,经过多年研究,发现这种致病性的猪圆环病毒为2型(PCV2),而最初的不致病性猪圆环病毒命名为1型(PCV1)。
圆环病毒二型为单环状,而且基因组非常小,主要基因组为ORF2与ORF3,现在ORF3研究还不是非常清楚。
1.1.1 仔猪断奶多系统衰减综合征(PMWS)
猪圆环病毒病在猪场最大的影响和表现是PMWS。
PCV2的致病机理:病毒主要通过眼睛鼻子途径传播,6~14周龄仔猪表现最明显,病毒在巨噬细胞、抗原递程细胞、上皮与内皮细胞中复制,破坏猪的免疫系统。
临床上,管理水平与其他疾病的影响,使得圆环病毒更易在猪体内免疫系统复制,造成免疫抑制,使得抗生素治疗无效。
猪场PCV2感染动力学:病毒在所有猪场间循环,其检测方法需要通过PCR手段,对PMWS的准确诊断需要3方面指标。
第一,临床症状。猪发烧,衰竭,呼吸困难,苍白,腹泻,有时还会导致黄疸。发病一般在6~15周。潜伏6~8日。细菌和真菌感染也会增加其发病几率。另外,胃溃疡与PMWS也有很高的相关性。最明显的是断奶猪死亡率升高,严重的场超过20%。
第二,眼观和镜下病变。尤其在淋巴结部位。眼观病变如猪的消瘦,脊骨突出;肺脏出现明显的间质性肺炎病变,无塌陷、橡皮肺化。剖检可见淋巴结有明显的病变。间质性肾炎,有明显的白斑,这是典型的圆环病毒特点,另外没有化脓,因此一般不明显影响肾脏的功能。肝脏萎缩苍白,后期又会变大变硬。胃溃疡也是非常多见的症状之一,也应该是免疫系统损坏后的激发病变。PMWS镜下病变:1)淋巴凋亡与巨噬细胞浸润。2)间质性肺炎的常见,可以解释为什么临床猪呼吸困难。
第三,病变部位检测到大量PCV2病毒。过氧化物酶染色就可以检测病变部位是否感染大量圆环病毒。
小结:圆环病毒一直是业界研究热点,一致的观点是圆环病毒导致免疫抑制,导致淋巴细胞、B细胞等免疫细胞的凋亡、衰竭,衰竭的程度与病毒载量相关。
1.1.2 猪皮炎肾病综合征(PDNS)
1993年首次在英国提出,随后其他地区相继报道,通常猪场发生该病的几率不高,但有报道一些猪场发生率在20%左右。目前我们并不能确定是否圆环病毒直接造成PDNS,但从临床上发现其与圆环病毒呈现非常高的相关性。原因是病原抗体在血管中大量凝结,但是具体是哪些抗原还不能确定,也许是很多病原积累。皮肤与肾脏是攻击的目标,临床上看到脉管炎性的皮炎,真皮细动脉和毛细血管急性坏死。
大多数PDNS都可以检测出PCV2病原。而且经常是一个猪场发现存在PDNS和PMWS。
特别需要提出:猪瘟也能引起肾脏病变(出血),但不会引起肾衰竭;这是区别猪瘟与猪圆环病毒病的一个细节。与猪瘟出血不同的还有,PDNS主要集中在后肢和肾脏,而猪瘟的出血是弥散性的。在淋巴结病变和脾脏病变上也很相似,但还是可以区别的。
1.1.3 猪呼吸道疾病综合症(PRDC)
PRDC与多种病原相关,蓝耳病、猪流感、肺炎支原体,也包括PCV2。因此,分辨主要病原就更加困难。因此,需要实验室检测手段。
1.1.4 圆环病毒病的防控措施
含独特的纯化圆环病毒抗原的亚单位疫苗可有效防控猪圆环病毒,这是通过广泛的生产实践得出的结论。
1.1.5 问答
问题1:请问多明戈博士,您如何确切计算PCV2对猪场造成的损失?
多明戈:这个影响是非常广泛的,主要表现在:第一,保育猪高死亡率;第二,整齐度降低;第三,健康水平普遍降低造成用药成本增加。
问题2:如果在一份病料中同时检测到多种病毒,如何判断是PCV2为主要原因?
