解放军第323医院中心实验室 (西安 710054)
李志清 宫占威* 费晋秀 石胜刚* 刘 涛 冯晓妍* 杨 广
莱姆病(Lyme disease)是由伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi,BB)感染引起的一种蜱媒自然疫源性疾病。该病由于发病率高、传播快和致残率高的多器官多系统受损性疾病,在美国称为第二“艾滋病”,被列为世界性公共卫生问题[1]。已引起国内外有关学者的重视与研究[2~4],迄今莱姆病在世界五大洲 30多个国家均有报道,我国自1986年在黑龙江省海林县首次证实有莱姆病以来,先后在29个省市自治区发现有莱姆病的存在[5~6]。然而莱姆病在陕西省的情况不明,为弥补这一不足,2008年 5月~ 2009年 7月作者对陕西省北部、南部、西部地区的部分林区人群开展莱姆病血清流行病学调查研究,现将结果报告如下。
1 选 点 调查点选在陕西省富县张家湾镇林区、南郑县碑坝林场、陇县八渡镇林区,具备良好的莱姆病生态学与生物学基础。
2 材 料 血清:采自上述三个样地长期居住(5年以上)的林业工人和山区农民的上臂肘静脉血液;试剂:BB抗原片由中国疾病控制中心提供。羊抗人荧光第二抗体购自上海沪峰生物技术公司;荧光显微镜(日本)由兰州军区疾病预防控制中心提供。
3 方 法 采用间接免疫荧光(IFA)方法检测人群莱姆病血清抗体[4],将血清用 PBS(pH7.4)从 1∶16开始倍比稀释,将稀释后的血清滴于抗原片孔,37℃孵育 45min。 PBS中冲洗2次后置于蒸馏水中静置 1min。用吹风机吹干抗原片后,点上羊抗人荧光抗体 Ig G(二抗),37℃孵育 45min PBS中冲洗 2次后置于蒸馏水中静置1min。吹干,荧光显微镜下观察。判断标准:莱姆病 BB血清效价≥1∶64为血清抗体阳性,对重复检测一次阳性者为本次调查莱姆病 BB血清抗体阳性者。
4 统计学处理 率的比较采用χ2检验。
1 不同地区人群莱姆病 BB血清抗体检测:在三个样地共检测人群莱姆病 BB血清抗体194人份,阳性13人份 ,阳性率 7.51%,见表 1。
表1 不同地区人群莱姆病BB血清抗体检测结果
2 不同职业人群莱姆病 BB血清抗体检测:对不同职业人群莱姆病BB血清抗体检测结果显示,林业工人居首位(阳性率 10.6%),山区农民次之(阳性率 6.57%),林业机关干部居第三位(阳性率4.0%),林场家属和山区教师本次未检出阳性结果,见表 2。
3 不同年龄人群莱姆病 BB血清抗体检测 :对不同年龄组人群莱姆病BB血清抗体检测结果显示,61~ 70岁年龄组人群莱姆病 BB血清抗体阳性率最高(阳性率 27.27%),31~ 40岁年龄组次之 (阳性率 8.33%),21~ 30岁、41~ 50岁和 51~ 60岁三个年龄组居第三位(阳性率分别为3.84%、4.83%和3.57%),其余两个年龄组未检出阳性,见表 3。
表2 不同职业人群血清莱姆病抗体检测结果
表3 不同年龄组人群莱姆病 BB血清抗体检测结果
4 不同性别人群莱姆病 BB血清抗体检测:对男性人群检测 111份,阳性9人份,阳性率8.10%,女性人群检测 83份,阳性 4人份,阳性率 4.84%,男性高于女性,经统计学处理(P<0.05),两者有显著性差异。
选择的三个调查点分别位于陕西北部、南部和西部,这些地区是陕西省的林业基地,植被比较原始,呈山地针阔混交森林景观。栖息大量的野生动物、小型啮齿动物和家畜动物,吸血昆虫构成复杂,尤其蜱类密度很高,具备良好的莱姆病生态学和生物学基础。事实上已从富县张家湾镇林区、南郑县碑坝林场、陇县八渡镇林区等三个样地人群中均检测出莱姆病 BB血清抗体阳性 ,阳性率分别为 8.33%(6/113)、8.88%(3/36)和7.51%(4/45),虽然三样地人群莱姆病BB血清抗体阳性率无显著性差异(P>0.05),但他首次证实这三个样地存在莱姆病的自然感染。
从职业分布看,以林业工人的莱姆病自然感染率最高,阳性率 10.6%(7/66),山区农民次之,阳性率 6.57%(5/76),林业机关干部居第三位,阳性率 4.0%(1/25),林场家属和山区教师本次未检出阳性结果。这说明林业工人和山区农民长期处于蜱暴露环境中有关。 61~ 70岁年龄组人群莱姆病 BB血清抗体阳性者居首位,阳性率 27.27%(3/11),实际上这 3例阳性者均为莱姆病晚期关节损伤型患者;31~40岁年龄组次之 ,阳性率 8.33%(5/60),21~ 30岁、 41~ 50岁和 51~60岁三个年龄组居第三位阳性率分别为 3.84%、4.83%和 3.57%(1/26、3/62和 1/28),其余两个年龄组未检出阳性者。从不同性别人群莱姆病BB血清抗体检测结果看,男性自然感染率高于女性。可以看出,除晚期患者阳性者外,以青壮年男性自然感染率最高,这与甘肃省不同年龄组人群莱姆病自然感染率相一致(刘增加,1990)。由此进一步说明,莱姆病是通过蜱叮咬而感染的一种自然疫源性疾病,不同职业、不同性别和不同年龄组自然感染率的高低与蜱暴露的频率及持续时间长短密切相关。
本次调查研究证实,在陕西北部、南部和西部各地区均存在有莱姆病的自然感染,并依据流行病学资料、临床表现、体查和实验室各种检查,首次确立有莱姆病患者10余例。因此,提示当地医务人员在进行临床疾病的诊断中,应注意莱姆病的鉴别诊断,做到早发现、早诊断和早治疗,控制并发症的出现。同时,应重视林区和广大山区农村莱姆病知识的普及工作,作好宣传教育,提高当地人群的防护意识,减少蜱暴露及受蜱的叮咬机率,预控莱姆病的发生与流行。
致谢 本课题承蒙兰州军区疾病预防控制中心虫媒病与媒介生物防治研究所刘增加研究员技术指导,并审修全文;张芳助理研究员协助实验室工作,谨此一并致谢。
[1]刘增加.莱姆病.兰州:兰州大学出版社,1990:4-5页.
[2]刘增加,孙毅,何静 ,等.中国西部地区生态环境保护与莱姆病传播关系的研究 [J].中华流行病学杂志,2008,29(5):449-454.
[3]潘 亮,于恩蔗,林金瑞,等.福建省莱姆病的发现.中华流行病学杂志,1991,12(1):1.
[4]冯方波,张薇芬,周国萍,等.北京地区莱姆病的发现及临床研究.中华流行病学杂志,1994,15(1):10-13.
[5]刘增加.我国莱姆病流行病学研究现状与展.中国公共卫生,2002,18(增刊 ):34-37.
[6]万康林,张哲夫 ,窦桂兰,等.中国 29个省市自治区动物莱姆病的初步调查 [J].中国媒介生物学与防治杂志,1998,9(5):366-371.