市售荷叶药材中荷叶碱含量调查*

朱晓月，刘 虹，郝 彧，曾 森，张德芹，吴 帅

荷叶（Folium nelumbinis）为睡莲科植物莲（Nelumbo nucifera Gaertn）的干燥叶。夏、秋两季采收，在中国湖南、湖北、浙江、江苏等地均有广泛的种植。荷叶中含有碳水化合物、脂质、蛋白质、无机盐、生物碱、黄酮、精油、鞣质等多种成分，其中生物碱和黄酮是荷叶的主要活性成分。2005版《中华人民共和国药典》规定，荷叶药材以荷叶碱为含量测定指标，其含量不得低于0.10%。因此，为了了解现有市售荷叶药材的合格率，笔者依据药典，以荷叶药材中荷叶碱为指标成分，对24批市售荷叶药材进行含量测定[1-3]。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪：Agilent1100色谱系统（VWD检测器）；数显恒温水浴锅（HH-2，国华电器有限公司）；电子天平（METTLER TOLEDO AX-205）；微孔滤膜（0.45 μm）。

1.2 试药 24批市售荷叶药材（样品保存于天津中医药大学中医药研究中心药学部，经天津中医药大学中医药研究院郭俊华副研究员鉴定）；荷叶碱对照品（批号：121322-200301，中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），甲醇（分析纯，天津协和昊鹏色谱科学技术有限公司），乙腈（HPLC/SPECTRO，TEDIA），三乙胺（分析纯，天津市化学试剂三厂），冰醋酸（分析纯，天津市北方天医化学试剂厂），超纯水（经Millipore纯水系统处理）。

2 方法与结果

荷叶药材中荷叶碱的含量测定方法参考2005版中国药典[1]。

2.1 对照品溶液的制备 取荷叶碱对照品适量，精密称定，用甲醇配制成浓度为0.015 4 g/L的荷叶碱对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备 取荷叶药材粗粉（过40目筛）约0.5 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，置恒温水浴锅上加热回流2.5 h，放冷，用甲醇补足损失质量，摇匀，微孔滤膜（0.45 μm）滤过，即得。

2.3 色谱条件色谱柱：PhenomsilC18（4.6mm×250mm，5 μm）；流动相：乙腈-水-三乙胺-冰醋酸（27∶70.6∶1.6∶0.78）；检测波长：270 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：25℃。

2.4 标准曲线的绘制 取荷叶碱对照品适量，精密称定，用甲醇配成系列浓度的对照品溶液。以峰面积（Y）为纵坐标，进样量（X）为横坐标作图，得荷叶碱回归方程为Y=3.22X+12.02，r=0.999 8，线性范围为 9.56×10-3～0.478 μg。

2.5 样品测定 取对照品溶液5 μL，供试品溶液各20 μL，依次注入高效液相色谱仪，测定荷叶碱峰面积，按外标一点法计算荷叶碱含量。见表1，图1。

表1 样品测定结果

图1 荷叶碱对照品及荷叶药材HPLC图（1—荷叶碱）

由测定结果可见，在所测24个荷叶药材样品中，2个样品合格，22个样品不合格，合格率为8.3%。

3 讨论

3.1 应规范荷叶药材的种植 实验中测定的24批荷叶药材，只有2批合格，合格率仅为8.3%。由此可见，目前市售荷叶药材中荷叶碱含量普遍低于药典规定。因此，为了保证荷叶药材的质量，应建立符合GAP标准的荷叶种植基地，规模化、规范化种植荷叶。

3.2 关于单一指标成分含量测定的科学性 荷叶中含有多种生物碱类物质，现代药理学研究表明，荷叶生物碱具有降脂减肥、抑菌、抗病毒、抗氧化等活性[4]。而荷叶碱只是荷叶总生物碱中的一个化学成分，荷叶碱的含量并不能全面代表荷叶药材的质量。虽然多指标成分的含量测定[5]可能是比较有效的质控途径，但是缺少相关中药化学对照品、荷叶中其他生物碱成分多含量较低的问题又使多指标的测定较难实现；而且增加了中药生产企业的检测成本。因此笔者建议在荷叶药材的含量测定中增加荷叶总生物碱的测定，从而更真实、全面的反映荷叶药材的质量。应建立符合中医药特点的质量标准体系，指标成分的含量测定结合大类成分的含量测定不失为一种经济有效的方法。

3.3 关于中药的入药形式 传统的中药入药方式为不论其指标成分（或活性成分）含量高低，均以处方中的药材量入药。药材中指标成分含量的波动势必影响到中成药的质量。但作为药品，必须要求其质量稳定、一致；但是作为中成药原料的中药材大都来源于生物，不管是野生的，还是栽培的，甚至是GAP基地生产的，其质量不可能稳定、一致。因此，应该改变传统观念，提倡以中药提取物的形式入药（投料量按活性成分的含量计算），保证中成药的质量稳定可控。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:195-198.

[2]朱秀萍,徐 翔.荷叶生物碱研究进展[J].中国药房,2008,19(6):459-461.

[3]孔文琦,李严巍.荷叶活性成分及药理活性研究进展[J].中药信息与研究,2005,7(6):22-24.

[4]肖桂青,卢向阳,田 云，等.荷叶生物碱药理作用的研究进展[J].湖南农业科学,2006,(2):80-81.

[5]吴 昊,刘 斌,王 伟，等.HPLC法测定不同市售荷叶药材中4种生物碱类成分的含量[J].北京中医药大学学报,2008,31(7):479-481.