多明戈:如果同时检测到猪瘟、蓝耳、圆环3个病毒,那问题关键不是分辨,而是每样都必须重视。
问题3:在没有出现明显临床症状时,是否需要免疫?
多明戈:同控制其他免疫抑制性疾病一样,对圆环病毒病这样影响重大的疾病,疫苗免疫同样非常必要。好比,你的猪场没有明显的猪瘟临床症状,就可以不接种猪瘟疫苗吗?即便它的影响没有那么严重,所造成的亚临床症状也会给猪场造成很多损失,这是我们的经验。
1.2.1 顽固性
圆环病毒对各种消毒剂都有很强的抵抗性,因此,猪场很难将其彻底净化。
多明戈博士
杨汉春教授
施普荣博士
玛莎博士
戴华荣高级兽医师
1.2.2 致病性
4个大病,PMWS肯定是PCV2造成的;PDNS还有很多致病原因没有搞清楚,PRDC也很复杂。还有繁殖障碍性疾病。其中,最重要的是PMWS。在我国主要发生在5~12周龄仔猪,对中国猪场主要是发生在保育期。感染猪场发病率在4%~60%,死亡率在4%~20%,差异之所以很多,因为猪场的管理水平不同。
1.2.3 免疫抑制
影响猪瘟的免疫效果;影响蓝耳病免疫效果;影响伪狂犬免疫效果,等等大量信息证明。圆环病毒引起的免疫抑制是非常严重的。
1.2.4 普遍性极高
猪场圆环病毒的抗体阳性率高到达100%。
1.2.5 基因型多
圆环病毒结果虽然简单,但是基因型有多个。我国的猪场分离出的圆环病毒基因型是需要重视的。
1.2.6 注意
最常见的继发感染是副猪嗜血杆菌病。
1.2.7 是否有PCV2感染一定表现为PMWS呢?
一般认为,PMWS的猪场同时存在细小病毒、流感、肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌其中的一项或几项。因此说PCV2是发生PMWS的先决条件,这些细菌和病毒是促成因素。
1.2.8 控制措施
PMWS是一个多因素疾病,PCV2是先决条件。但也有很多其他影响因素。因此,首先需要从管理入手,综合控制,另外,疫苗的免疫能够提供很好的保护,而且效果明显。
1.2.9 问答
问题1:请问控制圆环病毒的难点在哪?
杨汉春:就是很难清除,只能控制。另外,保育阶段不要打油苗,因为这个刺激太强,会诱发PMWS。保育猪群感染PCV2不一定发病,但在强烈的刺激下,就会发病,因此,建议不要在保育期接种矿物油疫苗。
1.3.1 什么是纯化的抗原
对于圆环病毒,全病毒灭活,滴度很低,这样灭活制作疫苗非常困难。所以我们提纯病毒衣壳蛋白,但是滴度也很低。这两种方式都行不通。
最后,通过杆状病毒表达衣壳蛋白(ORF2,圆环病毒的关键蛋白),可产生大量抗原。另外,杆状病毒不致病而且容易灭活,因此它是安全有效的。
1.3.2 优质佐剂特点
1)与抗原兼容;2)高度免疫原性;3)缓慢释放;4)免疫产生早;5)持续时间长;6)安全方便。
采用聚合纤维为基质如海绵吸水一样将抗原交联在一起,游离的抗原马上被免疫系统识别,交联的抗原逐步从海绵中释放出来,实现缓释持久。
1.3.3 为什么选择单针疫苗?
1)方便;2)应激小;3)猪场工作量小;4)免疫程序更精简;5)降低疾病传播的风险;
1.3.4 为什么选择仔猪免疫?
PCV2主要发生在5周龄后,母源抗体不够持久,仅免疫母猪只能推迟发病时间,不能阻止PMWS的发生所以选择仔猪免疫。
1.3.5 如何确定最佳免疫时间?
仔猪出生后2~3周龄。
1.3.6 问答
问题1:请问发现有的猪出现皮炎症状,是否就是圆环病毒造成的?
玛莎:不一定,要经过临床和实验室诊断。
问题2:圆环病毒疫苗是否可以用于紧急接种?
玛莎:可以,但是选择能够挽救的猪只,刚刚出现病毒血症的猪,有紧急接种的价值。而太重的就不需要浪费了。
问题3:如何同时控制蓝耳病和圆环病毒?在猪瘟存在的情况下是否会影响圆环病毒疫苗免疫效果?
玛莎:在韩国的生产实践中,猪瘟和圆环病毒控制,先接种圆环病毒疫苗可以提高猪瘟控免疫的效果。这3种疾病都是免疫抑制性疾病,感染任何一种都会影响疫苗免疫的效果,因此,三种疾病同样重要。
问题4:请问圆环病毒母源抗体保护多久?接种疫苗会冲突吗?
玛莎:母源抗体只能保护5周,3周龄时接种疫苗不影响免疫效果。
2006年前,美国猪场的圆环病毒病压力很大,但当时没有疫苗可以使用。从2006年开始,有一部分猪场开始使用圆环病毒疫苗,但因为疫苗供应数量有限,很多猪场还订购不到。随着疫苗生产的数量增加,越来越多猪场开始采用疫苗防控,兽医们也开始推荐猪场采用疫苗。目前,圆环疫苗在美国的免疫率已经高达95%。
1.4.1 各国PCV2疾病的发生
2005年前加拿大主要保育猪发病,2005年,所有的养猪地区频繁发病。2006年-2007年美国育肥猪发病增多,有些猪场的育肥猪死亡率高达50%,该病逐渐覆盖美国所以养猪地区。
1.4.2 美国圆环病毒病的临床症状
1)经常发现同栏猪只有些发病,有些就不发病;
2)发病猪部分死亡,部分成为僵猪;
3)8~16 周发病最常见;
4)典型发病时间是转入育肥猪舍得初期,2周左右,死亡高峰时间在之后的2周。
5)2004 年-2006年,统计每批次育肥猪的死亡率,可以看到虽然呈现波动变化,但总体看死亡率还是很高的。
6)猪皮肤苍白,精神沉郁,体型消瘦,呼吸急促,腹泻。如果,现在我们这里看到这样的猪,就会判定为免疫失败或漏免。
1.4.3 更多表现为亚临床症状
1)多系统疾病伴随消瘦;
2)高死亡率:在没有新病原进入的情况下死亡率翻倍。
3)包括肺炎等呼吸道症状;
4)猪皮炎渗出综合征;
5)腹泻、消瘦等肠道症状。
1.4.4 诊断
1)猪群病史;
2)临床表现;
3)组织样本进行病毒和组织病理检测;
4)血清学检测;
5)回顾生产指标;从一份衣阿华大学提供的一份数据表明,从1993年到2006年,美国猪圆环病毒发病呈明显上升态势,特别是2006年陡然增加。因此,圆环病毒病有大规模爆发的特点。
1.4.5 2006-2009年美国养猪业田间数据
如果健康的猪群中有个别猪的体型明显很小,消瘦,那么首先怀疑病毒病。进一步剖检,腹股沟淋巴结肿大,肠系膜水肿;另外还有猪皮肤成片的紫色出血斑点,也要怀疑;第三,是猪的腹泻。
1.4.6 Pipstone兽医系统背景
有140000头基础母猪,每年提供300万头仔猪,合作猪场购买断奶仔猪。兽医诊所为系统内部的所有猪场提供兽医诊断和服务。系统内部2004年首次发现PCV2,零星发病,最初只在外购仔猪发现,后来在健康度很高的生产线也发现,并且育肥中期死亡率上升。但是没有作为圆环病毒处理。2006年病例增多,不再是“个体现象”。发病前的死亡率一般为2%~5%,发病后到6%~10%;主要发生在12~18周龄猪群;抗生素治疗无效;很多管理控制措施效果不明显;疫苗上市马上尝试。
使用前做了一个小规模试验。数据有限,因此评价标准只有死亡率降低。
1.4.7 圆环病毒病定位
保持良好的生物安全操作,避免引入疾病;维持高水平的清洁卫生;保持良好的饲养,应激最小化;管理好混合感染的风险;避免在圆环病毒血清阳转是进行油苗接种。
1.4.8 免疫效果
几个猪场的实际情况表明,发生蓝耳病的猪场免疫圆环病毒免疫后,猪群死亡率明显降低。因此,控制好圆环病毒能够更好的帮助控制蓝耳病。
有一个猪场我们没有发现任何明显的圆环病毒病,蓝耳病检测也是阴性,只有衣原体有检出。我们判断其PCV2为亚临床症状。对猪群进行比较试验,免疫组的生产性能会高很多。
1.4.9 问答
问题1:管理良好的猪场,需要使用圆环苗吗?
施普荣:我不清楚你的猪场管理水平到底怎么样,如果想尝试圆环疫苗,完全可以通过试验看出效果。
问题2:在Pipstone系统使用经验看,圆环疫苗是否有什么副作用?
施普荣:我们没有发现任何副作用。
问题3:为什么皮炎渗出综合症多发生在春末夏秋天,是否与蚊虫叮咬有关?
施普荣:我也发现PNDS也季节性,这也许与高温高湿有关。
问题4:如果圆环和蓝耳病同时感染,先处理哪个?怎么办?
施普荣:不同的场,情况不同肯定要区别对待。比如你的猪场蓝耳发病正高发,控制蓝耳就是紧要的,作为平时,这两种病都要正常免疫,同等对待。
问题5:母猪要不要用圆环疫苗?
施普荣:这是非常好的问题,当疫苗供应不足的时候,我们尝试过免疫母猪来保护小猪,但是事实上这是行不通的,因此,现在我们放弃免疫母猪。
广东湛江供港猪场,1200头基础母猪,单点联系生产,建厂27年。在2007年7月前生产非常稳定,7月以后猪群主要表现为呼吸道疾病综合症,在保育和育肥阶段发病率很高,多次检测主要是存在圆环病毒病,同时包括蓝耳病,猪瘟,为狂犬等疾病。我们就针对圆环先进性免疫,采用对比试验。2009年1月对本场东、西生产线各190头仔猪于14日龄接种殷格发圆环病毒疫苗,另外190头为对照组。试验死亡率、平均日增重、临床症状、料肉比4项指标。临床上未出现任何不良反应,保育猪群的生产成绩死亡率降低17.5%,平均日增重提高了45.7g/d。
问题1:贵猪场的免疫程序?
戴华荣:7天免疫蓝耳,14天免疫圆环,21天免疫猪瘟苗。
最后,亚洲区高级技术服务经理对各位专家的演讲内容做了回顾和总结,让与会代表重温一天报告的重点内容和核心观点。
与会企业对圆环病毒疫苗能够为猪场解决哪些问题,抱有浓厚兴趣,我们随机采访了广西柯新源猪场有限公司杨厚德总经理与海南罗牛山的两位负责人。
记者:请问杨总,您对是否会考虑使用圆环病毒疫苗?
杨厚德(广西柯新源):我们决定使用,作为种猪场,首先要考虑的是客户端利益,很多客户路途遥远,长途运输会造成种猪的应激,而应激会诱发圆环病毒病的发病。另外,该疫苗是灭活苗,安全放心,如果是活苗我们肯定会慎重考虑了。
记者:请问杨总,您如何看待我国的圆环病毒病?
杨义发经理(海南罗牛山):我们对圆环病毒病接触不多,但是我认为该病是中国养猪业中非常重要的一种传染病,能够有疫苗产品进行控制,对养猪业肯定是好事。
记者:请问索总,如果猪场生产稳定,没有显著的圆环病毒病临床表现,您是否会考虑采用疫苗进行圆环病毒免疫保护?
索绪峰经理(海南罗牛山):猪场首先考虑到是投入产出比,对于亚临床的影响,进行免疫到底能够带来多少效益,可以小范围试验,考察一下。
除我们采访到的与会代表,很多企业已经确定使用意向。多年来,应对猪圆环病毒病始终没用特效的方法与措施,现在,安全高效的疫苗登陆我国市场,对广大养殖企业来说是一大利好消息。本刊将与广大读者一起继续关注该疫苗的应用效果与市场前景。